01/01/2008
A Secretária de Vigilância Sanitária do Ministério da Saúde, no uso de suas
atribuições legais e
Considerando:
A necessidade do constante aperfeiçoamento das ações de controle sanitário
na área farmacêutica visando à proteção da saúde da população;
A importância de compatibilizar a legislação nacional, com base nos
instrumentos harmonizados no MERCOSUL relacionados às Soluções de Grande
Volume - SPGV, Resoluções GMC nº 52/94 e 57/96;
Que é indispensável atualizar os Regulamentos Técnicos sobre Soluções
Parenterais de Grande Volume, resolve:
Art. 1º Aprovar o Regulamento Técnico de Soluções parenterais de Grande
Volume - SPGV e seus Anexos:
ANEXO A - Boas Práticas de Fabricação.
ANEXO B - Roteiro para Inspeção
ANEXO C - Especificações e Controle de Matérias Primas
ANEXO D - Recipiente de Vidro
ANEXO E - Recipientes de Plásticos
ANEXO F - Especificações e Controle de Produto Acabado
ANEXO G - Transporte
ANEXO H - Recebimento, Armazenamento e Distribuição
ANEXO I - Validação do Processo de Esterilização pelo Valor
ANEXO J - Tampas de Elastômero
ANEXO L - Estabilidade
ANEXO M - Ensaios Biológicos
Art. 2º Esta Portaria entra em vigor na data de sua publicação, ficando
revogadas as Portaria nº 09, de 18 de dezembro de 1991, 16 e 17 de 27 de
janeiro de 1992, e demais disposições em contrário.
MARTA NÓBREGA MARTINEZ
REGULAMENTO TÉCNICO - SOLUÇÕES PARENTERAIS DE GRANDE VOLUME - SPGV
1. OBJETIVO
2. NORMAS E DOCUMENTOS DE REFERÊNCIA
3. DEFINIÇÕES
4. CONDIÇÕES GERAIS
5. CONDIÇÕES ESPECÍFICAS
6. ESTERILIZAÇÃO
7. PRODUTO ACABADO
8. RÓTULOS
9. DATA DE VENCIMENTO
10. EMBALAGEM
11. DOCUMENTAÇÃO
12. AMOSTRAS DE REFERÊNCIA
13. ARMAZENAMENTO
14. TRANSPORTE
15. RECEBIMENTO, ARMAZENAMENTO E DISTRIBUIÇÃO
1. OBJETIVO
Este Regulamento (RT) estipula as condições que devem ser cumpridas na
produção e controle da qualidade de Soluções Parenterais de Grande Volume.
2. NORMAS E DOCUMENTOS DE REFERÊNCIA
As metodologias e especificações não mencionados no presente documento devem
estar fundamentadas, em primeiro lugar, na FARMACOPÉIA EUROPÉIA, em segundo
lugar, na FARMACOPÉIA AMERICANA e, por último, nas FARMACOPÉIAS dos países
do MERCOSUL.
As monografias constantes nos anexos deste documento devem ser atualizadas
quando existirem modificações significativas nas FARMACOPÉIAS citadas.
3. DEFINIÇÕES
3.1 Soluções Parenterais de Grande Volume (SPGV): Soluções em base aquosa ,
estéreis, apirogênicas, acondicionadas em recipiente único com capacidade de
100 ml ou mais, esterilizadas terminalmente.
Estão incluídas nesta definição as soluções para administrações endovenosas,
soluções para irrigação e soluções para diálise peritoneal. O termo
PARENTERAL DE GRANDE VOLUME não inclui nenhum produto de origem biológica.
4. CONDIÇÕES GERAIS
4.1 As empresas que desenvolvem atividades relacionadas aos produtos
compreendidos neste Regulamento, devem obter, previamente, Autorização de
Funcionamento junto à Autoridade Sanitária Nacional competente sendo que
estas atividades devem
ser realizadas sob a responsabilidade Técnica de um profissional habilitado
de acordo com a legislação vigente no País.
4.2 No caso dos produtos importados, o importador e distribuidor são
responsáveis legais e técnicos pelo cumprimento deste Regulamento.
4.3 Os estabelecimentos, seus equipamentos e instalações, assim como o
processo de fabricação, devem responder as Boas Práticas de Fabricação
recomendadas pelo Anexo A, deste Regulamento.
4.4 Cada produto a ser fabricado ou importado deve estar registrado junto à
Autoridade Sanitária Nacional competente.
5. CONDIÇÕES ESPECÍFICAS
Para matérias-primas e material de acondicionamento/embalagem são
estabelecidos requisitos que são assinalados em cada caso, nos anexos
específicos.
5.1 Matérias-primas
A água e demais matérias-primas utilizadas na produção de Soluções
Parenterais de Grande Volume devem responder aos requisitos de qualidade
especificados no Anexo C, deste Regulamento.
5.2 Material de acondicionamento/embalagem
O material de acondicionamento/embalagem para Soluções Parenterais de Grande
Volume pode ser:
5.2.1 Vidros
O vidro utilizado para acondicionamento/embalagem de Soluções Parenterais de
Grande Volume deve cumprir com os requisitos estabelecidos no Anexo D, deste
Regulamento.
5.2.2 Plástico
O plástico utilizado para o acondicionamento/embalagem de Soluções Parentais
de Grande Volume deve cumprir os requisitos estabelecidos no Anexo E, deste
Regulamento.
A utilização de qualquer plástico não considerado no Anexo E, na fabricação
de recipientes para Soluções Parenterais de Grande Volume, depende do
cumprimento das exigências do referido Regulamento, assim como da aprovação
do material pela Autoridade Sanitária Nacional competente.
6. ESTERILIZAÇÃO
6.1 Processo de esterilização
Os processos de esterilização das Soluções Parenterais de Grande Volume
devem ser realizados sobre o produto envasado e fechado empregando calor em
condições específicas de tempo, temperatura e pressão, de modo à assegurar
uma probabilidade de sobrevida microbiana não superior a 1 x 10.
6.2. Validade do processo
Os processos de esterilização empregados devem ser validados em forma
periódica. A validade de um processo de esterilização deve incluir controle
biológico, distribuição de temperatura e penetração de calor, de acordo com
o Anexo I, deste Regulamento.
6.3 Controle de processo
para o controle de processo de esterilização devem ser empregados os
seguintes procedimentos:
6.3.1 Controle de temperatura com termômetro de mercúrio ou equivalente,
calibrado no mínimo uma vez a cada 3 meses. Devem ser descartados as
termômetros que apresentarem variações maiores de 0,5°C em relação ao
termômetro padrão.
6.3.2 Controle de pressão com manômetro ou equivalente que deve ser
calibrado no mínimo uma vez a cada 3 meses, de acordo com as especificações
do equipamento.
6.3.3 Controle microbiológico em cada ciclo de esterilização indicadores
microbiológicos.
6.3.4 Definição do número de lote com identificação do equipamento de
esterilização e do ciclo no qual se realiza a esterilização. Sempre que um
lote for subdividido nesta fase, cada fração do lote deve ser devidamente
identificada.
7. PRODUTOS ACABADOS
Os produtos acabados devem ser submetidos controles físicos, químicos,
biológicos e microbiológicos de acordo com os requisitos estabelecidos Anexo
D, deste Regulamento.
8. RÓTULOS
8.1 Requisitos gerais
Os rótulos, sejam aderidos ou impressos em forma indelével sobre a
superfície dos frascos, devem conter no mínimo os seguintes dados no idioma
do país em que circula o produto:
Denominação Comum Internacional (DCI)
competente.
8.2 Tintas e colas
As tintas usadas nos processos de impressão dos frascos assim como as colas
usadas aderir os rótulos, não devem conter substâncias tóxicas que possam
migrar para a solução.
9. DATA DE VENCIMENTO
A data de vencimento das Soluções Parenterais de Grande Volume deve ser
determinada por estudos de estabilidade indicados no Anexo L, do presente
Regulamento e, repetidos diante de modificações que possam afetar a
composição, qualidade e/ou estabilidade do produto.
10. EMBALAGEM
Os materiais empregados para embalagem das Soluções Parentais de Grande
Volume, devem ser adequados para proteger e manter o produto na condições de
transporte, de acordo com o anexo A deste Regulamento.
11. DOCUMENTAÇÃO
Os documentos os quais se registram os procedimentos de produção e controle
devem ser arquivados pelo fabricante por um período de 6 meses, a partir da
data de vencimento do produto
12. AMOSTRAS DE REFERÊNCIA
De cada lote de fabricação devem ser conservadas amostras de referência,
devidamente identificadas, no mínimo até 30 dias após a data de vencimento.
A quantidade de amostras deve ser o dobro das unidades requeridas para
efetuar todas as análises prescritas com exceção dos testes de esterilidade
e pirogênios.
13. ARMAZENAMENTO
As Soluções Parenterais de Grande Volume, devem ser armazenadas em local
seco e limpo, livre de insetos e roedores e devem cumprir com as indicações
quanto ao empilhamento das caixas e paletes, de modo a não alterar a
identidade, composição e pureza do produto, conforme o estabelecido no Anexo
A deste Regulamento.
14. TRANSPORTE
As Soluções Parenterais de Grande Volume, devem ser transportadas de acordo
com a indicação no anexo G deste Regulamento.
15. RECEBIMENTO, ARMAZENAMENTO E DISTRIBUIÇÃO
No recebimento, armazenamento e distribuição de SPGV devem seguir os
procedimentos descritos no Anexo H deste Regulamento.
ANEXO A
BOAS PRÁTICAS DE FABRICAÇÃO - SOLUÇÕES PARENTERAIS DE GRANDE VOLUME - SPGV
A-1 OBJETIVO
A-2 DEFINIÇÕES
A-3 CONDIÇÕES GERAIS
A-4 INSPEÇÕES
A-1 OBJETIVO
A-1.1. Este Regulamento fixa procedimentos de Boas Práticas de Fabricação a
serem observados na produção, controle de quantidade, acondicionamento,
armazenamento e distribuição de Soluções Parenterais de Grande Volume.
A-2 DEFINIÇÕES
Para efeito deste Regulamento são adotadas as definições de A-2.1 a A-2.22.
A-2.1 Boas Práticas de Fabricação (BPF)
Conjunto de recomendações escritas que tem por objetivo a definição e
padronização de procedimentos de fabricação controle e qualidade, condições
de instalações de uma empresa, seus equipamentos e respectiva manutenção,
aspecto e condições de armazenamento de Soluções Parenterais de Grande
Volume, com o objetivo de garantir que o produto cumprirá as especificações
estabelecidas com relação à sua atividade, pureza, eficácia e inocuidade.
A-2.2 Soluções Parenterais de Grande Volume
Solução em base aquosa, estéril e apirogênica, acondicionada em recipiente
único com um a capacidade de 100 ml ou mais, esterilizada terminalmente.
Estão incluídas nesta definição as infusões endovenosas, soluções para
irrigação e soluções para diálise peritoneal. O termo Parenteral de Grande
Volume não inclui nenhum produto de origem biológica.
A-2.3 Controle de Qualidade
Conjunto de operações (programação, coordenação e execução) com o objetivo
de verificar a conformidade do produto com as especificações estabelecidas.
A-2.4 Fabricante
Pessoa jurídica que fabrica SPGV, com autorização prévia de funcionamento
junto à Autoridade Sanitária Nacional competente.
A-2.5 Fabricação
Todas as operações necessárias para a obtenção dos produtos compreendidos
neste Regulamento.
A-2.6 Lote
Quantidade de SPGV que se produz em um ciclo de fabricação cuja
característica essencial é a homogeneidade. Para o propósito de ensaio de
esterilidade, lote é conjunto de frascos preparados de tal forma que o risco
de contaminação pode ser considerado o mesmo para cada unidade, sendo
normalmente uma carga do autoclave.
A-2.7 Número de lote
Designação impressa no frasco de cada unidade e na embalagem do produto,
constituída por combinações de letras, números ou símbolos, que permita
identificar o lote a que este pertence, e em caso de necessidade, localizar,
números ou símbolos, que permita identificar o lote que este pertence, e em
caso de necessidade, localizar e rever todas as operações de produção,
inspeção, controle, embalagem, armazenamento e distribuição do produto em
questão.
A-2.8 Garantia de Qualidade
Esforço organizado e documento dentro de uma empresa com o sentido de
desenvolver, produzir, manter e assegurar as características do produto, de
modo que cada unidade do mesmo esteja de acordo com suas especificações.
A-2.9 Matéria Prima
Substância ativa ou inativa que se emprega na fabricação de SPGV.
A-2.10 Produto semi-elaborado
Substância, mistura ou SPGV que ainda se encontre em processo de fabricação.
A-2.11 Produto acabado
Produto com apresentação definitiva, contendo ingrediente(s) ativo(s)
associado(s) ou não a substâncias auxiliares, atendendo às exigências legais
e com aprovação final do Controle de Qualidade do fabricante.
A-2.12. Esterilização
Processo de aplicação de calor úmido ao produto já envasado e fechado, em
condições específicas de tempo, temperatura e pressão, que garanta um
probabilidade de sobrevida não superior a 1 x 10 -6
A-2.13 Tempo de esterilização
Período de tempo, em minutos, a uma determinada temperatura e pressão,
durante o qual o produto deve ser exposto ao calor úmido, a fim de cumprir a
exigência do item A-2.12.
A-2.14 Estudo de distribuição de calor
Estudo que tem por objetivo verificar e assegurar que a temperatura no
interior do autoclave se distribua uniformemente durante o processo de
esterilização.
A-2.15 Estudo de penetração de calor
Estudo que tem por objetivo verificar a quantidade de calor recebida pela
SPGV durante o processo de esterilização.
A-2.16 Quarentena
Retenção temporária de matérias-primas, produtos semi-elaborados ou produtos
acabados, com a proibição de serem utilizados antes que sejam aprovados par
uso pelo Controle de Qualidade.
A-2.17 Material de envasamento
Recipiente de vidro ou plástico e tampas de elastômero que atendem ao
estabelecido nos Anexos D, E e J.
A-2.18 Área de ambiente controlado
Área onde os fatores ambientais e de qualidade do ar, com relação ao número
de partículas e de microorganismos, são controlados.
A-2.19 Partículas estranhas
Partículas móveis insolúveis, visíveis a olho nu, diferente das bolhas de
gás.
A-2.20 Arquivo mestre
Conjunto de documentos contendo o projeto, a formulação, as especificações,
os procedimentos de fabricação, os requisitos de controle de qualidade e os
procedimentos de acondicionamento, de embalagem e de armazenamento do
produto.
A-2.21 Arquivo histórico
Conjunto de documentos contendo os requisitos de produção e controle de cada
lote de fabricação, em forma ordenada, arquivado sob a responsabilidade do
Controle de Qualidade.
A-2.22 Filtro HEPA
Filtro para ar de alta eficiência com a capacidade de reter 99,97% das
partículas maiores de 0,3 µm de diâmetro.
A-3 CONDIÇÕES GERAIS
A-3.1 Organização de pessoal
A-3.1.1 Estrutura organizacional e de pessoal
A.3.1.1.1 Todo fabricante de SPGV deve possuir uma estrutura organizacional
e de pessoal suficiente para garantir que os produtos por ele fabricados
estejam de acordo com os requisitos deste Regulamento.
A-3.1.1.2 Toda empresa produtora de SPGV deve possuir um sistema de Controle
de Qualidade que exerça suas atividades plenamente, de modo que garanta a
qualidade dos produtos fabricados.
A-3.1.1.3 Todo fabricante deve adotar e implementar procedimento referente à
qualidade formalmente estabelecidos e documentados e que tenha sido
aprovados especialmente para o produto a ser fabricado.
A-3.1.1.4 O responsável legal pelos produtos fabricados será um
Farmacêutico. Os responsáveis pelo Controle de Qualidade e de produção devem
ser profissionais qualificados, com conhecimento nas áreas de química,
físico-química, bioquímica, microbiologia, farmacologia, farmacotécnica,
tecnologia farmacêutica e toxicologia. Devem também possuir experiência
prática no processo de produção e de Controle de Qualidade, para o
cumprimento de suas atribuições com discernimento e independência
profissional.
A-3.1.2 Responsabilidade do Controle de Qualidade
O responsável pelo Controle de Qualidade tem autoridade para:
a) aprovar ou rejeitar todas as matérias-primas, materiais auxiliares de
fabricação, materiais de embalagem e rótulos, assim como os produtos
semi-elaborados e acabados;
b) rever e revisar, em qualquer momento, os registros de produção a fim de
assegurar que não foram cometidos erros e, se estes ocorreram, que tenham
sido devidamente corrigidos e investigadas suas causas;
c) acompanhar cada processo de fabricação para certificar que os métodos de
produtos preconizados estão sendo seguidos, assim com verificar se os
limites de segurança, em cada etapa de fabricação, estão de acordo com as
especificações;
d) identificar, recomendar e apresentar soluções para os problemas de
qualidade, assim como supervisionar e implementar estas soluções;
e) verificar os procedimentos utilizados nas inspeções, com relação a sua
adequação e execução;
f) realizar estudos de estabilidade do produto acabado, a fim de estabelecer
sua data de vencimento;
g) fiscalizar tecnicamente a aplicação deste Regulamento nos possíveis
contratos de fabricação com terceiros.
A-3.1.3 Requisitos de pessoal, treinamento e higiene
A-3.1.3.1 O fabricante deve dispor de pessoal qualificado e em quantidade
suficiente para que todas as operações sejam realizadas corretamente.
A-3.1.3.2 Todo o pessoal implicado na fabricação, processamento, embalagem,
transporte interno, armazenamento e controle de qualidade, deve receber
instruções e treinamento para o perfeito desempenho de suas funções
específicas. Periodicamente devem ser cumpridos programas de treinamento e
reciclagem que proporcionem ao pessoal o entendimento completo de suas
atividades e a importância do cumprimento das BPF. A execução de tais
programas deve ser documentada. A realização destes programas deve ser
sempre de forma contínua e documentada, e deve ser dado consciência ao
pessoal da importância do cumprimento das BPF.
A-3.1.3.3 Os responsáveis pela Qualidade devem estar informados de todos os
inconvenientes que podem ser encontrados na execução de cada operação de
produção e de controle.
A-3.1.3.4 Todo pessoal responsável pela supervisão de produção,
processamento, embalagem, transporte interno, armazenamento e controle de
qualidade, deve receber instruções e treinamento, e ter experiência para
garantir que o produto cumpra as especificações de identidade, pureza e
concentração.
A-3.1.3.5 Deve haver um número adequado de pessoas qualificadas para
desempenhar e supervisionar todas as etapas mencionadas anteriormente.
A-3.1.3.6 O pessoal em contato com o produto ou com o ambiente de
fabricação, deve apresentar condições de saúde e higiene de modo a evitar
contaminação do produto. Esse pessoal deve ser submetido periodicamente a
exames médicos e em caso de haver portadores de enfermidades
infecto-contagiosas, devem ser afastados temporariamente ou definitivamente
de suas atividades. O pessoal deve ser instruído para informar a seus
supervisores qualquer alteração em seu estado de saúde.
A-3.1.3.7 As pessoas implicadas na produção e controle de qualidade têm que
dispor de uniformes que devem ser tocados para garantir a higiene
apropriada.
A-3.1.3.8 Os uniformes devem ser adequados ao processo e aso lugares de
trabalho, de tal maneira que assegure a proteção do produto frente à
qualquer contaminação.
A-3.1.3.9 A colocação dos uniformes de calçado, assim como a higiene prévia
à entrada nas áreas de envasamento e controle microbiológico, devem ser
realizadas em lugares especificamente designados para vestuário, de acordo
com a exigência estipulada no item A-3.2.2.
A-3.1.3.10 O acesso às áreas de ambiente controlado deve ser limitado a
pessoas devidamente treinadas, de modo a manter a integridade ambiental.
A-3.1.3.11 O pessoal de embalagem e de transporte interno, assim como os
auxiliares indiretos (manutenção), devem usar uniformes igualmente limpos.
A-3.1.3.12 Qualquer pessoa que evidencie uma condição inadequada de higiene
ou uma vestimenta que possa afetar o produto, deve ser afastada de suas
atividades até que tal condição seja corrigida.
A-3.2. Edificações e controle ambiental
A-3.2.1 Áreas - Características gerais
A-3.2.1.1 As áreas de fabricação de SPGV devem ser de dimensões adequadas
para facilitar o máximo da limpeza, a manutenção e as operações de
processamento.
A-3.2.1.2 Todas as áreas envolvidas direta e indiretamente com a fabricação
da SPGV devem apresentar pisos, paredes e revestimentos lisos, impermeáveis
e facilmente laváveis. Nas áreas onde haja janelas, estas devem ser
protegidas com telas para evitar a entrada de insetos, aves e roedores.
A-3.2.1.3 Cada área deve ter espaço suficiente para a colocação ordenada de
equipamentos e materiais, a fim de permitir um fluxo racional de trabalho e
manejo seguro das operações relacionadas no item A-3.2.1.5.
A-3.2.1.4 Cada área deve ser perfeitamente individualizada para que seja
mínimo de risco de contaminação cruzada.
A-3.2.1.5 As operações devem ser realizadas dentro de áreas definidas
especialmente e de dimensões adequadas para:
a) recepção de matérias-primas, materiais de acondicionamento e rótulos;
b) quarenta (matérias-primas, materiais de acondicionamento e rótulos)
c) armazenamento de matérias-primas, materiais de acondicionamento e
rótulos, aprovados;
d) armazenamento de matérias-primas, materiais de acondicionamento e rótulos
rejeitados, para sua devolução ou destruição;
e) produção propriamente dita;
f) envasamento;
g) esterilização
h) rotulagem e embalagem
i) quarentena de produtos em processo;
j) armazenamento de produtos acabados e expedição;
k) controle de qualidade.
A-3.2.1.6 Atividades de alimentação, fumo e recreação devem ser restritas às
áreas isoladas, limitadas e determinadas.
A-3.2.2 Áreas de ambiente controlado
Em áreas de ambiente controlado, as paredes, pisos, tetos, acessórios e
divisórias, devem ter superfícies lisas e impermeáveis para permitir a
limpeza rigorosa. Devem ser construídas com material que resista a
rachaduras, faíscas, oxidação e outro tipo de deterioração. Estas áreas
devem ter temperatura e umidade controladas, fornecimento de ar filtrado
pressão positiva, com filtro de eficiência adequada, sistema de limpeza e
desinfecção das salas e dos equipamentos, tubulações de água e ar
comprimido, assim como os dutos elétricos identificados e instalados de modo
a evitar ao máximo, qualquer acúmulo de impurezas. Devem ser previstas áreas
especificamente destinados par a colocação de uniformes e calçados para a
entrada na área de ambiente controlado. Sobre a linha de enchimento e
operações de controle microbiológico, é exigido um ambiente com área classe
100 (classe A), com contagem automática máxima de 3,5 partículas de 0,5 µm,
e nenhuma partícula maior que 5,0µm, por, litro de ar.
Nas áreas destinadas a pesagem e manipulação, é exigido um ambiente com área
classe 100.000 (classe D), com contagem automática máxima de 3.500
partículas de 0,5µm a 5,0µm, ou maiores de 5,0µm, por litro de ar.
A-3.2.3 Reservatório de água potável
Os reservatórios de água devem ser devidamente protegidos, a fim de evitar
contaminações por microorganismos, insetos ou aves. Devem ser construídos
com material adequado e impermeabilizados para evitar infiltrações,
facilitar limpezas periódicas e inspeções.
A-3.2.4 Controle Ambiental
Deve ser realizado um rigoroso controle ambiental para evitar a contaminação
dos produtos e atender as condições exigidas para a execução das operações
mencionadas no item A-3.1.4. O produto para o controle ambiental deve conter
como mínimo as seguintes variáveis: pressão e filtração do ar, aeração,
temperatura, unidade do ar, de superfície e das áreas de trabalho.
A-3.2.5 Iluminação
As instalações de iluminação artificial, nas áreas de produção e
envasamento, devem ser construídas de modo a prevenir qualquer acúmulo de
poeira e facilitar a limpeza. Também devem ser protegidas para evitar
ruptura e dispersões de fragmentos.
A-3.2.6 Limpeza
A-3.2.6.1 Todas as áreas de produção mencionadas no item A-3.2.1,
imediatamente depois do término de cada jornada de trabalho, devem ser
limpas com água e sabão, desinfetadas, mantidas limpas, em condições
sanitárias adequadas e estar livres de infestação por roedores, pássaros e
insetos.
A-3.2.6.2 Os procedimentos de limpeza e higienização, bom como sobre os
raticidas, inseticidas, fungicidas e desinfetantes, devem ser rigorosamente
cumpridos. O uso destes agentes deve ser registrado por escrito e assinado
pelo responsável pela operação.
A-3.2.6.3 detritos e resíduos industriais, tais como agentes químicos,
resíduos mecânicos e outros, eventualmente resultantes do processamento do
produto, devem ser eliminados de forma segura para evitar contaminação
ambiental.
A-3.2.7 Área de esterilização
As áreas de esterilização devem ser projetadas e equipadas adequadamente, ou
em sua falta, adotar sistema de codificação conveniente para evitar a
confusão e produtos esterilizados e não esterilizados.
A-3.3 Equipamentos
A-3.3.1 Localização e instalação
Todo equipamento utilizado no processo de fabricação deve ser localizado e
instalado de modo a facilitar sua operação, manutenção, ajuste,
calibração/aferição e limpeza. Todos os equipamentos de produção, incluídos
os de medição, utilizados na produção e nos ensaios dos produtos, que sejam
mecânicos, pneumáticos ou manuais devem ser apropriados para seus propósitos
e capazes de reproduzir resultados válidos e devem ser inspecionados
rotineiramente, aferidos e/ou calibrados seguindo procedimento e
especificações escritas e devidamente registradas.
A-3.3.2 Procedimento de limpeza
A-3.3.2.1 Devem existir e estar disponíveis para o pessoal responsável,
todos os cronogramas e procedimento escritos de limpeza, conforme os
requisitos do processo.
A-3.3.2.2 Devem existir procedimentos escritos para evitar a contaminação
das instalações, dos equipamentos de ensaio e de produção, dos componentes e
materiais e dos produtos acabados, por uso de substâncias tóxicas de
limpeza, de desinfecção ou de produtos químicos voláteis e corrosivos.
A-3.3.3 Procedimento de operação
Devem existir procedimento escritos que orientem a operação dos equipamentos
e que estejam facilmente disponíveis para os operadores.
A-3.3.4 Manutenção
Todos os equipamentos devem ser submetidos à manutenção preventiva ou
corretiva, de acordo com os respectivos manuais de fabricação. Os
procedimentos realizados devem ser registrados por escrito.
A-3.3.5 Inspeções
A-3.3.5.1 Inspeções destinadas à verificação dos procedimentos de manutenção
dos procedimentos de manutenção e limpeza, devem ser realizadas
periodicamente e registradas de modo adequado.
A-3.3.6 Calibração e aferição
A-3.3.6.1 Os procedimentos de calibração e aferição devem incluir instruções
específicas, assim como explicar os erros toleráveis. As instruções para as
ações corretivas devem ser claramente indicadas, dentro dos limites
tolerados.
A calibração e aferição só devem ser executados por pessoas treinadas e
capacitadas para operar com o equipamento. As especificações e aferições
devem ser realizadas pelo Órgão Oficial do País. Se não existir
especificações para algum parâmetro particular, pode ser utilizada uma
especificação aceita intencionalmente.
A-3.3.6.2 Tolerância ou limitações inerentes ao protocolo de operações de um
equipamento, devem ser fixados sobre o mesmo ou mantidas facilmente
disponíveis para o pessoal que opera e calibra.
A-3.3.6.3 Registro de calibração e aferição
Calibração e aferição devem ser executados de acordo com os procedimentos
estabelecidos e os resultados devem ser arquivados com o nome do
responsável. As etiquetas com dados referentes à última e a próxima
calibração/aferição devem ser afixados a cada equipamento.
A-3.3.7 Filtros
Os filtros utilizados na produção de SPGV não devem liberar fibras. Quando
estes filtros forem necessários no processo, deve existir um procedimento
adicional que retenha tais fibras. Deve-se controlar a integridade física
dos filtros de membrana utilizados para a filtração final das SPGV.
A-3.3.8 Autoclave
A-3.3.8.1 Uma autoclave para a esterilização de SPGV deve estar equipada, no
mínimo, com termômetro de mercúrio ou equivalente, adequado para faixa de
temperatura em que se pretende trabalhar e cuja resolução máxima seja de
1°C. A autoclave deve possuir ainda, manômetro, registrador de temperatura e
válvulas de entrada e saída de vapor, saída de ar e de segurança.
A-3.3.8.2 O fabricante de SPGV deve validar cada autoclave, seguindo o
estabelecido no anexoI.
A-3.3.9 Equipamento auxiliar
Todos os equipamentos auxiliares que abastecem ar, água de limpeza ou água
para fabricação, devem cumprir as recomendações do item A-3.4 deste
regulamento.
A-3.4 Qualidade do ar e da água
A-3.4.1 Requisitos gerais
As instalações e procedimentos utilizados no processamento e distribuição
devem ser aprovados pelo Controle de Qualidade. Os resultados de todos os
ensaios devem ser registrados e mantidos à disposição do pessoal responsável
pelo processo.
A-3.4.2 Ar em ambiente controlado
A-.3.4.2.1 O ar em ambientes controlados deve ter um sistema de filtração
que assegure:
a) para áreas classe 100.000 (classe D), contagem automática máxima de 3.500
partículas de 0,5 µm a 5,0 µm ou contagem microscópica máxima de 25
partículas maiores de 5 µm por litro de ar.
b) para áreas classe 100 (classe A ou B), contagem automática com máximo de
3,5 partículas de 0,5 µm por litro de ar. Em áreas de ambiente controlado
deve-se manter a temperatura entre 19°C e 25°C, umidade relativa entre 30% e
50%, pressão positiva de 0,127 cm de coluna de água, com todas as portas
fechadas com relação aos ambientes adjacentes menos limpos e com no mínimo,
20 trocas de ar/hora. Estas especificações podem se restringir à área de um
equipamento ou local onde sejam necessárias tais condições de ar.
A-3.4.2.2 O ar comprimido deve ser isento de água, óleo e vapores de óleos e
hidrocarbonetos, sofrendo filtrações suficientes para que se obtenha, como
máximo 3,5 partículas de 0,5 µm ou maiores por litro, quando se utiliza em
linhas de envasamento, em autoclave, em ambientes controlados e em áreas de
ensaios microbiológicos, a menos que a descarga se realize em áreas de
ambientes não controlado.
A-3.4.3 Água
A-3.4.3.1 Água de limpeza ou lavagem inicial que entrarão em contato com o
produto tais como frascos, tampas e equipamentos, podem ter no máximo 50
microorganismos por 100 ml, calculados em três amostras consecutivas de 250
ml tomadas no mesmo ponto de amostragem. Se a água contém agentes
bactericidas, estes devem ser neutralizados.
A-3.4.3.2 A águia para fabricação das SPGV e para o enxágüe final de
equipamentos ou superfície em contato com o produto, deve responder as
especificações do Anexo II "Água para injetáveis".
A-3.4.3.3 Quando a água para a fabricação necessita de armazenamento, devem
ser usados recipientes de aço inoxidável sanitário, herméticos e munidos de
filtros de ar de 0,22 µm de tamanho do poro, a uma temperatura não menor de
80°C, sob constante circulação.
A-3.4.3.4 A água utilizada para a refrigeração do produto depois de
esterilizado deve ser filtrada bacteriologicamente para manter a qualidade
do produto.
A-3.4.4 Controle do ar e da água
Os procedimentos de controle do ar e da água devem ser escritos e aprovados
pelo Controle de Qualidade e a inspeção deve ser programada periodicamente.
As alterações e correções devem ser documentadas. Todos esses documentos
devem ser mantidos a disposição dos responsáveis pela produção.
A-3.4.4.1 O ar comprimido utilizado em áreas de ambiente não controlado pode
apresentar o máximo 3.500 de partículas de 0,5 µm, por litro de ar.
A-3.5 Controle de matérias-primas e de material de acondicionamento
A-3.5.1 Exigências gerais
A-3.5.1.1 Os procedimentos com relação ao recebimento, identificação,
armazenamento, manipulação, ensaios e aprovação ou rejeição de
matérias-primas e materiais de acondicionamento, devem ser detalhadamente
descritos.
A-3.5.1.2 As matérias-primas e materiais de acondicionamento devem ser
manipulados e armazenados de modo a evitar contaminação.
A-3.5.1.3 Matérias-primas, embaladas ou acondicionadas em caixas, devem ser
armazenadas de modo que não entrem em contato com o piso e adequadamente
posicionadas de modo a permitir limpeza e inspeções.
A-3.5.1.4 Cada lote de matéria-prima e de material de acondicionamento deve
ser identificado com um código distinto sendo apropriadamente identificado
quanto a sua situação (quarenta, aprovado ou rejeitado).
A-3.5.2 Recepção e armazenamento
A-3.5.2.1 No recebimento de matérias-primas e materiais de acondicionamento,
cada lote deve ser examinado, quanto a rótulo, conteúdo e possíveis danos em
sua embalagem.
A-3.5.2.2 Cada lote de matéria-prima e material de acondicionamento deve ser
mantido fora de uso até ser aprovado pelo Controle de Qualidade.
A-3.5.3 Amostragem e ensaios para a aprovação ou rejeição
A-3.5.3.1 Amostras representativas de cada lote devem ser tomadas para as
análises. O número de unidades a ser amostrado e a quantidade de material a
ser tomada de cada lote dever baseada em critérios estatísticos para
variabilidade, nível de confiança e grau de precisão, desejados de acordo
com a qualidade ou a história do fornecedor.
A-3.5.3.2 A quantidade de amostra recolhida deve ser suficiente para a
realização de todas as análises e deve ser conservadas até 30 dias depois do
vencimento do último lote com ela produzida.
A-3.5.3.3 As amostras de matérias-primas devem ser recolhidas de acordo com
os seguintes procedimentos:
a) as embalagens do material selecionado devem ser limpas externamente;
b) as embalagens devem ser abertas, tomadas as amostras e logo fechadas para
evitar a contaminação de seus conteúdos;
c) equipamentos estéril e técnicas de amostragem assépticas, devem ser
utilizadas quando necessário;
d) é necessário proceder a amostragem de material localizado na parte
superior, média e inferior de um recipiente, e estas amostras não podem ser
misturadas para a análise;
e) as amostras devem ser identificadas com a informação do nome de material
amostrado, o número do lote, e embalagem da qual a amostra foi tomada, a
data da coleta e o nome da pessoa que coletou.
f) os recipientes, dos quais foram tomadas as amostras, devem ser marcadas
para identificar sua origem.
A-3.5.3.4 As amostras das matérias-primas devem ser analisadas pelo
fabricante de SPGV de acordo com as especificações no Anexo C Os recipientes
e tampas devem ser analisados de acordo com os Anexos D, E e J.
A-3.5.3.5 Qualquer lote de matéria-prima, material de acondicionamento que
esteja de acordo com as especificações exigidas e conforme o previsto no
item 3.5.3.4, pode ser aprovado e liberado para uso. Caso contrário deve ser
rejeitado.
A-3.5.3.6 Periodicamente deve-se praticar ensaios microbiológico de acordo
com um programa escrito, sobre amostras representativas de todas as
matérias-primas e materiais de acondicionamento, inclusive aqueles que não
se considerem susceptíveis de contaminação microbiana.
A-3.5.3 Periodicamente deve-se praticar análises de substâncias pirogênicas
sobre amostras representativas de matérias-primas e material de embalagem.
A-3.6 Controle de produção e processo
A-3.6.1 Procedimentos escritos
A.3.6.1.1 O fabricante de SPVG deve ter por escrito os procedimentos de
produção e controle de seus produtos.
A-3.6.2 Matéria prima
A-3.6.2.1 Os procedimentos escritos de controle e de produção devem
assegurar que o produto tenha identidade, concentração, pureza e outros
requisitos especificados e devem incluir os seguintes dados:
a) o lote do produto deve ser formulado com a intenção de fornecer no mínimo
100% da quantidade do componente ativo declarado no rótulo;
b) as matérias-primas devem ser fracionadas, pesadas ou medidas
apropriadamente. Se uma matéria-prima for trocada de sua embalagem original
para outra, a nova embalagem deve ser identificada com as seguintes
informações:
* nome da matéria-prima;
* número do lote;
* data de recebimento e/ou número do controle;
* peso ou medida do novo recipiente;
c) a medida ou operação de fracionamento para as matérias-primas deve ser
supervisionada. Cada recipiente de matéria-prima preparada para a fabricação
deve ser examinado por uma segunda pessoa para assegurar que:
* a matéria-prima foi liberada pelo Controle de Qualidade;
* a medida está correta, como consta nos registros de produção do
lote;
* os recipientes são adequadamente identificados.
A-3.6.3 Cálculo de rendimento na fabricação
As perdas que ocorrerem na fabricação de cada lote, unidade e perda de
volume de solução em tubulações e equipamentos devem ser identificadas,
estimadas em quantidade e registradas.
A-3.6.4 Identificação do equipamento
A-3.6.4.1 Todos os equipamentos, tanques, filtros, bombas e tubulações
utilizados durante a produção de um lote, devem ser identificados durante
todo o tempo, para indicar seus conteúdos e quando seja necessário, a etapa
de fabricação. Tal identificação deve ser incorporada à documentação da
produção do referido lote.
A-3.6.4.2 Todas as bandejas do esterilizador, carros ou qualquer outro tipo
de dispositivo utilizado para reter o produto durante o processo de
esterilização, devem estar marcados com o número do lote em forma visível e
clara, a menos que este figure previamente impresso em forma indelével em
cada recipiente. Devem ser identificados se foram expostos ou não ao
processo de esterilização.
A-3.6.5 Amostragem de materiais em processo e produto acabado
A-3.6.5.1 Para assegurar a uniformidade e integridade de um produto, devem
ser estabelecidos procedimentos e programas escritos para amostragem e
análises, estatisticamente válidas, a fim de que incluam os seguintes
aspectos:
a) conformidade da solução antes do envasamento;
b) nível de envasamento ou volume médio (conteúdo líquido);
c) limpidez da solução;
d) ausência de partículas;
e) vácuo, onde se aplique, ou outros índices de impermeabilidade do
fechamento;
f) identidade do produto;
g) caracterização do produto;
h) concentração de matéria-prima no produto;
i) pH;
j) contagem microbiana;
k) pirogênios.
A-3.6.5.2 Os materiais em processo devem ser analisados para determinar
identidade, concentração, pureza a ser aprovados ou rejeitados pelo Controle
de Qualidade durante a produção, no início ou no final das fases
significantes, ou depois do armazenamento por períodos prolongados.
A-3.6.6 Limitações de tempo na produção
O tempo que transcorre entre a adição da primeira matéria-prima do produto à
água no tanque de mistura e a exposição da última unidade envasada ao início
da temperatura de esterilização, não deve exceder a 8 horas.
Quando necessário, devem ser estabelecidos limites de tempo para a conclusão
de cada fase da produção, a fim de assegurar a qualidade do produto.
Modificações no tempo estabelecido, devem ser validadas e documentadas de
modo que não haja comprometimento da qualidade do produto.
A-3.6.7 Filtração final
A-3.6.7.1 Antes do envasamento, as SPGV devem ser filtradas através de
filtros com porosidade não superior a 0,45 µm. Modificações na porosidade
dos filtros devem ser validadas e documentadas, de modo que não comprometa a
qualidade do produto.
A-3.6.7.2 A filtração final da solução deve ser realizada imediatamente
antes de seu envasamento. As especificações do processo, devem, em forma
adequadamente documentada, indicar o tempo máximo durante o qual o sistema
de filtração deve ser usado, de modo a impedir o desenvolvimento de
microorganismos a níveis que possam afetar a qualidade do produto.
Recomenda-se a substituição ou a limpeza dos filtros em períodos não
superiores a 8 horas.
A-3.6.7.3 Os filtros devem ser ensaiados de acordo com um procedimento
escrito para verificar sua integridade.
A-3.6.8 Inspeção visual
Todas as SPGV devem ser examinadas visualmente contra fundos escuros e
claros logo após a esterilização, para verificar a presença ou não de
partículas. A fonte e direção da luz, deve intensificar a visibilidade das
partículas. Um método alternativo de exame pode ser empregado, desde que
seja mais preciso que o exame visual. Devem ser mantidos registros dos
métodos executados e dos resultados encontrados.
A-3.6.9 Controle da contaminação microbiana
Procedimentos escritos, destinados a evitar a contaminação microbiana de
produtos que devem ser estéreis, serão estabelecidos e seguidos.
A-3.7 Esterilização
A-3.7.1 Processo de esterilização
O processo de esterilização de SPGV deve empregar calor úmido sobre o
produto envasado e fechado, em condições específicas de tempo, temperatura e
pressão, de modo a assegurar uma probabilidade de sobrevida microbiana não
superior a 1 x 10-6, projetado para ser reprodutível, uniforme e eficiente.
O processo de esterilização empregado deve ser validado. Os registros das
condições de esterilização obtidos em cada ciclo de esterilização devem ser
revisados pelo Controle de Qualidade e arquivados junto com os demais
documentos do lote no arquivo histórico.
A-3.7.2 Validação do processo de esterilização
A-3.7.2.1 A validação do processo de esterilização deve ser realizado
periodicamente. A validação de um processo de esterilização deve incluir
estudos de controle biológico, de distribuição e penetração de calor, de
acordo com o estabelecido no Anexo I.
A-3.7.3 Controle do processo de esterilização
Para o controle do processo de esterilização os seguintes procedimentos
devem ser observados:
a) controle de temperatura com termômetro de mercúrio ou equivalente,
calibrados/aferidos contra um termômetro padrão, no mínimo uma vez a cada 3
meses. Se houver variações maiores de +0,5ºC, o termômetro não deve ser
utilizado;
b) controle de pressão com manômetro ou equivalente, que deve ser
calibra/aferido pelo menos uma vez a cada 3 meses, de acordo com as
especificações do equipamento;
c) definição do número de lote ou controle, suficientemente claro para
identificar a autoclave e o ciclo no qual ocorre a esterilização, sempre que
um lote for subdividido nesta fase;
d) revisão pelo Controle de Qualidade dos registros das condições de
esterilização obtidos em cada ciclo e arquivo dos mesmos junto com os demais
documentos do lote no arquivo histórico;
e) o tempo de exposição do processo de esterilização, só começa a ser
contado quando a temperatura de esterilização é alcançada, tanto na câmara
como no interior da solução;
f) se os registradores de temperatura mostrarem diferença superior a 0,5ºC
com relação aos termômetros, torna-se necessário a verificação dos mesmos
imediatamente após a finalização do ciclo de esterilização onde foi
detectada a diferença;
g) todos os procedimentos, alterações, calibrações, ensaios ou reposições
verificadas nos itens a) e b), devem ser documentados;
h) controle microbiológico em cada ciclo de esterilização, utilizando
indicadores biológicos.
A-3.8 Controle de reprocessamento
Procedimentos escritos devem ser estabelecidos e seguidos, para o
reprocessamento de partidas de SPGV que se apresentem em desacordo com os
padrões ou especificações. Devem ser tomadas medidas para assegurar que as
partidas reprocessadas se apresentem de acordo com as especificações
estabelecidas. O reprocessamento não deve ser executado sem a revisão e
autorização do Controle de Qualidade.
A-3.9 Controle de rotulagem e embalagem
A-3.9.1 Devem existir procedimentos escritos, a serem seguidos, descrevendo
de forma detalhada, o recebimento, a identificação, o armazenamento, a
manipulação, a amostragem e o ensaio de materiais de rotulagem e
acondicionamento. Amostras representativas dos materiais de rotulagem e
acondicionamento, devem ser analisadas pelo Controle de Qualidade antes de
seu uso, só podendo ser liberados os materiais que cumpram com as
especificações estabelecidas.
A-3.9.2 Os materiais empregados para acondicionar as SPGV, devem proteger e
manter o produto inalterado, nas condições usuais para expedição e
movimentação.
A-3.10 Armazenamento e distribuição
A-3.10.1 Procedimentos escritos orientando o armazenamento das SPGV devem
incluir diretrizes específicas com relação ao empilhamento das caixas ou
paletes de forma que o armazenamento não danifique o produto.
A-3.10.2 Procedimento de distribuição
Devem ser estabelecidos e seguidos procedimentos escritos sobre os cuidados
na movimentação de uma SPGV durante sua distribuição.
A-3.11 Documentação
A-3.11.1 Princípios e requisitos gerais
A-3.11.1.1 O sistema de documentação deve incluir cada lote de produto, a
utilização e provisão de cada matéria-prima, materiais de acondicionamento,
produtos semi-elaborados e produtos acabados, para assegurar que o pessoal
de produção e controle de qualidade, tenham recebido instruções detalhadas e
adequadas, relativas aos procedimentos e permita, portanto, a investigação e
acompanhamento dos produtos fabricados.
A-3.11.1.2 Para facilitar e efetivar seu uso, os documentos devem ser
planejados e preparados com cuidado, destacando os seguintes pontos:
a) o título deve ser objetivo e o documento deve expor seu conteúdo com
clareza para evitar interpretações ambíguas;
b) o fluxo de circulação dos documentos deve ser definido;
c) o tamanho, a forma, a qualidade e a coloração do papel e dos documentos
devem ser considerados para facilitar a sua manipulação e reprodução;
d) os documentos reproduzidos devem ser claros;
e) os documentos devem ser preparados, datados e assinados por um técnico e
ratificados, datados e assinados por outro legalmente responsável;
f) os documentos devem ser periodicamente revisados e as alterações devem
ser feitas de tal maneira que o original não seja destruído e que as
correções sejam assinadas e datadas.
g) o período de conservação dos documentos deve ser:
no caso do arquivo mestre: permanente; deve estar constituído pelos
documentos originais e atualizados pelas revisões efetuadas.
no caso do arquivo histórico: devem ser mantidos até 6 meses após o
vencimento do prazo de validade do lote do produto.
A-3.11.2 Arquivo mestre
O arquivo mestre deve existir para cada produto a ser fabricado, a fim de
assegurar uniformidade dos lotes, do processo de produção e dos registros de
controle. O arquivo mestre deve constar de:
A-3.11.2.1 Todos os documentos iniciais que geraram o produto
A-3.11.2.2 Informações técnicas
a) nome do produto, composição e descrição da forma farmacêutica;
b) nome e quantidade de cada matéria-prima e material de acondicionamento.
A-3.11.2.3 Especificações de matérias-primas e de materiais de
acondicionamento
a) nome, descrição;
b) instruções de amostragem;
c) ensaios de identificação e pureza, características químicas, físicas e
biológicas;
d) métodos de ensaio utilizados;
e) cadastro de fornecedores;
f) precauções a serem observadas;
g) condições de armazenamento;
h) procedimentos para o ensaio do material armazenado.
3.11.2.4 Procedimento de fabricação contendo
a) local de fabricação;
b) equipamento a ser utilizado;
c) métodos a serem utilizados para a preparação dos equipamentos incluindo
limpeza, calibração, esterilização e outros;
d) etapas detalhadas de fabricação:s
* controles de matérias-primas usadas;
* preparação de matérias-primas quando necessário;
* seqüência de adição das matérias-primas
* definição do sistema de filtração;
* tempo de mistura e esterilização;
* temperatura nas diversas etapas;
* cuidados especiais.
e) descrição dos recipientes para o acondicionamento do produto, fechamento
e materiais de embalagem incluindo um exemplar ou cópia de cada rótulo
assinados e datados por pessoa responsável e/ou designada para tal fim;
f) rendimento teórico e desvios permitidos, para estabelecer a necessidade
ou não de investigações;
g) métodos de controle em processo com instruções de amostragem e limites de
aceitação;
h) critérios de aprovação para liberação do lote.
a) 3.11.2.5 Especificações e métodos de ensaio para liberação de
produto acabado
A-3.11.2.6 Informe das alterações que envolveram o produto desde a primeira
produção
A-3.11.2.7 Outros documentos de operações que possam intervir na qualidade
do produto devem seguir procedimentos escritos e constar como documentos no
arquivo mestre:
a) "lay-out" das instalações e equipamentos;
b) procedimentos de limpeza e manutenção das instalações;
c) procedimentos de limpeza e manutenção dos equipamentos;
d) instruções para o uso dos equipamentos;
e) procedimento da calibração e aferição dos equipamentos;
f) programas de treinamento do pessoal técnico;
g) procedimentos de devolução de materiais;
h) procedimentos para a rejeição de materiais;
a) procedimentos para armazenamento e distribuição;
j) procedimentos para declarações;
k) outros.
A-3.11.3 Arquivo histórico
O arquivo histórico deve existir para cada lote fabricado, em forma
ordenada, para manter a uniformidade nas informações, devendo conter os
seguintes documentos:
A-3.11.3.1 Com relação a produção
a) nome do produto, número de lote;
b) número de lote de cada matéria-prima e material de acondicionamento
utilizados na fabricação do referido lote;
c) equipamentos utilizados e documentos relativos a preparação dos mesmos,
com datas e assinaturas;
d) etapas detalhadas de fabricação;
e) data, hora e assinatura dos responsáveis nas etapas críticas;
f) registro dos parâmetros do processo de esterilização e outros documentos
relacionados com o lote;
g) resultado de todos os controle de processo;
h) registro detalhado de qualquer não conformidade e assinatura do
responsável;
a) rótulo utilizado com o número de lote respectivo;
A-3.11.3.2 Com relação ao Controle de Qualidade
a) matérias-primas e materiais de acondicionamento:
* registro completo contendo número de lote, data das análises, nome
dos materiais e seus respectivos fornecedores;
* informe dos resultados das análises realizadas, comparados com as
especificações estabelecidas;
b) lote:
* registro completo descrevendo os ensaios de produtos semi-elaborados
e produtos acabados com todos os dados obtidos em cada ensaio, incluindo
todos os gráficos e registros instrumentais, quando houverem;
* informe dos resultados dos ensaios comparando com as especificações
estabelecidas.
c) controle ambiental:
* protocolo conforme o item A-3.2.4 deste Regulamento.
d) controle de água:
* protocolo conforme o item A-3.4.3. deste Regulamento.
3.11.3.3 Registros de recebimento de matérias-primas e de materiais
de acondicionamento
a) nome do material;
b) data de recebimento;
c) nome do fornecedor;
d) lote do fornecedor ou número de referência;
e) quantidade total ou número de volumes recebidos;
f) número de lote adotado pela empresa para a identificação.
A-3.11.3.4 Registro de calibrações e aferições dos equipamentos
Conforme item A-3.3.6 deste Regulamento;
A-3.11.3.5 Registro de validação do processo de esterilização
Conforme item A-3.7.2 deste Regulamento.
A-3.12 Reclamações
A-3.12.1 Procedimento de recebimento das reclamações
Devem ser estabelecidos e seguidos, procedimentos escritos de
recebimento de reclamações com relação aos produtos. Tais procedimentos
devem incluir definições para a revisão pelo Controle de Qualidade, quanto
as especificações de tais produtos e a necessidade de uma investigação.
A-3.12.2 Registro de reclamações
O registro escrito de cada reclamação deve ser mantido em um arquivo
próprio no Controle de Qualidade durante o prazo de validade do produto. Tal
registro deve conter o nome do produto, número de lote, nome do reclamante,
natureza e resposta da reclamação.
Quando for necessário uma investigação, os registros escritos devem
incluir as conclusões da investigação e os cuidados tomados. No caso de não
ser necessária a investigação, o registro escrito deve incluir a razão pela
qual a investigação foi considerada desnecessária e o nome do responsável
por tal determinação.
A-3.13 Auditoria interna
Auditorias periódicas ao programa de garantia de qualidade devem ser
implementadas com o objetivo de verificar sua observância. As auditorias
devem ser realizadas de acordo com procedimentos escritos e por indivíduos
treinados que não tenham relação direta com a área a ser auditada. Os
resultados e conclusões das auditorias internas devem ser documentados por
meio de informes escritos, que devem ser revisados pela gerência responsável
pelas áreas auditadas. As ações corretivas ou preventivas que forem
consideradas necessárias, devem ser acompanhadas, por novas auditorias.
A-4 Inspeções
A-4.1 Inspeções oficiais
A empresa produtora está sujeita a inspeções oficiais, de acordo com
o ANEXO B do presente Regulamento.
A-4.2 Inspeções internas
Inspeções para verificar o cumprimento das Boas Práticas de
Fabricação das SPGV devem ser realizadas, periodicamente, pela empresa e
suas conclusões devidamente documentadas e arquivadas.
ANEXO B
ROTEIRO PARA INSPEÇÃO
CRITÉRIOS DE QUALIFICAÇÃO E DE AVALIAÇÃO PARA OS ITENS DO ROTEIRO
PARA INSPEÇÃO
O critério estabelecido para a classificação está baseado no risco
potencial inerente a cada item em relação à qualidade e segurança dos
produtos e à segurança do trabalhador, em sua interação com os produtos e os
processos durante a fabricação.
IMPRESCINDÍVEL - I:
Considera-se item IMPRESCINDÍVEL aquele que atende às Boas Práticas
de Fabricação e Controle, que pode influir em grau crítico na qualidade ou
segurança dos trabalhadores, em sua interação com os produtos e processos
durante a fabricação.
Define-se por SIM ou NÃO
NECESSÁRIO - N:
Considera-se item NECESSÁRIO aquele que atende às Boas Práticas de
Fabricação e Controle, que pode influir em grau menos crítico na qualidade
ou segurança dos produtos e na segurança dos trabalhadores em sua interação
com os produtos e processos durante a fabricação.
Define-se por SIM ou NÃO
O item NECESSÁRIO não cumprido na primeira inspeção é
automaticamente tratado como IMPRESCINDÍVEL nas inspeções seguintes.
RECOMENDÁVEL - R:
Considera-se item RECOMENDÁVEL aquele que atende às Boas Práticas de
Fabricação e Controle, que pode influir em grau não crítico na qualidade ou
segurança dos produtos e na segurança dos trabalhadores em sua interação com
os produtos e processos durante a fabricação.
Define-se por SIM ou NÃO
O item RECOMENDÁVEL, não cumprido na primeira inspeção, é
automaticamente tratado como NECESSÁRIO nas inspeções seguintes. Não
obstante nunca será tratado como IMPRESCINDÍVEL.
INFORMATIVO - INF:
Considera-se como item INFORMATIVO aquele que apresenta uma
informação descritiva, que não afeta a qualidade e segurança dos produtos e
segurança dos trabalhadores em sua interação com os produtos e processos
durante a fabricação. Poderá ser respondido opcionalmente por SIM ou NÃO,
sob a forma descritiva
B.1 ADMINISTRAÇÃO E INFORMAÇÕES GERAIS
B.1.1 A empresa está legalmente constituída?Qual é a razão social da
empresa? I
B.1.2 Com quem foi feito o contato inicial? Inf
B.1.3 O farmacêutico responsável está presente? I
B.1.4 Existe prova de sua inscrição no órgão competente? I
B.1.5 Existe Autorização de Funcionamento para a empresa, emitida
pela Autoridade
Sanitária Nacional competente? I
B.1.6 A empresa possui autorização junto aos órgãos competentes
para funcionamento, referente a localização, a proteção
ambiental e a segurança das instalações? I
B.1.7 Foram examinadas as plantas dos edifícios? N
B.1.8 Qual é a área total do terreno? Inf
B.1.9 Qual é a área total construída? Inf
B.1.10 Quantos edifícios compõem a planta? Inf
B.1.11 Qual é a área ocupada por edifício? Inf
B.1.12 Quantos funcionários tem a empresa? Inf
B.1.13 Quantos funcionários estão diretamente ligados às
operações de produção? Inf
B.1.14 Foram verificadas as fichas médicas dos funcionários? R
B.1.15 Foi mostrada a lista dos produtos de propriedade da
empresa, discriminando os que estão em comercialização
e os que não estão? I/R
B.1.16 Todos esses produtos estão devidamente registrados junto
à Autoridade Sanitária Nacional competente? I
B.1.17 Qual é a capacidade de produção da empresa por forma
farmacêutica? Inf
B.1.18 Qual é a capacidade de produção própria para cada
produto fabricado na empresa? Inf
B.1.19 Qual é a capacidade de produção contratada junto a
terceiros, para cada produto? Inf
OBS: Como parte da inspeção, devem ser incluídas as
empresas com as quais são mantidos contratos de produção,
os produtos e os respectivos volumes industrializados.
B.1.20 Importa matéria-prima? Inf
B.1.21 Importa produto acabado? Inf
B.1.22 Exporta matéria-prima? Inf
B.1.23 Exporta produto acabado? Inf
B.2 ALMOXARIFADO
OBS: Preencher uma guia geral e uma para cada almoxarifado ou
depósito existente.
B.2.1 Condições Externas
B.2.1.1 Quanto ao aspecto externo, o edifício apresenta boa
conservação? Está isento de rachaduras, pinturas descascada,
infiltrações, etc.? R
B.2.1.3 Existe proteção contra a entrada de roedores, insetos,aves
ou outros animais? R
B.2.1.4 Existem fontes de poluição (industrias ou outras) próximas
ao edifício? Inf
B.2.1.5 Se o depósito é um galpão, as condições do telhado são boas?
R
B.2.1.6 As vias de acesso aos depósitos são adequadas? R
B.2.2 Condições internas
B.2.2.1 O piso é adequado? R
B.2.2.2 O estado de higiene e conservação do piso é bom, sem
rupturas, buracos e rachaduras? R
B.2.2.3 É de fácil limpeza? R
B.2.2.4 As paredes estão bem conservadas e em boas condições
de higiene, sem rachaduras, ou pintura descascada? R
B.2.2.5 O teto está em boas condições?
Seu estado de conservação e higiene (isento de gretas, rachaduras,
pinturas
descascadas, goteiras, etc) é adequado? R
B.2.2.6 Existem tubulações sobre os materiais estocados? Em caso
positivo, estão em bom estado, sem infiltrações? R
B.2.3 Aspectos Gerais
B.2.3.1 A qualidade e a intensidade da iluminação são adequadas?
R
B.2.3.2 A ventilação do local é adequada? R
B.2.3.3 As instalações elétricas estão em bom estado de
conservação, segurança e uso? R
B.2.3.4 A temperatura do local é condizente com as condições
necessárias ao armazenamento de insumos e produtos N
acabados?
Medir e registrar a temperatura no momento
da inspeção.
B.2.3.5 Se houver necessidade de umidade e temperatura
controladas, existem equipamentos indicadores da sua R
da sua monitoração e registro desses dados?
B.2.3.6 Não foram notadas indícios da presença de roedores,
insetos, aves ou outros animais? N
B.2.3.7 Existe um sistema/procedimento para combate aos mesmos? R
B.2.3.8 O sistema/procedimento é utilizado? R
B.2.3.9 Quem é o responsável pelo mesmo?
Anote o nome. Inf
B.2.3.10 Existem sanitários em quantidade suficiente? Inf
B.2.3.11 Estão limpos? R
B.2.3.12 Existe um local separado para refeições, descanso,
cafezinho, etc.? Inf
Está limpo? R
B.2.3.13 Existem vestiários em quantidade suficiente? Inf
B.2.3.14 É no mesmo prédio? Inf
B.2.3.15 Estão limpos e em condições adequadas? R
B.2.3.16 Os funcionários estão adequadamente vestidos? N
Os uniformes estão limpos e em boas condições? R
B.2.3.17 Se houver necessidade, existe câmara frigorífica? I
B.2.3.18 A temperatura da câmara frigorífica é controlada e
registrada? N
B.2.3.19 As balanças são aferidas regularmente e calibradas
periodicamente? N
B.2.3.20 Existem Registros? R
B.2.3.21 A disposição do armazenamento é correta e racional,
com o intuito de preservar a integridade e identidade dos materiais?
B.2.3.22 Existem áreas ou sistemas, fisicamente separados, que
garantam a separação de insumos, produtos semi-acabados
e material de embalagem? R
B.2.3.23 Existe uma área ou sistema que delimite e restrinja
o uso de insumos em quarentena? N
B.2.3.24 Existe uma área ou sistema que delimite e restrinja
o uso de insumos reprovados? N
B.2.3.25 Existe uma área especial ou sistema, que delimite e
restrinja o armazenamento de etiquetas ou rótulos de papel? N
B.2.3.26 Existe uma área determinada e restrita para recepção
e armazenamento dos produtos devolvidos ou recolhidos
no mercado? R
B.2.3.27 Existe um local para armazenamento de produtos
inflamáveis e explosivos? I
B.2.3.28 Está situado em setor ou área externa? Inf
B.2.3.29 Oferece condições de segurança? N
B.2.3.30 Existem, dentro do Almoxarifado, setores separados,
trancados e com acesso restrito, para substâncias
narcóticas, psicotrópicas ou similares bem como para
substâncias cáusticas e corrosivas? R
B.2.3.31 Existe recipiente próprio para coleta de lixo? R
B.2.3.32 Este permanece tampado? R
B.2.3.33 São esvaziados freqüentemente? R
B.2.3.34 Existe equipamento de segurança para combater N
incêndio?
B.2.3.35 Os acessos a extintores e mangueiras estão livres? R
B.3 INSTALAÇÃO DE ÁGUA
A empresa utiliza água potável? INF
A empresa utiliza água purificada? INF
A empresa utiliza água para injetáveis? INF
B.3.1 Água Potável
B.3.1.1 Qual a origem da água utilizada na empresa? INF
( ) Rede Pública.
( ) Poços artesianos.
( ) Semi-artesianos
( ) Outros? Quais?
B.3.1.2 É feito algum tratamento antes da água ser armazenada?
Qual? INF
B.3.1.3. É feita a limpeza das caixas de água? N
Qual a freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.1.4 Existem procedimentos escritos para a limpeza das
caixas de água? R
São utilizados? R
B.3.1.5 São feitos testes físico-químicos? N
Quais? Inf
Com que freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.1.6 São feitos testes bacteriológicos? N
Com que freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.1.7 São colhidas amostras de água em diversos pontos da
fábrica, inclusive nos bebedouros, para efetuar a
contagem bacteriana? R
Existem registros? R
B.3.1.8 As tubulações utilizadas para transporte de água
potável, estão externamente em bom estado de
conservação e limpeza? R
Qual é o material da tubulação? Inf
B.5.3.1.9 A provisão de água potável faz-se sob pressão
positiva contínua, em um sistema livre de defeitos? R
B.3.2 Água Purifica
A água potável é utilizada como fonte de alimentação
de água purificada?
Qual o sistema utilizado para
obtenção da água purificada? Inf
B.3.2.1 A indústria possui equipamento deionizador para
produção de água purificada?
Qual é sua capacidade em
litros/hora? Inf
B.3.2.2 A água que abastece o deionizador é tratada? Inf
Como?
Qual é a procedência desta água?
B.3.2.3 Existe pessoal capacitado para operar o sistema? R
O responsável pela operação está presente? Inf
B.3.2.4 Existe manual de operação para o sistema?
É utilizado? R
B.3.2.5 As resinas são regeneradas com frequência?
Qual? N/INF
Existem registros? R
B.3.2.6 Se a água que abastece o deionizador é clorada,
existe um sistema para a retirada do cloro antes do
deionizador?
Qual? Inf
B.3.2.7 Existe depósito para a água deionizada? INF
Qual é a sua capacidade? Inf
Qual o material utilizado? INF
Existe algum tratamento para evitar a contaminação
bacteriológica? Inf
Qual é o consumo médio de água deionizada? Inf
B.3.2.8 São feitos testes físico-químicos?
Quais? N/Inf
Com que freqüência? INF
Existe registros? R
B.3.2.9 São feitos testes bacteriológicos? N
Com que freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.2.10 A circulação da água deionizada é feita por tubulação? Inf
Qual o material da tubulação? Inf
B.3.2.11 A água produzida é utilizada como fonte alimentação
para sistema de produção de água para injetáveis? Inf
B.3.2.12 É feita a sanitização do sistema?
Como? R/Inf
Qual a freqüência? R
Existem registros? R
B.3.2.13 Existem procedimentos escritos para a sanitização do
sistema? R
São utilizados? R
B.3.2.14 É feita a manutenção preventiva nos equipamentos do
sistema? Inf
Qual a freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.2.15 Existe algum tipo de filtro no sistema?
Qual? Inf
B.3.2.16 É feita a sanitização dos meios filtrantes? R
Qual é a freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.2.17 Existem procedimentos escritos para sanitização do meios
filtrantes? R
São utilizados? R
B.3.2.18 Existem registros de troca dos meios filtrantes? R
B.3.2.19 O sistema de purificação está validado? R
Existem registros? R
B.3.3 Osmose Reversa
B.3.3.1 A indústria possui equipamento osmose reserva para produção
de água purificada?
Qual a capacidade em litros/hora? Inf
B.3.3.2 A água que abastece o sistema é tratada?
Como?
Qual é a procedência desta água? Inf
B.3.3.3 Existe pessoal capacitado para operar o sistema? R
O responsável pela operação está presente? Inf
B.3.3.4 Existe manual de operação para o sistema?
É utilizado? R
B.3.3.5 Existe depósito para esta água? Inf
Qual é o material utilizado? Inf
Qual é a capacidade do depósito? Inf
Qual é o consumo médio? Inf
Existe algum tratamento para evitar a contaminação bacteriológica?
Inf
B.3.3.6 São feitos testes físico-químicos?
Quais? N/Inf
Com que freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.3.7 São feitos testes bacterilógicos? N
Com que freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.3.8 A circulação desta água é feita por tubulação? Inf
Qual o material da tubulação? Inf
B.3.3.9 A água produzida é utilizada como fonte de alimentação para
sistema
de produção de água para injetáveis? Inf
B.3.3.10 É feita a sanitização do sistema?
Como? R/Inf
Qual é a freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.3.11 Existem procedimentos escritos para a sanitização do
sistema? R
São utilizados? R
B.3.3.12 É feita a manutenção preventiva nos equipamentos do
sistema? R
Qual é a freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.3.13 Existe algum tipo de filtro no sistema? Inf
Qual?
B.3.3.14 É feita a sanitização dos meios filtrantes? R
Qual é a freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.3.15 Existe procedimento escrito para a sanitização dos meios
filtrantes?
É utilizado? R
B.3.3.16 Existem registros de troca dos meios filtrantes? R
B.3.3.17 O sistema de purificação está validado? R
Existem registros? R
B.3.4 Água para injetáveis
B.3.4.1 A indústria possui um sistema para produção de água para
injetáveis, segundo metodologias estabelecidas pelas edições
vigentes da Farmacopéia Européia ou da Farmacopéia dos Estados Unidos da
América do Norte? I
Qual o sistema? Inf
Qual é a sua capacidade em litros/hora? Inf
B.3.4.2 A água que abastece o sistema é purificada? Inf
Qual é o sistema de purificação? Inf
B.3.4.3 Existe pessoal capacitado para operar o sistema? R
O responsável pela operação está presente? Inf
B.3.4.4 Existe manual de operação para o sistema? R
É utilizado? R
B.3.4.5 Existe depósito de água para injetáveis? Inf
Qual é a capacidade de depósito? Inf
Qual é o material utilizado? Inf
Qual é o consumo médio? Inf
B.3.4.6 A água produzida é utilizada imediatamente? Inf
Senão, por quanto tempo ela é armazenada? Inf
A que temperatura? Inf
Existe recirculação dessa água? R
B.3.4.7 Existe algum procedimento para evitar a contaminação? N
Qual? Inf
B.3.4.8 São feitos teste físico-químicos? N
Quais? Inf
Com que freqüência? Inf
Existem registros? N
B.3.4.9 São feitos testes bacteriológicos? N
Com que freqüência? Inf
Existem registros? N
B.3.4.10 É feito teste de pirogênio ou de endotoxinas? N
Com que freqüência? Inf
Existem registros? N
B.3.4.11 A circulação desta água é feita através tubulações? Inf
Qual é o material da tubulação? Inf
B.3.4.12 Existe um monitoramento contínuo da qualidade da água para
injetáveis? Inf
B.3.4.13 Existe um sistema que impeça a utilização da água se
estiver
fora das especificações? N
B.3.4.14 O Controle da Qualidade verifica se o sistema funciona
adequadamente? N
Existem registros? N
B.3.4.15 É feita a sanitização do sistema? N
Como? Inf
Qual é a freqüência? Inf
Existem registros? N
B.3.4.16 Existem procedimentos escritos para a sanitização do
sistema? R
São utilizados? R
B.3.4.17 É feita manutenção preventiva dos equipamentos do sistema?
R
Qual é a freqüência? Inf
Existem registros? R
B.3.4.18 O sistema de produção de água injetáveis está validado
de forma a garantir o cumprimento das especificações estabelecidas
pelas edições
vigentes da Farmacopéia Européia ou Farmacopéia dos Estados Unidos
da América do
Norte? N
Existem registros? N
B.4 RECEPÇÃO E ARMAZENAMENTO
B.4.1 Matéria-prima e Recipientes
B.4.1.1 No recebimento, as matérias-primas e recipientes são
examinados
visualmente para verificar se sofreram danos
durante o transporte? R
B.4.1.2 Existem documentos adequados para registrar a sua recepção?
R
B.4.1.3 Estão devidamente preenchidos? R
B.4.1.4 Quando do seu recebimento, cada lote de matéria-prima a
recipientes
recebe um número de registro? N
B.4.1.5 Esse número é usado para identificar a matéria-prima
e recipientes durante toda a sua utilização? N
B.4.1.6 As matérias-primas e recipientes permanecem em quarentena
até a sua liberação pelo Controle da Qualidade? N
B.4.1.7 Existem etiquetas apropriadas para a identificação das
matérias-primas
e recipientes em quarentena? N
B.4.1.8 As etiquetas de identificação, quarentena, aprovação, etc.
são afixadas no corpo da embalagem e não sobre a tampa? N
B.4.1.9 Todas as matérias-primas e recipientes sem exceção, são
amostradas pelo Controle da Qualidade, de acordo com sistemas
adequados e confiáveis? N
B.4.1.10 As matérias-primas e recipientes aprovados e etiquetados
como tal, são imediatamente transferidos para as áreas
normais de armazenamento no caso de não existir um sistema
adequado de segregação? N
B.4.1.11 As matérias-primas e recipientes reprovados, são
devidamente
identificados e segregados? N
B.4.1.12 A disposição do armazenamento é adequada e racional, a
fim de preservar a identidade e a integridade das
matérias-primas e recipientes? R
B.4.1.13 Existem fichas de estoque para cada material armazenado?
Inf
B.4.1.14 Existe outro sistema adequado para o controle do estoque
Qual? Inf
B.4.1.15 É funcional? R
B.4.1.16 As embalagens, tambores, barricas, caixas, etc
estão adequadamente fechadas? R
B.4.1.17 O uso das matérias-primas e recipientes respeita a ordem
de entrada utilizando-se primeiro a entrada mais antiga? R
B.4.1.18 Existem recipientes para lixo? Inf
Estão identificados? R
Estão bem fechados? R
São esvaziados com freqüência? R
B.4.2 Material de Embalagem
B.4.2.1 O material de embalagem é examinado
visualmente quando chega, para verificar se sofreu danos durante o
transporte? R
B.4.2.2 Existem documentos apropriados para sua recepção? R
B.4.2.3 Estão devidamente preenchidos? N
B.4.2.4 O material de embalagem é conservado em quarentena até a
sua liberação pelo Controle de Qualidade? N
B.4.2.5 Existem etiquetas apropriadas para identificação do
material de embalagem em quarentena? N
B.4.2.6 Os materiais de embalagem são todos, sem exceção,
amostrados pelo Controle de Qualidade com sistemas apropriados e
confiáveis? N
B.4.2.7 Os materiais de embalagem aprovados, recebem etiquetas de
identificação
e são levados imediatamente para as áreas normais de armazenamento
em caso de não existir um sistema adequado de segregação? N
B.4.2.8 Os materiais de embalagem rejeitados são claramente
identificados e isolados em locais apropriados? N
B.4.2.9 A disposição do armazenamento é adequada e racional, a fim
de
preservar a integridade e identidade dos materiais? R
B.4.2.10 Existem fichas de estoque para cada material
armazenado? Inf
B.4.2.11 Existe outro sistema adequado de controle de estoque? Inf
B.4.2.12 É funcional? R
B.4.2.13 Existe uma área destinada ao armazenamento de
etiquetas e rótulos de papel? N
B.4.2.14 Na área, é permitida a entrada somente de pessoas
autorizadas? N
B.4.2.15 O uso do material é feito por ordem de chegada, ou seja,
utiliza-se o mais antigo em primeiro lugar? R
B.4.2.16 As embalagens estão bem fechadas? R
B.4.2.17 Existem recipientes para lixo? Inf
Estão identificados? R
Estão bem fechadas? R
São esvaziados com freqüência? R
B.4.3 Produto Acabado
B.4.3.1 Os produtos estão armazenados em área física
própria, separados de outros materiais? N
B.4.3.2 Existem áreas os sistemas que garantam a
quarentena de produtos até a liberação pelo Controle de Qualidade?
N
B.4.3.3 Os produtos estão identificados adequadamente como "em
quarentena"
no caso de não existir uma área ou sistema que garanta a manutenção
dos mesmos? INF
B.4.3.4 Existe um sistema eficaz que evite a expedição de produtos
em quarentena? N
B.4.3.5 O local está limpo? R
B.4.3.6 Está bem ventilado? R
B.4.3.7 Está bem iluminado? R
B.4.3.8 Se existe necessidade de manter valores pré-fixados de
umidade
e temperatura, os mesmos são controlados?
Verificar os registros durante a inspeção? R
B.4.3.9 Existem registros de produtos recebidos? R
B.4.3.10 Mantém-se registros de produtos expedidos? R
B.4.3.11 A saída dos produtos da área obedece a uma ordem
cronológica de entrada? R
B.4.3.12 Os produtos estão separados com espaço suficiente entre si,
a fim de evitar
possíveis misturas entre lotes ou produtos? R
B.4.3.13 Os produtos são empilhados com segurança? R
B.4.3.14 Os produtos estão armazenados sem contato direto com o
piso? R
B.4.3.15 Há espaço adequado entre os produtos e as paredes para
facilitar a inspeção, limpeza e conservação? R
B.4.3.16 As áreas estão protegidas contra a entrada de roedores,
insetos e aves? R
B.4.3.17 Existe um programa de controle de roedores, insetos e aves?
R
B.4.3.18 Existe um local para o armazenamento de produtos que
necessitam
de baixas temperaturas, se for o caso? R
B.4.3.19 As superfícies de piso, paredes e tetos são de fácil
limpeza? R
B.4.3.20 Todos os produtos armazenados tem o número de lote
visivelmente
identificados em suas caixas e frascos? N
B.4.3.21 Todos os produtos armazenados tem a data de vencimento
claramente
identificada em suas caixas e frascos? N
B.4.3.22 Todos os produtos armazenados estão dentro de seu prazo de
validade? N
B.4.3.23 Os produtos vencidos são imediatamente retirados do estoque
B.4.3.24 Existe um controle de distribuição a nível primário dos
produtos expedidos, de modo a permitir a identificação
de seu destino, e se necessário a sua recuperação? R
B.4.4 Devoluções e/ou Recolhimento de Produtos
B.4.4.1 Existe um protocolo que acompanha o produto devolvido? R
B.4.4.2 Existe uma área ou sistema para a recepção e o armazenamento
dos
produtos devolvidos ou recolhidos do mercado? R
B.4.4.3 Estes produtos são identificados como tais? R
B.4.4.4 São tomados cuidados especiais, por parte das pessoas
responsáveis,
com relação a essas devoluções? R
B.4.4.5 O Controle de Qualidade é imediatamente avisado sobre o
recebimento de produto devolvido ou recolhido do mercado? N
B.4.4.6 São tomadas providências imediatas quanto à destruição ou
recuperação
do lote em questão, conforme a decisão do Controle de Qualidade?
N
B.4.4.7 As pessoas responsáveis são avisadas dos problemas
ocorridos,
para que sejam tomadas as devidas providencias e para que não haja
reincidência em outros lotes do mesmo produto? N
B.4.4.8 Os resultados das inspeções e análises são registrados? R
B.4.4.9 Todas as decisões tomadas são devidamente registradas? R
B.4.4.10 A empresa estabelece e mantém procedimentos para o pronto
recolhimento de produtos no mercado? R
B.4.4.11 Existe uma pessoa responsável, designada para coordenação
e execução deste procedimento? R
B.4.4.12 São mantidos registros sobre o recolhimento de produtos do
mercado, assim como sobre as suas causas? R
B.4.4.13 Em caso de recolhimento de produtos por desvios da
qualidade,
as autoridades competentes do País e do(s) demais Estados Partes
são informadas imediatamente? I
B.4.4.14 Os registros de distribuição a nível primário dos produtos
ficam
disponíveis para uma pronta ação de recolhimento do mercado? R
B.4.4.15 Esses registros contém informações que permitem o
rastreamento
e a determinação de quais são os destinatários
resultantes dessa distribuição primaria? R
B.4.4.16 Existem relatórios conclusivos sobre todo processo de
recolhimento e o destino de cada um desses produtos? R
B.5 PRODUÇÃO
B.5.1 Pessoal
B.5.1.1 Quem é o responsável pela produção? Inf
B.5.1.2 Qual seu nível profissional? Inf
B.5.1.3 Possui qualificação e competência necessárias para exercer
esta função? R
B.5.1.4 Existe um organograma? R
B.5.1.5 Existe pessoal técnico e especializado em número suficiente?
INF
B.5.1.6 Existe um programa de treinamento para o pessoal? R
B.5.1.7 A admissão de pessoal é precedida de exame médico? N
B.5.1.8 Esse exame é repetido periodicamente? R
B.5.1.9 O pessoal, cujo estado de saúde seja duvidoso, é
imediatamente
afastado de seu local de trabalho até que esteja recuperado? I
B.5.2.10 Existe um Plano de Assistência Médica, permanente e de
emergência? INF
B.5.2 Condições Gerais das Áreas de Produção
Preencher formulário por edifício.
B.5.2.1 O edifício encontra-se externamente em bom estado? R
B.5.2.2 Os arredores do edifício estão limpos e sem lixo? INF
B.2.3 O teto, as paredes e as janelas estão em boas condições? R
B.2.4 Existe indústrias poluentes nos arredores do edifício? inf
B.5.2.5 Existe proteção contra entrada e roedores, insetos e aves?
INF
B.5.2.6 As áreas de produção estão limpas? N
B.5.2.7 Existe um programa escrito de limpeza? R
B.5.2.8 É proibido comer, beber e fumar nas áreas de produção? I
B.5.2.9 Existem vestiários em quantidade suficiente? Inf
B.5.2.10 Existem sanitários em quantidade suficiente? Inf
B.5.2.11 Os sanitários e vestiários estão limpos e bem organizados?
N
B.5.2.12 Existe cantina e/ou restaurante? Inf
B.5.2.13 Existem normas escritas de segurança? Inf
São cumpridas? R
B.5.2.14 Os extintores e o sistema de água para incêndios estão
corretamente localizados? R
B.5.2.15 O pessoal está usando uniformes e sapatos apropriados para
o trabalho? N
B.5.2.16 Nas áreas de produção entram somente pessoas com roupas
apropriadas? N
B.5.2.17 Os pisos são adequados para cada área específica de
trabalho? R
B.5.2.18 Existe proteção contra entrada de roedores, insetos e aves?
N
B.5.2.19 Existe um programa de controle contra roedores, insetos e
aves? R
B.5.2.20 A circulação interna é adequada? R
B.5.2.21 A iluminação da área de circulação é suficiente? R
B.5.2.22 A ventilação da área de circulação é suficiente? R
B.5.2.23 O sistema de esgoto é adequado? R
B.5.2.24 Os ralos possuem sifões? N
B.5.2.25 São desinfetados freqüentemente? N
B.5.2.26 As instalações elétricas estão em boas condições? R
B.5.2.27 As tubulações de água, vapor, gás, ar comprimido,
eletricidade etc.,
estão devidamente identificadas? R
B.5.2.28 As tubulações não apresentam pontos mortos? R
B.5.2.29 As paredes, tetos estão revestidos de material facilmente
lavável? R
B.5.2.30 As paredes, tetos e pisos não tem rachaduras e não
apresentam pintura descascada? R
B.5.2.31 Os recipientes para a coleta de lixo, existentes nos
diversos setores,
estão bem tampados? N
B.5.2.32 São esvaziados freqüentemente? R
B.5.2.33 Qual é a área, em metros quadrados, ocupada para a produção
farmacêutica, excluindo os almoxarifados? Inf
B.5.2.34 Qual o número de funcionários do setor de produção? Inf
B.5.2.35 Qual é a relação de pessoas por m² de área? Inf
B.5.2.36 Existe um sistema para controlar a entrada de pessoal não
autorizado
nas áreas gerais de produção? R
B.5.3 Setor de Pesagem
B.5.3.1 A área está fisicamente segregada das demais dependências
por paredes ou outro tipo de separação? N
B.5.3.2 Os materiais usados para pesagem (recipientes, espátulas,
pipetas, etc.) estão limpos? N
B.5.3.3 Estes materiais são guardados em lugar limpo? R
B.5.3.4 As balanças são aferidas regularmente e calibradas
periodicamente? N
B.5.3.5 Existem registros destas calibrações e aferições? R
B.5.3.6 São usados equipamentos de proteção (luvas, óculos, gorros
máscaras, etc.) quando abertos? N
B.5.3.7 Os recipientes, que contém uma matéria-prima a ser pesada
são limpos antes de serem abertos? N
B.5.3.8 Depois da pesagem esses recipientes são bem fechados? N
B.5.3.9 Após a pesagem, os materiais são imediatamente identificados
a fim de evitar misturas? N
B.5.3.10 Nesta identificação constam:
Nome e número de lote do produto ao qual se destina a matéria-prima.
N
Nome e número de lote da matéria-prima. N
Quantidade que foi pesada. N
Controle de pesagem com o visto do funcionário que pesou e do que
conferiu a pesagem. R
B.5.3.11 Os funcionários estão com uniformes limpos? N
B.5.3.12 A área é ventilada adequadamente? N
B.5.3.13 Possui algum sistema de exaustão para prevenir contaminação
cruzada durante a pesagem? N
B.5.3.14 A área está iluminada adequadamente? N
B.5.3.15 Há separação física entre os materiais já pesados para cada
lote de produto? N
B.5.3.16 A área possui local próprio para lavagem de utensílios de
pesagem? Inf
B.5.3.17 Os recipientes usados na pesagem de matérias-primas são
reutilizados? Inf
Neste caso, estão adequadamente limpos e livres de identificações
anteriores? N
B.5.3.18 As matérias-primas mais antigas são usadas em primeiro
lugar? R
B.5.4 Setor de Preparação de Soluções
B.5.4.1 A área ocupada é adequada para o volume das operações? R
B.5.4.2 Qual a área, em metros quadrados, ocupada pelo setor? Inf
B.5.4.3 Qual o número de funcionários existentes no setor? Inf
B.5.4.4 Qual o número de funcionários por m² da área? Inf
B.5.4.5 A distribuição dos equipamentos é ordenada, racional e
adequada ao
volume de operações? Inf
B.5.4.6 Quando necessário, são usados gorros, luvas, máscaras
e protetores oculares? N
B.5.4.7 Os uniformes são utilizados exclusivamente nesta área? N
Os uniformes são lavrados com procedimentos adequados,
sob a responsabilidade da empresa? N
B.5.4.8 Existe no local um sistema de renovação de ar? R
B.5.4.9 Existe um procedimento de fabricação (ficha técnica de
fabricação FTF)a ser seguido, que apresente uma cópia
fiel da fórmula padrão. I
B.5.4.10 As instruções contidas no procedimento de fabricação
são seguidas com exatidão? N
B.5.4.11 Cada fase crítica da produção recebe um visto do
operador e do supervisor imediato? N
B.5.4.12 Todos os recipientes usados na produção de um lote
estão identificados de acordo com o conteúdo e número
do lote e sublote, a fim de evitar misturas? N
B.5.4.13 Todos equipamentos usados na fabricação de um lote
estão identificados? N
B.5.4.14 Depois de usado, todos os utensílios, equipamentos e
recipientes são lavrados e, se necessário, esterilizados
e conservados assim, até serem novamente usados? N
B.5.4.15 São identificados por etiquetas que assegurem essas
condições? N
B.5.4.16 Existe uma adequada separação física entre os
equipamentos para evitar misturar e contaminações
cruzadas, quando há fabricação simultânea de lotes de
diferentes produtos? N
B.5.4.17 São efetuados controles durante o processo de
fabricação a fim de garantir a qualidade do lote? N
B.5.4.18 Existem registros, por escrito, desses controles? N
B.5.4.19 Os tanques contendo o produto a ser envasado, estão
bem fechados e identificados com, pelo menos, os seguintes dados:
N
B.5.4.19.1 Nome do produto; N
B.5.4.19.2 Número do lote e sublote; N
B.5.4.19.3 Quantidade de solução contida no tanque; N
B.5.4.20 Os tanques, contendo a solução a ser envasada, são
manipulados de modo a garantir a não contaminação
do produto? N
B.5.4.21 Existem instruções escritas para especificar a
porosidade que deverá ser usada para a filtração
final dos produtos? R
B.5.4.22 Estas instruções contém o tempo máximo de utilização
destes filtros? R
B.5.4.23 São realizados ensaios para determinar a integridade
dos filtros? N
B.5.4.3.1 Quais? Inf
B.5.4.3.2 Existem registros? N
B.5.5 Setor de Lavagem de Recipientes de Vidro
B.5.5.1 Existe um local separado para lavagem dos recipiente
de vidro? N
B.5.5.2 A área ocupada é adequada para o volume das
operações? Inf
B.5.5.3 Os equipamentos são adequados e a sua distribuição é
ordenada e racional em relação ao volume das operações? Inf
B.5.5.4 A área de circulação está livre de obstáculos? R
B.5.5.5 Os uniformes utilizados são adequados? N
Estão limpos e em boas condições? N
São usados somente nas dependências na área produtiva? R
B.5.5.6 As máquinas de lavar recipientes de vidro possuem
pressão suficiente para cumprir sua finalidade? R
B.5.5.7 Qual e o tipo de água utilizada na alimentação das
máquinas de lavagem dos frascos? Inf
B.5.5.8 Existe algum tipo de filtro no sistema de lavagem
dos recipientes? R
B.5.5.9 Os recipientes lavados e secos são transferidos com
segurança para área de envase, evitando uma possível
contaminação? N
B.5.5.10 Os recipientes lavados e secos são devidamente
identificados como tais? INF
B.5.6 Setor de Envase
B.5.6.1 Existem áreas de ambiente controlado para envase
dos frascos? I
B.5.6.1.1 Indicar classificação da sala de envase. Inf
B.5.6.1.2 Indicar a classificação da área sobre a linha de
envase. Inf
B.5.6.2 A área ocupada é adequada para o volume das operações? R
B.5.6.3 A distribuição dos equipamentos é ordenada e racional? Inf
B.5.6.4 Os funcionários estão adequadamente uniformizados
e limpos? N
B.5.6.5 Todos usam gorros, luvas e máscaras? N
B.5.6.6 Os uniformes são específicos para a área de envase? N
B.5.6.7 São lavados com procedimentos adequados, sob a
responsabilidade da empresa? N
B.5.6.8 Existem vestiários específicos para entrada nesta área? R
B.5.6.9 Existe sistema de filtração de ar? N
B.5.6.10 A eficiência dos filtros é verificada com freqüência? N
Existem registros? R
B.5.6.11 A sala possui pressão positiva de ar? N
B.5.6.12 São feitos controles freqüentes do volume de envase? N
B.5.6.13 O Controle de Qualidade verifica freqüentemente o
volume dos recipientes? Inf
B.5.6.14 Existe registro, por escrito, destas verificações? R
B.5.6.15 A entrada de pessoal na área é devidamente controlada? N
B.5.7 Setor de Esterilização
B.5.7.1 Os autoclaves estão identificados adequadamente? R
B.5.7.2 Existem registradores de pressão e temperatura? N
B.5.7.3 Existem registros, por escrito, destes dados? N
B.5.7.4 Existem instruções por escrito, sobre o tempo e
temperatura da autoclavação? N
B.5.7.5 Realizam-se, periodicamente, ensaios físicos e
biológicos para a verificação do funcionamento das
autoclaves? N
B.5.7.6 Existem registros por escrito? N
B.5.7.7 Se os recipientes envasados não estiverem
identificados, os carros que os contém, estão
devidamente identificados? N
B.5.7.8 Depois da autoclavação, há algum ensaio para
verificar se os frascos estão bem fechados? R
B.5.7.9 A área ocupada pelos autoclaves é adequada ao volume
das operações? Inf
B.5.7.10 A distribuição dos equipamentos é ordenada e racional? R
B.5.7.11 Os funcionários estão adequadamente uniformizados? N
B.5.7.12 Todos usam gorros, e quando necessário luvas especiais?
N
B.5.7.13 Existe algum sistema que identificação dos produtos
não esterilizados dos já esterilizados? N
B.5.8 Setor de Inspeção, Rotulagem e Embalagem
B.5.8.1 Existe inspeção dos produtos envasados e esterilizados? I
B.5.8.2 O método de inspeção utilizado é adequado? Inf
B.5.8.3 Os recipientes já inspecionados estão devidamente
identificados? N
B.5.8.4 O acesso aos rótulos é permitido somente a pessoas
devidamente autorizadas? N
B.5.8.5 Os rótulos são individualmente inspecionados antes
de serem entregues à linha de embalagem? N
B.5.8.6 As máquinas rotuladoras são inspecionadas, antes do
seu uso, para que não haja rótulos de produtos/lotes
anteriores? N
B.5.8.7 As sobras de rótulos carimbados são destruídos logo
após o término da embalagem? N
B.5.8.8 O responsável para estocagem dos rótulos verifica a
quantidade devolvida e os armazena cuidadosamente, a
fim de evitar misturas? N
B.5.8.9 Existe um local especial para embalagem final dos
produtos? Inf
B.5.8.10 A área ocupada é adequada ao volume das operações? Inf
B.5.8.11 A separação entre as linhas de embalagens é
suficiente para evitar misturas de produtos diferentes
ou de lotes diferentes do mesmo produto? N
B.5.8.12 A área de circulação está livre? R
B.5.8.13 Os operadores estão devidamente uniformizados? R
B.5.8.14 Todos usam gorros e, quando necessário luvas, máscaras
e óculos de proteção? R
B.5.8.15 A ventilação do local é suficiente? R
B.5.8.16 As condições de segurança do local são adequadas? R
B.5.8.17 As linhas de embalagem são verificadas para que não
haja material sobrando de produtos/lotes anteriores,
antes de iniciar as operações? N
B.5.8.18 Os produtos a serem embalados estão devidamente
identificados quanto ao seu conteúdo? N
B.5.8.19 Os produtos são mantidos cobertos e protegidos da
luz, se for necessário, durante todo o processo? N
B.5.8.20 Os produtos diferentes são mantidos separados? N
B.5.8.21 Todo material de embalagem a ser usado tem registro
de aprovação pelo Controle de Qualidade? N
B.5.8.22 Cada linha de embalagem, está visivelmente identificada
de acordo com o produto que está sendo embalado? N
B.5.8.23 Verifica-se a relação entre o rendimento teórico e o
rendimento real? R
B.5.8.24 Se houver discrepância, ela é justificada por escrito? R
B.5.9 Registros de Produção
B.5.9.1 Existe uma fórmula padrão para cada produto a ser
fabricado? I
B.5.9.2 Essa fórmula padrão foi preparada e assinada por um
responsável e assinada por outra pessoa, também
responsável e competente? I
B.5.9.3 A fórmula padrão deve conter:
B.5.9.3.1 O nome a fórmula e forma farmacêutica do produto; N
B.5.9.3.2 Quantidade teórica a ser do produzida; N
B.5.9.3.3 O nome e quantidade de cada matéria-prima com seus
códigos; N
B.5.9.3.4 Instruções detalhadas das etapas de fabricação, com
indicações do equipamento a ser usado; N
B.5.9.3.5 Instruções adequadas para a rotulagem e embalagem
do produto. N
B.5.9.4 Se for necessário modificar a fórmula padrão original
existem procedimentos escritos a serem seguidos? N
B.5.9.5 Existe ordem de produção para cada lote fabricado? N
B.5.9.6 Essa ordem deve conter:
B.5.9.6.1 Instruções detalhadas das etapas de fabricação, com
lugares apropriados para assinatura dos responsáveis
e indicações dos equipamentos a serem usados. N
B.5.9.6.2 O registro do número de lote do produto. I
B.5.9.6.3 Registro do número de lote das matérias-primas a
serem usadas. N
B.5.9.6.4 Cálculo da quantidade de matéria-prima de acordo
com sua pureza. N
B.5.9.6.5 Existe um responsável pelo cálculo da matéria-prima? N
B.5.9.6.6 Esse cálculo é referendado por outro responsável? N
B.5.9.6.7 São confrontados os cálculos do rendimento real,
obtido nas diversas etapas de fabricação com o
rendimento teórico esperado? R
B.5.9.6.8 Qualquer modificação nas instruções é registrada
em local apropriado e é aprovada por pessoa competente
e autorizada? N
B.5.9.6.9 Após a finalização do processo de fabricação, toda
documentação sobre o lote produzido (registro de produção, rótulos,
resultados analíticos, etiquetas de identificação, gráficos de
esterilização
(de componentes e de produto acabado, etc.) é arquivada para
referência
futuras? N
B.5.10 Recipientes Plásticos
B.5.10.1 Os recipientes plásticos para as SPGV são produzidos
na empresa? Inf
B.5.10.2 Os recipientes plásticos para as SPGV são fornecidos
lacrados por termosselagem ou qualquer outro sistema? R
B.5.10.3 Os recipientes plásticos são entregues em embalagem
que assegure sua integridade e limpeza? R
B.5.10.4 Quem é o responsável pela produção? Inf
B.5.10.5 Qual é o seu nível profissional? Inf
B.5.10.6 Possui qualificação e competência para esta função? R
B.5.10.7 Existe um organograma? R
B.5.10.8 Existe um programa de treinamento para o pessoal? R
B.5.10.9 O edifício encontra-se externamente em bom estado? R
B.5.10.10 Os arredores do edifício estão limpos e sem lixo? Inf
B.5.10.11 Existe proteção contra a entrada de roedores,
insetos e aves? N
B.5.10.12 Existe um programa de combate contra roedores,
insetos e aves? R
B.5.10.13 A área de produção está limpa? N
B.5.10.14 Existe um programa escrito de limpeza? R
B.5.10.15 É proibido comer, beber e fumar nas áreas de
produção? I
B.5.10.16 Existe sanitários em quantidade suficiente? Inf
Estão limpos? N
B.5.10.17 Existem normas escritos de segurança? Inf
São cumpridas? R
B.5.10.18 Os extintores e o sistema de água para incêndio
estão corretamente localizados? R
B.5.10.19 O pessoal está usando uniformes e calçados
apropriados para o trabalho? N
B.5.10.20 Nas áreas de produção entram somente pessoas com
roupas apropriadas? N
B.5.10.21 O piso é adequado? R
B.5.10.22 A circulação interna é adequada? R
B.5.10.23 A iluminação e a ventilação das áreas de circulação
são suficientes? R
B.5.10.24 O sistema de esgoto é adequado? R
B.5.10.25 Os raios possuem sifões? N
São desinfetados? N
B.5.10.26 As instalações elétricas estão em boas condições? R
B.5.10.27 As tubulações de água, ar comprimido, eletricidade
etc. estão devidamente identificadas? R
B.5.10.28 As paredes e tetos estão revestidos de material
facilmente lavável? R
B.5.10.29 As paredes, tetos e pisos estão isentos de
rachaduras e não apresentam pintura descascada? R
B.5.10.30 Existem recipientes para lixo? Inf
Estão identificados? R
Estão bem fechados? R
São esvaziados com freqüência? R
B.5.10.31 Existe um sistema para controlar a entrada de
pessoal não autorizado na área de produção? R
B.5.10.32 Todos os funcionários usam protetores articulares? R
B.5.10.33 A distribuição dos equipamentos é racional e
ordenada? R
Qual o número de equipamentos para a produção de
ampolas plásticas? Inf
Qual a capacidade diária de produção, por
apresentação? Inf
B.5.10.34 Existem instruções escrita para a utilização de
cada equipamento? R
B.5.10.35 Existe controle de utilização de cada equipamento? R
Existem registros? R
B.5.10.36 Existe programa de limpeza para cada equipamento
utilizado? R
Existem registros? R
B.5.10.37 Existe um sistema de manutenção dos equipamentos? R
Existem registros? R
Qual a periodicidade? Inf
B.5.10.38 O ar utilizado para o processo do sopro dos
recipientes plásticos é filtrado? I
Qual o sistema de filtração usado? Inf
B.5.10.39 A matéria-prima utilizada é liberada pelo Controle
de Qualidade? N
Existem registros? R
B.5.10.40 Existe identificação de cada lote produzido? N
Qual é o critério? Inf
B.5.10.41 São realizados ensaios físicos? N
Com que freqüência? Inf
Existem registros? R
B.5.10.42 São realizados ensaios biológicos? N
Com que freqüência? Inf
Existem registros? R
B.5.10.43 São realizados ensaios químicos? N
Com que freqüência? Inf
Existem registros? R
B.5.10.44 O Controle de Qualidade libera cada lote produzido? N
B.5.10.45 Os lotes são adequadamente protegidos para o transporte?
N
Como? Inf
B.6 CONTROLE DE QUALIDADE
B.6.1 Existe na empresa um laboratório de Controle de
Qualidade? I
B.6.2 Existe organograma do laboratório de Controle de Qualidade?
R
B.6.3 O Controle de Qualidade é responsável por aprovar ou
rejeitar matérias-primas, produtos em processo e seus
recipientes, produtos acabados, recipiente para envase,
material de embalagem e outros? I
B.6.4 A quem se reporta o responsável pelo Controle de
Qualidade? Inf
B.6.5 Qual é a formação profissional do responsável pelo
Controle de Qualidade? Inf
B.6.6 O Controle de Qualidade está equipado para exercer
sua função? I
B.6.7 Possui pessoal técnico qualificado? N
B.6.8 A área é adequada? R
B.6.9 Possui área adequada para equipamentos sensíveis? R
B.6.10 São efetuados ensaios biológicos e microbiológicos? I
B.6.11 Há uma sala especial para ensaios de esterilidade e
microbiologia? I
B.6.12 Possui biotério? Inf
B.6.12.1 Está localizado dentro ou fora do edifício? Inf
B.6.12.2 Se dentro do edifício, as instalações de ar
condicionado estão totalmente separadas de qualquer outro sistema?
N
B.6.12.3 Existem registros das condições ambientais do biotério?
R
B.6.12.4 A limpeza do local é adequada? N
B.6.12.5 Os animais estão bem alojados, bem alimentados e
gozam de boa saúde? N
B.6.13 Existe um procedimento escrito para a manutenção
preventiva e de calibração dos aparelhos utilizados? R
B.6.14 O programa é cumprido? R
Existem registros? R
B.6.15 O Controle de Qualidade mantém registros por escrito,
de todos os ensaios efetuados? I
B.6.16 São guardadas amostras de referência das matérias-primas
utilizadas? N
Existe um prazo definido? Inf
B.6.17 São observadas amostras de referência de cada lote
de produto acabado, em sua embalagem final? I
Por quanto tempo? R
B.6.18 Existem funcionários do Controle de Qualidade,
designados especialmente para o controle em processo
(inspetores de produção)? R
B.6.19 Todos os ensaios necessários (matérias primas,
material de embalagem, semi-acabados e acabados) são
realizados pelo Controle de Qualidade? N
B.6.20 O Controle de Qualidade verifica se cada lote do
produto atende às especificações estabelecidas, antes
de ser liberado? I
B.6.20.1 O Controle de Qualidade verifica toda a documentação
do processo? I
B.6.21 O Controle de Qualidade tem especificações escritas
para todas as matérias-primas, material de embalagem,
produtos intermediários e produtos acabados? N
B.6.22 O Controle de Qualidade tem, por escrito, todos os
procedimentos de amostragem e os métodos analíticos utilizados? N
B.6.23 Existem instalações de segurança no laboratório
(chuveiro, lava-olhos etc.)? R
B.6.23.1 Existe um programa de verificação do funcionamento
destes equipamentos? Inf
B.6.23.2 Existem registros? R
B.6.24 Existe algum procedimento com relação aos padrões de
referência e sua manutenção? R
B.6.25 Os procedimentos usados pelo Controle de Qualidade
são suficientes para assegurar a qualidade dos lotes fabricados?
N
B.6.26 Existem controles efetuadas por laboratórios controlados?
Inf
Que controles? Inf
Existem contratos? Inf
B.6.27 O Controle de Qualidade é responsável por aprovar
ou rejeitar produtos fabricados e analisados sob contrato com
terceiros? I
B.7 GARANTIA DE QUALIDADE
B.7.1 Existe na empresa um Programa de Garantia da Qualidade? Inf
B.7.1.1 Esse programa é divulgado em todos os níveis? Inf
B.7.2 Existem normas escritas para a divulgação e
cumprimento das Boas Práticas de Fabricação? R
B.7.2.1 Estas normas são seguidas? R
B.7.3 Existe na empresa uma área que coordena as atividades
de Garantia da Qualidade? Inf
B.7.4 Estão claramente definidas as responsabilidades
pela gestão da qualidade? R
B.7.5 Existem procedimentos escritos ou sistemas para
avaliar a efetividade e aplicabilidade das normas e
sistemas de Garantia de Qualidade? Inf
B.7.6 Existe um programa de treinamento de pessoal? R
B.7.6.1 Efetuam-se registros do treinamento de cada
funcionário? R
B.7.7 Os produtos farmacêuticos são projetados e
desenvolvidos de acordo com os requisitos das Boas
Práticas de Fabricação? N
B.7.8 As operações de produção e controle estão claramente
definidas e escritas? N
B.7.9 Os funcionários são treinados e orientados de modo
a garantir a correta e completa execução dos
processos e procedimentos definidos? R
B.7.10 Novos conhecimentos adquiridos nos processos, ou
adaptações e melhorias, somente são implementados
após completa avaliação e aprovação? R
B.7.11 São realizadas auto-inspeções periódicas para
verificar o cumprimento das Boas Práticas de Fabricação? R
B.7.11.1 Existem registros? R
B.7.12 Existe um programa escrito para estudo de estabilidade
dos produtos com: condições dos testes,
registros dos resultados, métodos analíticos usados,
condições de conservação das amostras, envases primários,freqüência
das
análises e data de vencimento? N
B.7.12.1 O programa é cumprido? N
B.7.13 Existe um sistema de acompanhamento que permita
verificar se o produto mantém a qualidade durante o
prazo de validade, mantidas as condições de
armazenamento preestabelecidas? N
B.7.13.1 O procedimento é cumprido? N
B.7.14 São mantidos registros das reclamações recebidas
sobre a qualidade dos produtos ou qualquer
modificação de suas características físicas, assim
como das decisões tomadas? R
B.7.14.1 As ações tomadas com relação às reclamações e
devoluções de produtos são registradas a fim de
esclarecer qual foi a decisão? R
B.7.15 Existe na empresa um programa de verificação
documentada para os ciclos de esterilização (por calor úmido)? I
B.7.15.1 O programa é cumprido? I
B.7.15.2 Existem protocolos pré-estabelecidos? N
B.7.15.3 Existem registros? N
B.7.16 Existe na empresa um programa de verificação
documentada para métodos analíticos de controle
que não constem em farmacopéias adotadas? R
B.7.16.1 O programa é cumprido? R
B.7.16.2 Existem protocolos pré-estabelecidos? R
B.7.16.3 Existem registros? R
É realizada uma nova verificação documentada toda
vez que se efetua uma mudança que possa afetar a
qualidade ou reprodutibilidade de um processo ou de
um método analítico de controle? N
ANEXO C
ESPECIFICAÇÕES E CONTROLE DE MATÉRIAS-PRIMAS
SOLUÇÕES PARENTERAIS DE GRANDE VOLUME - SPGV
CONTEÚDO
C-1. OBJETIVO
C-2. ÁGUA PARA INJETÁVEIS
C-3. PRINCÍPIOS ATIVOS(DROGAS)
C-4. REAGENTES E MÉTODOS GERAIS
C-1. OBJETIVO
Este Regulamento estabelece especificações para as matérias-primas
que devem ser utilizadas na fabricação de SPGV, e os respectivos os
procedimentos para controles.
C-2. ÁGUA PARA INJETÁVEIS
A água para injetáveis é uma água obtida através de um sistema de
produção segundo as metodologias estabelecidas nas edições vigentes da
Farmacopéia Européia e da Farmacopéia dos Estados Unidos da América do
Norte, monitorado e validado, que garanta as especificações descritas nas
mesmas.
Nota: Na preparação de Soluções Parenterais a serem esterilizadas
terminalmente, devem ser tomadas medidas adequadas para minimizar o
crescimento bacteriano, esterilizando previamente a água para injetáveis e
logo protegendo-a da contaminação microbiana.
C-2.1 Especificações e procedimentos de controle
C-2.1.1 pH (USP XXIII-791)
Entre 5,0 e 7,0 determinado potenciométricamente em uma solução
preparada com a adição de 0,3 ml de solução saturada de cloreto de potássio
para 100 ml da amostra no ensaio.
C-2.1.2 Metais pesados
Tomar 40 ml de água para injetáveis, ajustar a um pH entre 3,0 e 4,0
com ácido acético 1N, adicionar 10 ml de sulfeto de higrogênio SR
recentemente preparado e deixar em repouso durante 10 minutos. Observar
sobre fundo branco: a amostra não deve apresentar-se mais escura que 50 ml
da mesma água adicionada da mesma quantidade de ácido acético 1N (pH entre
3,0 e 4,0), empregando-se na comparação tubos iguais.
C-2.1.3 Cálcio
A 100 ml de água para injetáveis, adicionar 2 ml de oxalato de
amonio SR: não deve aparecer turbidez.
C-2.1.4 Amônio
A 100 ml de água para injetáveis, acrescentar 2 ml de iodo
mercuriato de potássio alcalino SR: A cor amarelada produzida imediatamente,
não deve ser mais escura que a de uma preparada para controle com a água
purificada de alta pureza que contenha 0,3 mg/I de NH3.
C-2.1.5 Cloreto
A 100 ml de água para injetáveis, adicionar 5 gotas de ácido nítrico
e 1 ml de nitrato de prata SR; não deve apresentar turbidez nem
opalescência.
C-2.1.6 Sulfato
A 100 ml de água para injetáveis, adicionar 1 ml de cloreto de bário
SR: a mistura deve permanecer límpida.
C-2.1.7 Substâncias oxidáveis
A 100 ml de água para injetáveis, adicionar 10 ml de ácido sulfúrico
2N, aquecer até ebulição, acrescentar 0,1 ml de permanganato de potássio
0,1N; ferver novamente durante 10 minutos: a cor rosa não deve desaparecer
completamente.
C-2.1.8 Resíduos por evaporação
Evaporar em banho Maria 100 ml de água para injetáveis até secar, em
uma cápsula previamente tarada. Dessecar o resíduo a 105ºC durante 1 hora: o
resíduo deverá ser menor que 1 mg.(0,001%).
C-2.1.9 Dióxido de carbono
A 25 ml de água para injetáveis colocados em uma proveta de 50 ml
com tampa esmerilhada, acrescentar 25 ml de hidróxido de cálcio SR, tampar a
proveta e agitar: a mistura deve permanecer límpida.
C-2.1.10 Ensaios de Pirogênios
De acordo com "Ensaio de pirogênios"(Anexo M) utilizando 10 ml de
água para injetáveis previamente isotonizada por quilo de animal.
C-2.1.11 Endotoxinas bacterianas
De acordo com ensaio de "Endotoxinas bacterianas"(Anexo M) a água
para injetáveis não deve conter mais de 0,25 UE/ml.
C.2.1.12 Contagem total de microorganismos aeróbicos viáveis
Realizar o ensaio sobre três amostras consecutivas de 250 ml,
coletadas no mesmo ponto de amostragem, de acordo com a técnica descrita no
"Ensaio de contaminação microbiana"(Anexo M). Limite:
10 microorganismos por 100 ml.
C-3 Princípios ativos (Drogas)
C-3.1 Dextrose
C6H12O6H2O 198,17
D-Glicose monohidratada
Anidra 180,16
Dextrose é um açúcar obtido geralmente por hidrólise do amido.
Contém uma molécula de água de hidratação ou é anidra.
C-3.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.1.1.1 Embalagem e Conservação
Conservar em recipientes bem fechados.
C-3.1.1.2 Rotulagem
Rotulagem indicando se está hidratada ou se é anidra.
C-3.1.1.3 Identificação
Acrescentar algumas gotas de uma solução 1 em 20 a 5 ml de tartarato
cúprico alcalino SR quente: forma-se um precipitado vermelho de óxido
cuproso.
C-3.1.1.4 Cor da solução
Dissolver 25 g em água e levar a 50,0 ml de solução: a solução não
deve apresentar uma cor mais intensa que uma solução preparada misturando
1,0 ml de cloreto cobaltoso SR, 3 ml de cloreto férrico SR e 2 ml de sulfato
cúprido SR, com água até alcançar 10 ml e diluir 3 ml desta solução com água
até 50 ml. Fazer a comparação observando as soluções de cima para baixo nos
tubos para a comparação de cor contra uma superfície branca.
C-3.1.1.5 Rotação específica (USP XXIII - 781)
Entre + 52,6º e + 53,2º, calculada em base anidra, determinada em
uma solução que contenha 10 g de dextrose e 0,2 ml de hidróxido de amônio 6N
em cada 100 ml.
C-3.1.1.6 Acidez
Dissolver 5,0 g em 50 ml de água isenta de CO2. Acrescentar
fenolftaleína SR e titular com hidróxido de sódio 0,02N até aparecer uma
coloração rosa definido: não mais de 0,30 ml, são requeridos para a
neutralização.
C-3.1.1.7 Água, Método III (USP XXIII-921)
Secar a 105ºC durante 16 horas: a forma hidratada perde entre 7,5% a
9,5% de seu peso, a forma anidra perde não mais de 0,5% de seu peso.
C-3.1.1.8 Resíduo por incineração (USP XXIII-281)
Não mais de 0,1%.
C-3.1.1.9 Cloreto (USP XXII-221)
Uma porção de 2,0 g apresenta não mais cloreto que o correspondente
a 0,50 ml de ácido clorídrico 0,02N (0,018%).
C-3.1.1.10 Sulfato (USP XXIII-221)
Uma porção de 2,0g apresenta não mais sulfato que o correspondente a
0,50 ml, de ácido sulfúrico 0,02N (0,025%).
C-3.1.1.11 Arsênio, Método 1(USP XXIII-221)
Limite: 1 ppm.
C-3.1.1.12 Metais pesados (USP XXIII-231)
Dissolver 4,0g em água até alcançar 25 ml de solução. Limite: 5 ppm.
C-3.1.1.13 Dextrina
Fazer um refluxo de 1g de dextrose finamente pulverizada com 20 ml
de álcool: dissolve-se completamente.
C-3.1.1.14 Amido solúvel, sulfitos
A uma solução de 1 g em 10 ml de água acrescentar 1 gota de iodo SR:
o líquido apresenta cor amarelada.
C-3.2 CLORETO DE SÓDIO
NaCI 58,44
Cloreto de sódio
O cloreto de sódio deve conter de 99,0% a 101,0% de NaCI, calculado
em base seca. Não contém substâncias adicionadas.
C-3.2.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.2.1.1 Embalagem e Conservação
Conservar em recipientes bem fechados.
C-3.2.1.2 Identificação
Uma solução 1 em 20 responde aos ensaios para Sódio e para Cloreto
(USP XXIII-191)
C-3.2.1.3 Acidez ou alcalinidade
Dissolver 50,0 g em 200 ml de água isenta de CO2 e acrescentar 10
gotas de indicador de pH azul de bromotimol SI. Se a solução é amarelada,
requer não mais de 1,0 ml de hidróxido de sódio 0,02N para produzir uma cor
azul. Se a solução é azul ou verde, requer não mais de 3,12 ml de ácido
clorídrico 0,02N para produzir uma cor amarelada.
C-3.2.1.4 Perda por dessecação (USP XXIII-731)
Secar a 105ºC durante 2 horas: perde não mais de 0,5% de seu peso.
C-3.2.1.5 Arsênio, Método (USP XXII-211)
Limite: 3 ppm.
C-3.2.1.6 Bário
Dissolver 4,0 g em 20 ml de água, filtrar se necessário, e dividir a
solução em duas porções. A uma porção, acrescentar 2 ml de ácido sulfúrico
2N e à outra acrescentar 2 ml de água: as soluções são igualmente claras
depois de 2 horas de repouso.
C-3.2.1.7 Iodeto ou Brometo
Aquecer 2,0 g de cloreto de sódio finamente pulverizado em 25 ml de
álcool quente durante 3 horas, esfriar a mistura e eliminar o sal não
dissolvido por filtração. Evaporar o filtrado à secura, dissolver o resíduo
em 5 ml de água, acrescentar 1 ml de clorofórmio e introduzir
cuidadosamente, gota a gota, com agitação constante, 5 gotas de cloro SR
diluído 1 em 3: o clorofórmio não deve colorir de violeta, amarelo nem
laranja.
C-3.2.1.8 Cálcio e Magnésio
Dissolver 20g em 200 ml de água e acrescentar 0,1 ml de ácido
clorídrico, 5 ml de tampão amônio-cloreto de amônio SR e 5 gotas de negro de
eriocromo SR. Titular com etilenodiaminotetraacetato dissódico SV 0,005M até
ponto final azul puro. Cada ml de etilenodiaminotetraacetato dissódico
0,005M é equivalente a 0,2004 mg de Ca. Encontra-se não mais de 0,005% de
cálcio e magnésio (como Ca).
C-3.2.1.9 Ferro (USP XXIII-241)
Dissolver 5,0 g em 45 ml de água e 2 ml de ácido clorídrico: Limite:
2 ppm.
C-3.2.1.10 Sulfato (USP XXIII-221)
Uma porção de 1,0 g apresenta não mais sulfato que o correspondente
a 0,15 ml de ácido sulfúrico 0,02N (0,015%).
C-3.2.1.11 Ferrocianeto de sódio
Dissolver 25 g em 80 ml de água em um frasco ou proveta graduada de
100 ml com tampa de vidro. Acrescentar 2 ml de sulfato ferroso SR e 1 ml de
ácido sulfúrico 2 N, diluir com água a 100 ml e homogeneizar. Como controle,
colocar 80 ml de água em um frasco ou proveta graduada de 100 ml com tampa
de vidro acrescentar 2 ml de sulfato ferroso SR e 1 ml de ácido sulfúrico
2N, diluir com água a 100 ml e homogeneizar. Transferir porções de 50 ml das
respectivas soluções para tubos de comparação: a solução da amostra não deve
apresentar uma coloração azul mais intensa que o controle, indicando a
ausência de ferrocianeto de sódio.
C-3.2.1.12 Metais pesados, Métodos I (USP XXIII-231)
Limite: 5 ppm.
C-3.2.1.13 Potássio
Não mais de 500 ppm, determinado por espectrofotometria de chama
(Emissão), empregando uma solução a 1% P/V e realizando a medida a 768 nm.
C-3.2.1.14 Doseamento
Transferir aproximadamente 250 mg de cloreto de sódio, exatamente
pesados, a uma cápsula de porcelana, e acrescentar 140 ml de água e 1 ml de
diclorofluoresceína SR. Misturar e titular com nitrato de prata SV 0,1N até
que precipite o cloreto de prata e a mistura tome cor rosa claro. Cada ml de
nitrato de prata 0,1N é equivalente a 5,844 mg de NaCI.
C-3.3 CLORETO DE POTÁSSIO (RQ)
KCI 74,55
Cloreto de potássio
O cloreto de potássio deve conter de 99,0% a 100,5% de KCI,
calculado em base seca.
C-3.3.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.3.1.1 Embalagem e Conservação
Conservar em recipientes bem fechados.
C-3.3.1.2 Identificação
Uma solução 1 para 20 atende aos ensaios para Potássio e para
Cloreto (USP XXIII-191).
C-3.3.1.3 Acidez ou alcalinidade
A uma solução de 5,0 g em 50 ml de água isenta de CO2, acrescentar 3
gotas de fenolftaleína SR: não produz cor rosa. Em seguida, acrescentar 0,30
ml de hidróxido de sódio 0,02N: produz uma cor rosa.
C-3.3.1.4 Perda por dessecação (USP XXIII-731)
Secar a 105ºC durante 2 horas: perde não mais de 1% de seu peso.
C-3.3.1.5 Iodeto ou Brometo
Dissolver 2 g em 6 ml de água, acrescentar 1 ml de clorofórmio e
adicionar, gota a gota, com constante agitação, 5 ml de uma solução de
partes iguais de cloro SR e água: o clorofórmio não apresenta uma cor
violeta transitória nem laranja permanente.
C-3.3.1.6 Arsênio, Método I (USP XXIII-211)
Limite: 3 ppm.
C-3.3.1.7 Cálcio e Magnésio
A 20 ml de uma solução 1 em 100 acrescentar 2 ml de hidróxido de
amônio 6N, 2 ml de oxalato de amônio SR e 2 ml de fosfato sódico dibásico
SR: não produz turbidez dentro de 5 minutos.
C-3.3.1.8 Metais pesados (USP XXIII-231)
Dissolver 2,0 g em 25 ml de água. Limite: 0,001%.
C-3.3.1.9 Sódio
Uma solução 1 em 20 ensaiada sobre fio de platina, não produz uma
cor amarelada pronunciada na chama não luminosa.
C-3.3.1.10 Doseamento
Pesar exatamente em torno de 0,25 g de cloreto de potássio
previamente dessecado e transferir para um frasco com tampa de vidro.
Acrescentar sucessivamente 50 ml de solução 0,1N de nitrato de prata, 3 ml
de ácido nítrico e 5 ml de nitrobenzeno: misturar e agitar a mistura
fortemente, por um minuto: acrescentar 2 ml de solução de sulfato férrico
amoniacal SR, e dosar o excesso de nitrato de prata com solução 0,1N de
tiocianato de amonio até coloração pardo-avermelhado, a qual, depois de
agitada, não deve descorar-se ao final de 5 minutos.
Cada ml de solução 0,1N de nitrato de prata eqüivale a 0,0075g de
KCI.
C-3.4 ACETATO DE SÓDIO
CH3COONa.3H2O 136,08
Anidro 82.03
O acetato de sódio contém 3 moléculas de água de hidratação ou é
anidro. Deve conter de 99,0% a 101,0% de C2H3NaO2, calculado em relação a
substância seca.
C-3.4.1 Especificações e procedimentos de controle.
C-3.4.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipientes bem fechados.
C-3.4.1.2 Rotulagem
O rótulo deve indicar se é acetato de sódio trihidratado ou anidro.
C-3.4.1.3 Identificação
A solução responde aos ensaios de Sódio e Acetato (USP XXIII-191)
C-3.4.1.4 pH (USP XXIII-791)
Entre 7,5 e 9,2 determinado em uma solução 1 em 20 em água isenta de
CO2 que contenha o equivalente a 30 mg de acetato de sódio anidro por ml.
C-3.4.1.5 Perda por dessecação (USP XXIII-731)
Secar a 120ºC até peso constante. A forma hidratada perde entre
38,0% e 41,0% de seu peso. A forma anidra perde não mais de 1% de seu peso.
C-3.4.1.6 Material insolúvel
Dissolver o equivalente a 20 g de acetato de sódio anidro em 150 ml
de água, aquecer até ebulição e digerir em bequer tampado, durante 1 hora em
banho-maria. Filtrar através de um cadinho filtrante tarado, lavar bem e
secar a 105ºC o peso do resíduo não deve exceder 10 mg (0,05%).
C-3.4.1.7 Cloreto (USP XXIII-221)
Uma porção equivalente a 1,0 g de acetato de sódio anidro apresenta
não mais cloreto que o correspondente a 0,50 ml de ácido clorídrico 0,02N
(0,035%).
C-3.4.1.8 Sulfato (USP XXIII-221)
Uma porção equivalente a 10 g de acetato de sódio anidro apresenta
não mais sulfato que o correspondente a 0,50 ml de ácido sulfúrico 0,02N
(0,005%).
C-3.4.1.9 Arsênio, Método (USP XXIII-211)
Dissolver uma porção equivalente a 1,0g de acetato de sódio anidro
em 35 ml. Limite é 3 ppm.
C-3.4.1.10 Cálcio e Magnésio
A 20 ml de uma solução que contenha o equivalente a 10 mg de acetato
de sódio anidro por ml, acrescentar 2 ml de hidróxido de amônio 6N, 2 ml de
oxalato de amônio SR e 2 ml de fosfato de sódio dibásico SR: não deve
apresentar turbidez dentro de 5 minutos.
C-3.4.1.11 Potássio
Dissolver o equivalente a 3g de acetato de sódio anidro em 5 ml de
água e adicionar 0,2 ml de bitartarato de sódio SR: não deve apresentar
turbidez dentro de 5 minutos.
C-3.4.1.12 Metais pesados, Método I (USP XXIII-231) ),001% calculado
em base seca, sendo usado ácido acético glacial em substituição ao ácido
acético diluído para o ajuste do pH.
C-3.4.1.13 Doseamento
Pesar exatamente o equivalente a cerca de 200 mg de acetato de sódio
anidro e dissolver em 25 ml de ácido acético glacial. Aquecer suavemente, se
necessário, até dissolução completa. Acrescentar 2 gotas de p-naftolbenzeína
SR e titular com ácido perclórico 0,1N SV. Preparar um branco e efetuar
qualquer correção necessária. Cada ml de ácido perclórico 0,1N SV equivale a
8,203 mg de C2H3NaO2.
C-3.5 CLORETO DE MAGNÉSIO
MgCI2.6H2O 203,30
Cloreto de magnésio, hexahidratado
Anidro 95,21
O Cloreto de Magnésio deve conter de 98,0% a 101,0% de MgCI2.6H2O.
C-3.5.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.5.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipientes bem fechados.
C-3.5.1.2 Identificação
Uma solução 1 em 20 atende aos ensaios para Magnésio e Cloreto (USP
XXIII-191).
C-3.5.1.3 pH (USP XXIII-791)
Entre 4,5 a 7,0 em uma solução 1 em 20 em água isenta de CO2.
C-3.5.1.4 Material insolúvel
Dissolver 20g precisamente pesado, em 200 ml de água, aquecer até
ebulição e digerir em bequer tampado em banho-maria durante 1 hora. Filtrar
através de um cadinho filtrante tarado, lavar minuciosamente e secar a
115ºC: o peso do resíduo não deve exceder 1 mg (0,005%).
C-3.5.1.5 Sulfato (USP XXIII-221)
Uma porção de 10 g apresenta não mais sulfato que o correspondente a
0,50 ml de ácido sulfurico 0,02N (0,005%).
C-3.5.1.6 Arsênio, Método I (USP XXIII-211)
limite: 3 ppm.
C-3.5.1.7 Bário
Dissolver 1 g em 10 ml de água e acrescentar 1 ml de ácido sulfúrico
2 N: não se produz turbidez dentro de 2 horas.
C-3.5.1.8 Cálcio (USP XXIII-216)
Não mais de 0,01% usando uma amostra de 10g e 0,50 ml de uma solução
padrão de íon cálcio.
C-3.5.1.9 Potássio
Dissolver 5g em 5 ml de água, e acrescentar 0,2 ml de bitartarato de
sódio SR: não se produz turbidez dentro de 5 minutos.
C-3.5.1.10 Metais pesados (USP XXIII-231)
Dissolver 2g em 25 ml de água. Limite: 0,001%.
C-3.5.1.11 Doseamento
Pesar, exatamente em forno de 450mg de cloreto de magnésio,dissolver
em 25 ml de água, acrescentar 5 ml de tampão amônio-cloreto de amonio SR e
0,1 ml, de negro de eriocromo SR. Titular com etilenodiaminotetraacetato
dissódico SV 0,05M até coloração azul. Cada ml de etilendiaminotetraacetato
disódico 0,05M é equivalente a 10,17 mg de Cl2 6H2O.
C-3.6 CLORETO DE CÁLCIO
CaCl2.2H2O 147,02
Cloreto de cálcio, dihidratado
Anidro 110,99
O cloreto de cálcio deve conter uma quantidade de CaCl2 equivalente
a não menos de 99,0% e não mais de 107,0% de CaCl2.2H2O.
C-3.6.1. Especificações e procedimentos de controle
C-3.6.1.1. Embalagem e conservação
Conservar em recipientes bem fechados.
C-3.6.1.2. Identificação
Uma solução 1 em 10 atende aos ensaios para Cálcio e para Cloreto
(USP XXIII-191).
C-3.6.1.3. pH (USP XXIII-791)
Entre 4,5 a 9,2 em uma solução 1 em 20.
C-3.6.1.4. Arsênio, Método (USP XXIII-211)
Limite: 3 ppm
C-3.6.1.5. Metais pesados (USP XXIII-231)
Dissolver 2,0g em 25 ml de água. Limite: 0,001%
C-3.6.1.6. Ferro, alumínio e fosfato
A uma solução 1 em 20 acrescentar 2 gotas de ácido clorídrico 3N e
uma gota de fenolftaleína SR.
Em seguida acrescentar cloreto de amônio-hidróxido de amônio SR,
gota a gota, até que a solução se torne rosa claro. acrescentar 2 gotas em
excesso e aquecer o liquido até a ebulição: não produz turbidez ou
precipitação.
C-3.6.1.7. Magnésio e sais alcalinos
Dissolver 1 g em aproximadamente 50 ml de água. acrescentar 500mg de
cloreto de amônio, acrescentar rapidamente 40 ml de ácido oxálico SR e
agitar Vigorosamente até que se produza uma boa precipitação. Acrescentar
imediatamente à solução 2 gotas de vermelho de metila SR e após, gota a gota
hidróxido de amônio 6N até que a mistura esteja ligeiramente alcalina.
Esfriar à temperatura ambiente, transferir para uma proveta graduada de 100
ml, diluir com água a 100ml, misturar e deixar em repouso 4 horas ou toda a
noite. Filtrar e acrescentar 50 ml do filtrado límpido em uma cápsula de
platina, 0,5 ml de ácido sulfúrico e evaporar a mistura até pequeno volume
sobre um banho de vapor. Aquecer cuidadosamente sobre a chama até a secura e
continuar aquecendo até completa decomposição e volatização dos sal e
amônio. Finalmente calcinar até peso constante: o peso do resíduo não excede
5mg (1,0%).
C-3.6.1.8. Doseamento
Pesar, exatamente, o equivalente a 1g de cloreto de cálcio,
transferi-lo a um frasco de 250ml e dissolvê-lo em uma solução de 100 ml de
água 5 ml de ácido clorídrico 3N.
Transferir a solução a um frasco volumétrico de 250 ml, diluir com
água até completar o volume e homogeneizar. Pipetar 50 ml da solução em um
recipiente adequado, acrescentar 100 ml de água, 15 ml de hidróxido de sódio
1N e 300 mg de indicador de azul de hidroxinaftol, titular com
etilenodiaminotetraacetato dissódico SV 0,05M até que a solução tenha uma
cor azul profundo. Cada ml de etilenodiaminotetraacetato dissódico 0,05M é
equivalente a 7,351 mg de CaCl2.2H2O.
C-3.7 CITRATO DE SÓDIO (RQ)
C6H5Na3O7 (Anidro) 258,07
Sal trissódico do ácido 2-hidroxi-1,2,3-Propantricarboxílico
Citrato trissódico (anitro)
Citrato trisódico dihidratado 294,10
O citrato de sódio é anidro ou contém duas moléculas de água de
hidratação. Deve conter de 99,0% até 100,5 de C6H5Na3O7,calculado
em base anidra.
C-3.7.1. Especificações e Procedimentos de controle
C-3.7.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipiente bem fechado.
C-3.7.1.2 Rotulagem
Rotulá-lo para indicar se é anidro ou hidratado.
C-3.7.1.3 Identificação
a - Uma solução 1 em 20 atende aos ensaios para sódio e para citrato
(USP XXIII-191).
b - Ao incinerar, obtém-se um resíduo alcalino que produz
efervescência quando é tratado com ácido clorídrico 3N.
C-3.7.1.4 Alcalinidade
Uma solução de 1,0g em 20 ml de água é alcalina ao papel de
tornassol, mas depois de adicionado 0,20 ml de ácido sulfúrico 0,10N não se
produz cor rosa com 1 gota de fenolftaleína SR.
C-3.7.1.5. Água, Método III (USP XXIII-921)
Secá-lo a 180°C durante 18 horas: a forma anidra perde até 1,0% e a
forma hidratada entre 10,0% e 13,0% de seu peso.
C-3.7.1.6 Tartarato
A uma solução de 1 mg em 20ml de água, acrescentar 1 ml de acetato
de potássio SR e 1 ml de ácido acético 6 N. Friccionar a parede do tubo com
bastão de vidro: não se forma precipitado cristalino.
C-3.7.1.7 Metais pesados (USP XXII-231)
Dissolver 2,0 g em 25 ml de água e proceder como está indicado na
Preparação de ensaio, exceto quando usar ácido glacial ajustar o pH. Limite:
0,001%.
C-3.7.1.8 Doseamento
Transferir aproximadamente 350 mg de citrato de sódio, previamente
secos a 180°C durante 18 horas e devidamente pesados,
para um frasco de 250ml. Acrescentar 100 ml de ácido acético
glacial, agitar até completa dissolução e titular com ácido perclórico SV
0,1N determinando o ponto final potenciometricamente.
Realizar a determinação de um branco e fazer qualquer correção que
se fizer necessária. Cada ml de ácido perclórico 0,1N é equivalente a
8,602mg de C6H5Na3O7.
C-3.8 GLICERINA
C3H8O3 92,09
1,2,3 - Propanotriol
Glicerol
A glicerina deve conter de 95,0% de C3H8O3.
C-3.8.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.8.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipientes bem fechados.
C-3.8.1.2 Identificação
O espectro de absorção infravermelho de uma película delgada, mostra
uma banda muito forte e ampla entre 2,7 um, um forte dubleto de
aproximadamente 3,4 um, a um máximo de 6,1 um, uma forte região de absorção
entre 6,7 um e 8,3 um, tendo picos de aproximadamente 7,1 um, 7,6 um e 8,2
um e uma forte região de bandas de aproximadamente 9,0 um, 9,6 um, 10,9 um e
11,8 um (Nota: A glicerina que tem baixo conteúdo de água pode não mostrar
um máximo 6,1 um).
C-3.8.1.3 Peso específico (USP XXIII-841)
Não menos de 1,249
C-3.8.1.4 Cor
Quando se observa a cor de cima para baixo, contra uma superfície
branca em um tubo para comparação de cor de 50ml, não é mais escura que a
cor de um padrão preparado diluindo 0,40 ml de cloreto férrico SC com água
até 50 ml e observado em forma similar em um tubo para comparação de cor com
o mesmo diâmetro e que contém a glicerina.
C-3.8.1.5 Resíduo por incineração (USP XXIII-281)
Aquecer 50 g em uma cápsula de porcelana de 100 ml aberta, pouco
profunda, até que se incendei, e deixar queimar sem mais aplicação de calor,
em um lugar sem correntes de ar. Esfriar, umedecer o resíduo com 0,5 ml de
ácido sulfúrico, e calcinar até o peso constante: o peso do resíduo não deve
exceder 5mg (0,01%).
C-3.8.1.6 Cloreto (USP XXIII-221)
Uma porção de 7,0g apresenta não mais que o correspondente a 0,10 ml
de ácido clorídrico 0,02N (0,001%).
C-3.8.1.7 Sulfato (USP XXIII-221)
Uma porção de 10g apresenta não mais que o correspondente a 0,20 ml
de ácido sulfúrico 0,020N (aproximadamente 0,002%).
C-3.8.1.8 Arsênio, Método I (USP XXIII-211)
Limite: 1,5 ppm
C-3.8.1.9 Metais pesados (USP XXIII-231)
Misturar 4,0g com 2 ml de ácido clorídrico 0,1N e diluir com água a
25 ml. Limite: 5 ppm.
C-3.8.1.10 Compostos clorados
Pesar exatamente 5g em um balão de 100 ml, seco. Adicionar 15 ml de
morfolina, e conectar o balão mediante uma junta esmerilhada a um
condensador com 10 ml de água, e acidificando, com precaução, com ácido
nítrico. Transferir a solução para um tubo adequado, adicionar 0,50 ml de
nitrato de prata 0,10N, diluir com água até 50,0 ml e homogeneizar misturar:
a turbidez não é maior que a de um branco a que se agregou 0,20 ml de ácido
clorídrico 0,02N, omitindo o refluxo (0,003% de CI).
C-3.8.1.11 Ácidos graxos e ésteres
Misturar 50 g com 50 ml de água recentemente fervida e 5 ml de
hidróxido de sódio 0,5N SV; ferver a mistura 5 minutos, esfriar, adicionar
fenolftaleina SR, e titular o excesso de álcali com ácido clorídrico 0,5N
SV. Realizar um branco: não se consome mais de 1 ml de hidróxido de sódio
0,5N.
C-3.8.1.12 Doseamento
Solução de periodato de sódio: Dissolver 60g de metaperiodato de
sódio em água, que contenha 120 ml de ácido sulfúrico 0,1N, e levar a
1000ml. Não aquecer para dissolver o periodato. Se a solução não estiver
clara, filtrar através de um filtro de vidro aquecido.
Guardar a solução em um recipiente que o proteja da luz, com a tampa
de vidro. Adicionar a solução da seguinte maneira: pipetar 10 ml em um
recipiente volumétrico de 250 ml, diluir com água até completar o volume e
homogeneizar. Adicionar com uma pipeta de 50 ml a solução de periodato
diluída a 550 ml de glicerina diluídos em 50 ml de água. Como branco,
pipetar 50ml da solução em um recipiente que contém 50 ml de água.
Deixar descansar as soluções 30 minutos em seguida adicionar 5 ml de
ácido clorídrico e 10 ml de iodeto de potássio SR e agitar. Deixar descansar
5 minutos, adicionar 100ml de água e titular com tiossulfato de sódio 0,1N
agitando continuamente e adicionando 3 ml de amido SR à medida que se chega
ao ponto final.
A relação entre o volume de tiossulfato de sódio 0,1N requerido para
a solução glicerina-periodato e aquele da requerida para o branco, deverá
estar entre 0,750 e 0,765.
Procedimento - Transferir aproximadamente 400 mg de glicerina,
devidamente pesados, para um frasco de 600ml, diluir com 50 ml de água,
adicionar azul e bromotimol SR, e acidificar com ácido sulfúrico 0,2N até um
verde definido ou amarelado esverdeado. Neutralizar com hidróxido de sódio
0,05N até um ponto final azul definido, sem cor verde. Preparar um branco
contendo 50 ml de água, e neutralizar da mesma maneira.
Pipetar 50 ml de solução de periodato de sódio em cada frasco,
agitar suavemente, cobrir com vidros de relógio e deixar descansar 30
minutos à temperatura ambiente(não superior a 35°C) no escuro ou com luz
tênue. Adicionar 10 ml de uma mistura de volumes iguais de etileno glicol e
água, deixar descansar 20 minutos.
Diluir cada solução com água a aproximadamente 300 ml e titular com
hidróxido de sódio 0,1N SV até um pH de 8.1 ± 0.1 para a amostra em ensaio e
6.5± 0.1 para o branco, usando um pHmetro. Cada ml de hidródixo de sódio
0,1N, depois da correção pelo branco, é equivalente a 9.210 mg de C3H8O3.
C-3.9 SOLUÇÃO DE LACTATO DE SÓDIO
A solução de lactato de sódio é uma aquosa que contém no mínimo
50,0% em peso, de lactato monosódico. Contém de 98,0% a 102,0% da quantidade
declarada de C3H5NaO3.
C-3.9.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.9.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipiente bem fechado
C-3.9.1.2 Rotulagem
Rotular a solução para indicar seu conteúdo em lactato de sódio.
C-3.9.1.3 Identificação
Responde aos ensaios de Sódio e Lactato (USP XXIII-191)
C-3.9.1.4 pH (USP XXIII-791)
Entre 5,0 e 9,0
C-3.9.1.5 Cloreto (USP XXIII-221)
Uma porção, equivalente a 1g de lactato de sódio, apresenta não mais
cloreto que o correspondente a 0,7 ml de uma solução de ácido clorídrico
0,02N (0,05%).
C-3.9.1.6 Citrato, oxalato, fosfato ou tartarato
Diluir 5 ml com água recentemente fervida e esfriada, a 50 ml. A 4
ml desta solução, adicionar hidróxido de amônio 6N ou ácido clorídrico 3N,
se for necessário para elevar o pH a um valor entre 7.3 e 7.7.
Adicionar 1 ml de cloreto de cálcio SR, e aquecer em banho-maria
durante 5 minutos: a solução permanece clara.
C-3.9.1.7 Sulfato
A 10 ml de uma solução 1 em 100 juntar 2 gotas de ácido clorídrico e
1 ml de cloreto de bário SR: não se produz turbidez.
C-3.9.1.8 Metais pesados, Método I (USP XXIII-231)
Diluir uma quantidade de solução equivalente a 2.0 g de lactato de
sódio, com ácido acético 1N até 25 ml. Limite: 0.001%.
C-3.9.1.9 Açúcares
A 10 ml de tartarato cúprico alcalino SR, aquecido, juntar 5 gotas
de solução: não se forma precipitado vermelho.
C-3.9.1.10 Metanol e ésteres metílicos
Solução de permanganato de potássio e ácido fosfórico - Dissolver 3g
de permanganato de potássio em uma solução de 15 ml de ácido fosfórico e 70
ml de água. Diluir com água até 100 ml.
Solução de ácido oxálico e ácido sulfúrico - Adicionar com
precauções 50 ml de ácido sulfúrico a 50 ml de água, misturar, esfriar,
adicionar 5 g de ácido oxálico e misturar até dissolução.
Preparação padrão - Preparar uma solução que contenha 10,0 mg de
metanol e 100 ml de álcool diluído 1 para 10.
Preparação de ensaio - Colocar 40,0g em um balão, com tampa de
vidro, adicionar 10 ml de água, com precaução e 30 ml de hidróxido de
potássio 5 N. Conectar um condensador ao balão, e destilar por arraste a
vapor, recolhendo o destilado em um recipiente adequado de 100ml, graduado,
que contenha 10 ml de álcool.
Continuar a destilação até que o volume alcance aproximadamente 95
ml, e diluir o destilado com água até 100 ml.
Procedimento - Transferir 10,0 ml da preparação de ensaio a
recipientes volumétricos de 25 ml, adicionar a cada um 5,0 ml de solução de
permanganato de potássio e ácido fosfórico e misturar.
Depois de 15 minutos, adicionar a cada um 2 ml da solução ácido
oxálico e ácido sulfúrico agitar com um bastão de vidro até que a solução
fique incolor. Adicionar 5.0 ml de fuscina-ácida sulfurosa SR, e diluir com
água até o completar o volume. Depois de 2 horas, determinar no mesmo tempo
as absorbâncias de ambas soluções em celas de 1 cm no comprimento de onda da
máxima absorbância, aproximadamente 575nm, com um espectrofotômetro
apropriado, usando água como branco: a absorbância da solução da preparação
de ensaio não deve ser maior que a da preparação padrão (0.025%).
C-3.9.1.11 Doseamento
Pesar exatamente em um recipiente apropriado, um volume de solução
de lactato de sódio, equivalente aproximadamente a 300 mg de lactato de
sódio, adicionar 60 ml de uma mistura 1 para 5 de anidrido acético em ácido
acético glacial. Misturar e deixar descansar 20 minutos. Titular com ácido
perclórico SV 0,1N determinando o ponto final potenciometricamente. Realizar
a determinação de um branco e qualquer correção que for necessária. Cada ml
de ácido perclórico 0,1N é equivalente a 11,21 mg de C3H5NaO3.
C-3.10 HIDRÓXIDO DE SÓDIO
NaOH 40,00
Hidróxido de sódio
O hidróxido de sódio contém de 95,0% a 100,5% de álcali total,
calculado como NaOH, incluindo não mais de 3,0% de Na2CO3.
Precaução: Ter muito cuidado ao manipular o hidróxido de sódio,
porque ele destrói rapidamente os tecidos.
C-3.10.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.10.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipientes bem fechados.
C-3.10.1.2 Identificação
Uma solução 1 em 20 é total, clara e incolor a ligeiramente
colorida.
C-3.10.1.3 Substâncias insolúveis e matéria orgânica
Uma solução 1 em 20 é total, clara e incolor a ligeiramente
colorida.
C-3.10.1.4 Potássio
Acidificar 5 ml de uma solução 1 em 20 com ácido acético 6N,
adicionar em seguida 5 gotas de cobaltinitrito de sódio SR: não se forma
precipitado.
C-3.10.1.5 Metais pesados (USP XXIII-231)
Dissolver 0,67 g numa mistura de 5 ml de água e 7 ml de ácido
clorídrico 3N. Aquecer até ebulição, esfriar e diluir com água a 25 ml.
Limite: 0,003%.
C-3.10.1.6 Doseamento
Dissolver aproximadamente 1,5g de hidróxido de sódio, devidamente
pesados, em aproximadamente 40 ml de água isenta de CO2. Esfriar a solução a
temperatura ambiente, adicionar fenolftaleína SR, e titular com ácido
sulfúrico 1N SV.
Ao desaparecer a cor rosa do indicador, anotar o volume da solução
ácida requerida, adicionar alaranjado de metila SR, e continuar a titulação
até a cor rosa persistente. Cada ml de ácido sulfúrico 1N é equivalente a
40.00 mg de álcali total, calculado como NaOH, e cada ml de ácido consumido
na titulação com alaranjado de metila é equivalente a 106,0 mg de Na2CO3.
C-3.11 ÁCIDO CÍTRICO
C6H8O7 192,12
Ácido 2-hidroxi-1,2,3-propantricarboxilico
Ácido cítrico
Monohidratado 210,14
O ácido cítrico é anidro ou contém uma molécula de água de
hidratação. Contém de 99,5% até 100,5% de C6H8O7, calculado em base anidra.
C-3.11.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.11.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipientes bem fechados
C-3.11.1.2 Rotulagem
Rotulá-lo para indicar se é anidro ou se está hidratado.
C-3.11.1.3 Identificação
Uma solução atende aos ensaios para Citrato (USP XXIII-191).
C-3.11.1.4 Água, Método I (USP XXIII-921)
Não mais de 0,5% (forma anidra) e não mais que 8.98% (forma
hidratada).
C-3.11.1.5 Resíduo por incineração (USP XXIII-281)
Não mais de 0,05%.
C-3.11.1.6 Oxalato
Neutralizar 10 ml de uma solução 1 em 10 com hidróxido de amônio 6N,
adicionar 5 gotas de ácido clorídrico 3N, esfriar e adicionar 2 ml de
cloreto de cálcio SR: não se produz turbidez.
C.3.11.1.7 Sulfato
A 10 ml de uma solução 1 em 100, adicionar 1 ml de cloreto de bário
SR ao qual se adiciona uma gota de ácido clorídrico: não se produz turvação.
C-3.11.1.8 Arsênio, Método I (USP XXIII-211)
Limite: 3 ppm
C-3.11.1.9 Metais pesados (USP XXIII-231)
Limite: 0.001%
C-3.11.1.10 Substâncias rapidamente carbonizáveis
Transferir 1.0g, pulverizado para o ensaio, a um tubo de ensaio de
22 x 175 mm previamente enxaguado com 10 ml de ácido sulfúrico SR e deixar
escorrer durante 10 minutos. Adicionar 10 ml de ácido sulfúrico SR, agitar
até dissolver completamente, e submergi-lo em um balão de água a 90 ± 1°C
durante 60 ± 0,5 minutos, mantendo o nível de ácido abaixo do nível de água
durante todo o tempo. Esfriar o tubo em água corrente e transferir o ácido
para um tubo para comparação de cor: a cor do ácido não é mais escura do que
de um volume similar de líquido de comparação da seguinte composição: 0,5
partes de cloreto cobaltoso SC e 4,5 partes de cloreto férrico SC, em um
tubo de comparação, observando-se os tubos verticalmente contra o fundo
branco.
C-3.11.1.11 Doseamento
Colocar em média 3 g de ácido cítrico em um recipiente tarado, e
pesar exatamente. Dissolver em 40 ml de água, adicionar fenolftaleina SR, e
titular com hidróxido de sódio 1N SV. Cada ml de hidróxido de sódio 1N é
equivalente a 64,04 mg de C6H8O7.
C-3.12 ÁCIDO LÁTICO
Ácido 2-hidroxi-propanóico
Ácido lático
O ácido lático é uma mistura de ácido lático (C3H6O3) e de lactato
de ácido lático (C6H10O5) equivalente a um total de 85,0% até 90,0% em peso,
de (C3H6O3). Obtém-se por fermentação láctica de açúcares é levoratatório.
Entretanto, o sintético é racêmico.(Nota: o ácido lático preparado por
fermentação toma-se dextrorrotatório por diluição, que hidroliza o L(-)
lactato de ácido lático a L(+) ácido lático)
C-3.12.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.12.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipientes bem fechados
C-3.12.1.2 Rotulagem
Rotulá-lo para indicar se é levoratatório ou racêmico.
C-3.12.1.3 Identificação
Responde aos ensaios de lactato (USP XXIII-191)
C-3.12.1.4 Rotação específica (USP XXIII-781)
Entre -0,05° a + 0,05°, para ácido lático racêmico.
C-3.12.1.5 Resíduo por incineração (USP XXIII-281)
Não mais de 3 mg, de uma porção de 5 ml (0,05%).
C-3.12.1.6 Açúcares
A 10 ml de tartarato cúprico alcalino SR quente, adicionar 5 gotas
de ácido lático: não se forma precipitado vermelho.
C-3.12.1.7 Cloreto
A 10 ml de uma solução de 1 em 100 acidificada com ácido nítrico,
adicionar umas poucas gotas de nitrato de prata SR: não se produz
opalescência imediatamente.
C-3.12.1.8 Ácido cítrico, oxálico, fosfórico ou tartárico
A 10 ml de uma solução 1 em 100 adicionar 40 ml de hidróxido de
cálcio SR, e ferver durante 2 minutos: não se produz turbidez.
C-3.12.1.9 Sulfato
A 10 ml de uma solução 1 em 100 adicionar 2 gotas de ácido
clorídrico e 1 ml de cloreto de bário SR:
C-3.12.1.10 Metais pesados, Método II (USP XXIII-231)
Limite: 0.001%
C-3.12.1.11 Substância rapidamente carbonizáveis
Enxaguar um tubo com ácido sulfúrico SR e deixar escorrer durante 10
minutos. Adicionar 5ml de ácido sulfúrico SR ao tubo de ensaio, cobrir
cuidadosamente com 5 ml de ácido lático e manter o tubo a uma temperatura de
15°C: não se desenvolve cor escura na interfase dos dois ácidos dentro de 15
minutos.
C-3.12.1.12 Doseamento
A aproximadamente 2,5 ml de ácido lático, devidamente pesados em um
recipiente de 250 ml tarado, adicionar 50,0 ml de hidróxido de sódio 1N SV,
e ferver a mistura durante 20 minutos. Adicionar fenolftaleína SR, e titular
o excesso de álcali na solução quente com ácido sulfúrico 1N SV. Realizar um
branco.
Cada ml de hidróxido de sódio 1N eqüivale a 90,08mg de C3H6O3.
C-3.13. DEXTRAN 40
Dextran 40 é um produto obtido por decomposição parcial do
polisacarídeo, que se produz por fermentação de sacarose com Leuconostoc
mesenteroides Van Tieghem (Lactobecillaceae), e seu peso molecular médio é
de aproximadamente 40000.
Dextran 40 apresenta-se como um pó branco, amorfo e hidroscópico. É
inodoro e insípido. Dissolve-se gradulamente em água. É completamente
insolúvel em metanol, em etanol e em acetona.
C-3.13.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.13.1.1 Conservação
Conservar em recipiente bem fechado.
C-3.13.1.2 pH
A solução de dextran 40,1 em 10 está entre 5,0 e 7,0
C-3.13.1.3 Identificação
A 1 ml de uma solução de dextran 40, 1 em 3000, agregar 2 ml de
antrona SR: aparece uma cor azul esverdeada, que se torna gradualmente azul
esverdeado escuro. Então adicionar a esta solução 1 ml de ácido sulfúrico
diluído 1 em 2 ou 1ml de ácido acético glacial
a solução não muda de cor.
C-3.13.1.4 Rotação especifica
+ 193,0 - +201,0° calculado sobre base anidra, e determinado em uma
solução aquosa que contenha 3g de dextran 40 em 50 ml.
C-3.13.1.5 Claridade e cor da solução
Dissolver 1,0g de dextran 40 em 10ml de água aquecida: a solução é
incolor e clara.
C-3.13.1.6 Cloreto
Realizar o ensaio com 2,0g de dextran 40. Preparar a solução
controle com 1,0ml de ácido clorídrico 0,01N.
Limite: 0,018%.
C-3.13.1.7 Metais pesados
Proceder com 1,0g de dextran 40 de acordo com método 1, e realizar o
ensaio. Preparar a solução controle com 2.0 ml de solução padrão de chumbo.
Limite: 20 ppm.
C-3.13.1.8 Nitrogênio
Pesar, exatamente, em torno de 2g de dextran 40, previamente
dessecado a 105°C durante 6 horas, e realizar o ensaio segundo as indicações
de Determinação de nitrogênio, onde se usam 10 ml de ácido sulfúrico para a
descomposição, e em seguida se adiciona 45 ml de uma solução de hidróxido de
sódio 2 em 5: a quantidade de nitrogênio não é mais que 0,010%.
C-3.13.1.9 Substâncias redutoras
Pesar exatamente 3.00g de dextran 40, previamente dessecado a 105°C
durante 6 horas. Dissolvê-lo em água para chegar exatamente a 50 ml, e usar
esta solução como solução de amostra. Separadamente, pesar exatamente 0,450g
de glicose, previamente dessecada a 105°C durante 6 horas. Dissolvê-la em
água suficiente para alcançar exatamente 500 ml, e usar esta solução como
solução controle. Pipetar 5 ml tanto da solução de amostra como da solução
controle, adicionar água até exatamente 50 ml, respectivamente. Pipetar 5 ml
de cada uma destas soluções diluídas. Adicionar 5 ml de cobre alcalino SR,
exatamente medido e aquecer 15 minutos em banho-maria. Esfriar, agregar 1 ml
de uma solução de iodeto de potássio 1 em 40 e 1,5 ml de ácido sulfúrico
diluído, titular com tiossulfato de sódio 0,005N (indicador: 2 ml de amido
SR).
O titulante consumido pela solução de amostra excede o consumido
pela solução controle.
C-3.13.1.10 Perdas por dessecação
Não mais de 5% (1g, 105°C, 6 horas)
C-3.13.1.11 Resíduos por inceneração
Não mais de 0.10% (1g)
C-3.13.1.12 Viscosidade intrínseca
C-3.13.1.12.1 Dextran 40
Pesar exatamente de 0,2 a 0,5 g de dextran 40, previamente dessecado
a 105°C, durante 6 horas. Dissolver em água suficiente até 100 ml, usar esta
solução como solução de amostra. Realizar o ensaio com a solução de amostra
e com água como explica em Viscosidade a 25 ± 0,1°: a viscosidade
intrínseca, calculada a partir da seguinte equação, deve estar entre 0,16 e
0,19.
In tempo de escoamento(seg) da
sol, amostra
______________________________________
tempo de escoamento(seg)da
água
viscosidade intríseca = _______________________________________
Quantidade(g) da amostra
C-3.13.1.12.2 Fração de alto peso molecular
Pesar exatamente em torno 6g de dextran 40, previamente dessecado a
105°C durante 6 horas.
Dissolver em água suficiente para alcançar exatamente 100ml, e
transferir para um balão. Agregar lentamente metanol suficiente para
precipitar 7 a 10% da amostra (usualmente 80 a 90 ml), a 25±
1°C com agitação.
Dissolver o precipitado a 35°C em banho-maria com agitação ocasional
e deixar descansar mais de 15 horas a 25±1°C, Separar o líquido sobrenadante
por decantação e aquecer o precipitado da camada inferior à secura segundo
se indica em C.3.13.1.12.1: o valor não é maior que 0,27.
C-3.13.1.12.3 Fração de baixo peso molecular
Pesar em torno de 6g de dextran 40, previamente dessecado a 105ºC
durante 6 horas, dissolver em água suficiente até alcançar exatamente 100 ml
e transferir para um frasco. Adicionar lentamente metanol, suficiente, para
precipitar de 90 a 93% da amostra (usualmente 115 a 135 ml) a 25 +- 1ºC com
agitação. Centrifugar a 25ºC e evaporar o líquido sobrenadante aquecendo em
banho-maria. Dessecar o resíduo a 105ºC durante 6 horas e calculara
viscosidade intrínseca do resíduo seco, como indicado em C-3.13.1.12.1: o
valor é não menos que 0,09.
C-3.13.1.13 Antigenicidade
Dissolver 10,0g de dextran 40 em solução isotônica de cloreto de
sódio para alcançar 100 ml, e esterilizar. Com esta solução proceder como
indicado em antigenicidade em dextran 40 injetável.
C-3.13.1.14 Pirogênio
Dissolver 10,0 g de dextran 40 em solução isotônica de cloreto de
sódio até 100 ml, e realizar o ensaio: esta solução cumpre os requerimentos
do ensaio de pirogênio.
C-3.14. DEXTRAN 70
Dextran 70 é um produto obtido por decomposição parcial de
polisacarídeo, que é produzido por fermentação de sacarose com Leuconostoc
mesenteroides Van Tieghem (Lactobacillaceae), e seu peso molecular médio é
aproximadamente 70000.
Dextran 70 se apresenta como um pó branco, amorfo e higroscópio. É
inodoro e insípido. Dissolve-se gradualmente em água. É totalmente solúvel
em água aquecida e praticamente insolúvel em metanol, em etano e em acetona.
C-3.14.1 Especificações e procedimentos de controle.
C-3.13.1.1 Conservação
Conservar em recipiente bem fechado.
C-3.14.1.2 pH
A solução de dextran 70,3 em 50, está entre 5,0 e 7,0.
C-3.14.1.3 Identificação
Proceder como indicado na identificação de dextran 40.
C-3.14.1.4 Rotação específica
+ 193,0 - + 201,0º calculando sobre base anidra, e determinado em
uma solução que contenha 3 g de dextran 70 em 50 ml.
C-3.14.1.5 Claridade e cor da solução
Dissolver 1,0g de dextran 70 em 10 ml de água com aquecimento: a
solução é incolor é clara.
C-3.14.1.6 Cloreto
Realizar o ensaio com 2,0g de dextran 70. Preparar a solução
controle com 1,0 ml de ácido clorídrico 0,01N. Limite: 0,018%.
C-3.14.1.7 Metais pesados
Proceder com 1,0g de dextran 70 de acordo com Método I e realizar o
ensaio. Preparar a solução controle com 2,0 ml de solução padrão de Chumbo.
Limite: 20 ppm.
C-3.14.1.8 Nitrogênio
Pesar exatamente em torno de 2 g de dextran 70, previamente
dessecado a 105ºC durante 6 horas, e realizar o ensaio segundo as indicações
de Determinação de Nitrogênio, onde se usam 10 ml de ácido sulfúrico para a
descomposição, e se adicionam 45 ml de uma solução de hidróxido de sódio 2
em 5. Limite de nitrogênio: 0,010%.
C-3.14.1.9 Substâncias redutoras.
Pesar exatamente 3,0 g de dextran 70, previamente dessecado a 105ºC
durante 6 horas, dissolver em água até que se atinja 50 ml, e usar esta
solução como solução de amostra. Separadamente, pesar exatamente 0,3 g de
glicose, previamente dessecada a 105ºC durante 6 horas. Dissolvê-la em água
suficiente para alcançar 500 ml exatamente, usar esta solução como solução
controle. Pipetar 5 ml tanto de solução de amostra como de solução controle
e adicionar água até exatamente 50 ml, respectivamente. Pipetar 5 ml de cada
uma destas soluções diluídas, adicionar 5 ml de cobre alcalino SR,
exatamente medido, aquecer 15 minutos em banho-maria. Esfriar, adicionar 1
ml de uma solução de iodeto de potássio, 1 em 40, e 1,5 ml de ácido
sulfúrico diluído, Titular com tiossulfato de sódio ,005N (indicador: 2 ml
de amido SR).
O titulante consumido pela solução de amostra excede o consumido
para a solução controle.
C-3.14.1.10 Perdas por dessecação
Não mais de 5,0% (1g, 105ºC, 6 horas)
C-3.14.1.11 Resíduo por incineração
Limite: 0,10% (1g).
C-3.14.1.12 Viscosidade intrínseca
C-3.14.1.12.1 Dextran 70
Pesar exatamente 0,2 a 0,5g de dextran 70 previamente dessecado a
105ºC, durante 6 horas. Dissolvê-lo em água até 100 ml, e usar esta solução
como solução de amostra. Realizar o ensaio com a solução de amostra e com
água como se explica em viscosidade, a 25+- 0,1ºC: a viscosidade intrínseca,
calculada a partir da seguinte equação, deve estar entre 0,21 e 0,26.
In tempo de escoamento (seg) da sol.
Amostra
____________________________________
tempo de escoamento (seg) de água
viscosidade intrínseca =
______________________________________
Quantidade (g) da amostra
C-3.14.1.12.2 Fração de alto peso molecular
Pesar exatamente em torno de 6g de dextran 70, previamente dessecado
a 105ºC durante 6 horas. Dissolver em água suficiente até atingir 100 ml, e
transferir para um frasco. Adicionar lentamente metanol para precipitar de
7% a 10% de amostra (usualmente 75 a 85 ml), a 25 +- 1ºC, com agitação.
Dissolver o precipitado em banho-maria a 35ºC com agitação ocasional e
deixá-lo descansar mais de 15 horas a 25 +- 1ºC. Separar o líquido
sobrenadante por decantação e aquecer o precipitado já seco da parte
inferior em banho-maria. Secar o resíduo a 105ºC, durante 6 horas, e
calcular a viscosidade intrínseca do resíduo seco segundo o indicado em
C-3.14.1.12.1. Limite: 0,35.
C-3.14.1.12.3 Fração de baixo peso molecular
Pesar em torno de 6g de dextran 70, previamente dessecado a 105ºC
durante 6 horas. Dissolver em água suficiente até atingir 100 ml, e
transferir para um frasco. Adicionar lentamente metanol para precipitar de
90 a 93% da amostra (usualmente 110 a 130 ml) a 25 +- 1ºC com agitação.
Centrifugar a 25ºC e evaporar o sobrenadante líquido já seco em banho-maria.
Dessecar o resíduo a 105ºC, durante 6 horas e calcular a viscosidade
intrínseca de resíduo seco como indicado em C-3.14.1.12.1. Limite: 0,10.
C-3.14.1.13 Antigenicidade
Dissolver 6,0g de dextran 70 em solução isotônica de cloreto de
sódio, para até 100 ml, e esterilizar. Com esta solução, proceder como
indicado em antigenicidade em dextran 40 injetável.
C-3.14.1.14 Pirogênio
Dissolver 6,0g de dextran 70 em solução isotônica de cloreto de
sódio até 100 ml. Realizar o ensaio: esta solução cumpre os requerimentos do
ensaio de pirogênio.
C-3.15 MANITOL
C6H14O6 182,17
Manitol
O manitol é um álcool hexahidroxilado derivado da manose que contém
não menos que 98% de C6H14O6, calculado para a substância dessecada.
É um pó cristalino, branco, inodoro e com sabor doce. Solúvel em 6
partes de água destilada; pouco solúvel álcool; insolúvel em éter.
C-3.15.1 Especificações e Procedimentos de Controle
C-3.15.1.1 Conservação
Conservar em recipientes fechados perfeitamente.
C-3.15.1.2 Identificação
a) Em um tubo de ensaio que contém 1 ml de solução saturada de
manitol, adicionar 5 gotas de solução de cloreto férrico SR. Em outro tubo
de ensaio que contém 1 ml de solução de cloreto férrico SR, adicionar 5
gotas de água destilada. Acrescentar a cada tubo, cinco gotas de solução
concentrada de hidróxido de sódio SR; no tubo sem manitol deverá formar-se
um precipitado pardo de Hidróxido de Ferro, enquanto no outro tubo que
contém manitol se formará um precipitado amarelo. Agita-se os tubos
fortemente; deverá obter-se uma solução límpida no tubo com manitol,
enquanto que o precipitado persistirá no outro tubo. A adição posterior de
solução concentrada de hidróxido de sódio SR, não deverá produzir
precipitação no tubo com manitol mas sim uma nova precipitação no outro
tubo.
b) Em um tubo de ensaio colocar em torno de 0,5 g de manitol e
acrescentar 3 ml de anidrido acético e 1 ml de piridina. Aquecer a mistura
em banho-maria durante 15 minutos ou até que se haja dissolvido
completamente, e aquecer durante mais 5 minutos. Esfriar; acrescentar 20 ml
de água destilada, misturar e deixar em repouso durante 5 minutos. Recolher
o precipitado em um recipiente de vidro com placa filtrante de vidro poroso;
o hexacetato de manitol, assim obtido, depois de seco a vácuo a 60ºC durante
1 hora, deverá fundir entre 119 e 124ºC.
C-3.15.1.3 Ponto de fusão
165 e 168ºC Abrandando-se à temperatura mais baixa.
C-3.15.1.4 Acidez
Dissolver 5g de manitol em 50 ml de água destilada, isenta de
anidrido carbônico; o líquido obtido não deverá requerer para sua
neutralização mais de 0,3 ml de solução 0,02N de hidroxido de sódio, usando
solução de fenolftaleína SR como indicador.
C-3.15.1.5 Rotação específica
O poder rotatório específico a 20ºC de uma solução preparada
adicionando a 5g de manitol, 6,4 g de borato de sódio e quantidade
suficiente de água destilada até completar 45, ml deixando em repouso
durante 1 hora, agitando de vez em quando, e completando depois até 50 ml
com água destilada: não deverá ser menor que +23º nem maior de +24º.
C-3.15.1.6 Cloreto
Uma porção de 5g de manitol deverá cumprir o ensaio para limite de
cloretos.
C-3.15.1.7 Sulfato
Uma porção de 5g de manitol deverá cumprir o ensaio para limite de
sulfatos.
C-3.15.1.8 Açúcares redutores
Dissolver 0,2g de manitol, em 2 ml de água destilada. Acrescentar 5
ml de solução cuprotartárica alcalina SR e aquecer em banho-maria durante 5
minutos: ao concluir não deverá se formar mais que um precipitado muito
escasso.
C-3.15.1.9 Perda por dessecação
Por dessecação a 105ºC durante 4 horas, não deverá perder mais de
0,3% de seu peso.
C-3.15.1.10 Resíduo por incineração
Não deverá deixar mais de 0,1% de resíduo.
C-3.15.1.11 Arsênio Método II (USP XXIII-211)
Limite: 2 ppm
C-3.15.1.12 Doseamento
Pesar em torno de 0,2g de manitol previamente dessecado e transferir
a um recipiente de 250 ml. Dissolver em água destilada e diluir com este
solvente até completar o volume. Transferir 5 ml desta solução a outro
recipiente de 250 ml e acrescentar 50 ml do seguinte reagente: misturar 40
ml de ácido sulfúrico diluído 1 em 20, com 60 ml de solução de periodato de
potássio, 1 em 1000, acidificada com 3 a 5 gotas de ácido sulfúrico. Aquecer
a solução em banho-maria durante 15 minutos, esfriar à temperatura ambiente
e acrescentar 1g de iodeto de potássio. Deixar em repouso durante 5 minutos
e dosear com solução 0,02N de tiossulfato de sódio, adicionando solução de
amido SR na aproximação do ponto final. Repetir o doseamento omitindo o
manitol: A diferença entre os doseamentos, representa a quantidade de
solução 0,02N de tiossulfato de sódio requerida pelo manitol.
Cada ml de solução 0,02N de tiossulfato de sódio eqüivale a 0.00036
g de C6H14O6.
C-3.16 BICARBONATO DE SÓDIO(RQ)
CO3HNa 84,01
Carbonato ácido de sódio
Carbonato monossódico
O bicarbonato de sódio contém não menos 99% de CO3HNa, calculado
para a substância dessecada.
É um pó branco, ou pequenos cristais opacos, monoclinicos, inodoros,
com sabor salino e fracamente alcalino.
Estável em ar seco, mas em ar úmido perde pouco anidrido carbônico,
transformando-se em carbonato neutro hidratado.
Solúvel em 11 partes de água destilada. Insolúvel em álcool.
C-3.16.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.16.1.1 Conservação
Conservar em recipiente bem fechado.
C-3.16.1.2 Identificação
A solução de bicarbonato de sódio deverá responder aos ensaios para
bicarbonato e para sódio.
C-3.16.1.3 pH
O pH de uma solução bicarbonato de sódio 1% P/V recentemente
preparada, não deverá ser maior de 8,6.
C-3.16.1.4 Alumínio, cálcio e materiais insolúveis
Dissolver 10g de bicarbonato de sódio com 50 ml de água destilada e
20 ml de amonia diluído SR. Filtrar, secar e calcinar o resíduo insolúvel: o
resíduo obtido não deverá pesar mais de 0.001g.
C-3.16.1.5 Carbonato
Dissolver 1g de bicarbonato de sódio, sem agitar, em 20 ml de água
destilada a uma temperatura até 15ºC, acrescentar 2 ml de solução 0,1N de
ácido clorídrico e duas gotas de solução de fenolftaleína SR: a mistura não
deverá tomar imediatamente um tom rosado.
C-3.16.1.6 Potássio
Dissolver 2 g de bicarbonato de sódio em uns 15 ml de água
destilada; acrescentar 3 ml de ácido clorídrico evaporar a misturar até
secar. Aquecer o resíduo a 120ºC durante meia hora e dissolver em 10 ml de
água destilada. A 5 ml desta solução, acrescentar 5 ml de solução de
cobáltinitrido de sódico SR e 10 ml de álcool: se for produzida uma
turbidez, dentro de meia hora, não deverá exceder a produzida em uma solução
teste que contém o resíduo de evaporação de 0,1 mg de potássio e 3 ml de
ácido clorídrico.
C-3.16.1.7 Cloreto
Uma porção de 2,5 g de bicarbonato de sódio, diluída em água
destilada, adicionada de 2 ml de ácido nítrico, deverá cumprir o ensaio para
limite de cloretos.
C-3.16.1.8 Sulfato
Uma porção de 1 g de bicarbonato de sódio, dissolvido em água
destilada, adicionada de 6 ml de ácido clorídrico diluído SR, deverá cumprir
o ensaio para limite de sulfatos.
C-3.16.1.9 Ferro
Uma porção de 2,5 g de bicarbonato de sódio dissolvido em uma
mistura de 20 ml de água destilada e 4 ml de ácido clorídrico, e diluída com
água destilada até completar 40 ml, deverá cumprir o ensaio para limite de
ferro.
C-3.16.1.10 Sais de amônia
Aquecer 1g de bicarbonato de sódio com 10 ml de solução de hidróxido
de sódio SR: não deverá desprender vapores de amônia.
C-3.16.1.11 Metais pesados
Misturar 2g de bicarbonato de sódio com 5 ml de água destilada e 9,5
ml de ácido clorídrico diluído SR; colocar em banho Maria durante 1 minuto;
adicionar uma gota de solução de fenolftaleína SR e juntar, gota a gota,
amônia diluída SR até que a solução adquira um tom ligeiramente rosado,
esfria-se adicionando 2 ml de ácido acético diluído SR e quantidade
suficiente de água destilada até completar 25 ml: o limite de metais pesados
utilizando um controle preparado com a solução padrão de chumbo, é 5 ppm.
C-3.16.1.12 Perda por dessecação
Por dessecação durante 4 horas, na presença de gel de sílica, uma
porção de umas 4 g de bicarbonato de sódio, exatamente pesada, não deverá
perder mais de 0,25% de seu peso.
C-3.16.1.13 Arsênio Método I (USP XXIII-211)
Limite 2 ppm.
C-3.16.1.14 Doseamento
Pesar em torno de 3 g de bicarbonato de sódio, previamente
dessecado; dissolver em 25 ml de água destilada e dosar com solução 1N de
ácido sulfúrico, usando solução de alaranjado de metila SR como indicador.
Cada mililitro de solução 1N de ácido sulfúrico eqüivale a 0,084 g
de CO3HNa.
C-3.17 SORBITOL
C6H14O6 182,17
D-Glucitol
O sorbitol contém entre 91% e 100,5% de C6H14O6, calculando em base
seca. Pode conter pequenas quantidades de outros álcoois polihídricos.
C-3.17.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.17.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipientes bem fechados.
C-3.17.1.2 Identificação
Uma solução de 5 g em torno de 4 ml responde ao seguinte ensaio:
tomar 6 ml e adicionar 6 ml de metanol, 1 ml de benzaldeído e 1 ml de ácido
clorídrico e agitar mecanicamente até o aparecimento de cristais. Filtrar
com vácuo, dissolver os cristais em 20 ml de água em ebulição contendo 1 g
de bicarbonato de sódio. Filtrar em aquecimento, esfriar o filtrado, filtrar
com vácuo, lavar com 5 ml de uma mistura de partes iguais de metanol e água
e secar com ar. O derivado monobenzilidenossorbitol assim obtido funde a
174-179ºC.
C-3.17.1.3 Água, Método I (USP XXIII-921)
Limite: 1,0%
C-3.17.1.4 Resíduo por incineração (USP XXIII-281)
Limite: 0,1%
C-3.17.1.5 Cloreto (USP XXIII-221)
Uma porção de 1,5g apresenta não mais cloreto que o correspondente a
0,10 ml de ácido clorídrico 0,02N (0,0050%).
C-3.17.1.6 Sulfato (USP XXIII-221)
Uma porção de 1,0g apresenta não mais sulfato que o correspondente a
0,10 ml de ácido sulfúrico 0,002N (0,0025%).
C-3.17.1.7 Arsênio, Método II (USP XXIII-211)
Limite: 3 ppm.
C-3.17.1.8 Metais pesados (USP XXIII-231)
Dissolver 2,0g em 25 ml de água. Limite: 0,001%.
C-3.17.1.9 Açúcares redutores
Transferir 7 g, exatamente pesados, a um recipiente de 400 ml com a
ajuda de 35 ml de água e misturar. Adicionar 50 de tartarato cúprico
alcalino SR, cobrir o recipiente, aquecer a mistura a uma velocidade tal que
comece a ferver em 4 minutos e ferver por 2 minutos, medindo o tempo
exatamente. Recolher o óxido cuproso precipitado em um cadinho filtrante
tarado, previamente lavado com água quente, álcool e éter e em seguida secar
à 105ºC por 30 minutos.
Lavar o óxido cuproso em filtro com água quente, a seguir com 10 ml
de álcool e finalmente com 10 ml de éter, e secar a 105ºC durante 30
minutos: o peso de óxido cuproso não deve exceder a 50 mg.
C-3.17.1.10 Doseamento
Fase móvel: usar água desgaseificada.
Solução de resolução: dissolver Manitol e Sorbitol SR em água, para
obter uma solução de concentração 4,8 mg/ml de cada um.
Solução padrão: dissolver uma quantidade de Sorbitol SR, pesada com
precisão, em água. Diluir quantitativamente com água para obter uma solução
de concentração conhecida em torno de 4,8 mg/ml.
Solução de ensaio: transferir em torno de 0,24 g de Sorbitol,
pesados com precisão, a um recipiente de 50 ml.
Dissolver em 10 ml de água, aumentar o volume e homogeneizar.
Sistema cromatográfico: o cromatógrafo líquido deve estar equipado
com detector de índice de refração que se mantém a temperatura constante e
uma coluna de 7,8mm x 30 cm que contém resina de troca catiônica forte que
consiste em um copolímero de estireno divinilbenzeno entrecruzada,
sulfonada, em uma forma cálcica em torno de 9 um de diâmetro.
A coluna se mantém a 30+/-2ºC e o fluxo é em torno de 0,2 ml/minuto.
Realizar a cromatografia da solução padrão e registrar as respectivas
respostas dos picos como é indicado em Procedimento. O desvio padrão
relativo para injeções replicadas não devem ser maior que 2%. De igual
maneira, realizar a cromatografia da Solução de Resolução: a resolução R,
entre os picos de sorbitol e manitol não deve ser menor que 2,0.
ProcedimentoL: injetar separadamente volumes iguais (em torno de 20
ml) de solução de ensaio e solução padrão, correr os cromatogramas e medir
as respostas dos picos majoritários. Calcular a quantidade, em mg de C6H14O6
em Sorbitol com a fórmula:
50 c (ru / rs)
onde c é a concentração, em mg/ml de Sorbitol Rs na preparação
padrão, e ru e rs são as respostas dos picos obtidos da solução de ensaio e
da Solução padrão respectivamente.
C-3.18 Gelatina
Gelatina é um produto obtido por hidrólise parcial de colágeno,
derivado da pele, tecido conjuntivo mole e ossos de animais. A obtenção de
um precursor por tratamento com ácido é denominada como tipo A, e por
tratamento alcalino, tipo B.
C-3.18.1 Especificações e procedimentos de controle
C-3.18.1.1 Embalagem e conservação
Conservar em recipiente bem fechado e em lugar seco.
C-3.18.1.2 Identificação
A: Adicionar a uma solução (1 em 100) trinitrofenol SR ou uma
solução de dicromato de potássio (1 em 15), previamente misturado com um
quarto de seu volume com HCI 3 N: forma-se um precipitado amarelo.
B: Adicionar uma solução (1 em 5000) ácido tânico SR: produz-se
turbidez.
C-3.18.1.3 Limites microbianos
Contagem de Microorganismos aeróbicos totais viáveis menor do que a
10 3 por grama. Ausência de Salmonella e Escherichia coli em 10 gramas
(Ensaios de contaminação microbiana Anexo M).
C-3.18.1.4 Resíduo por incineração (USP XXIII-281)
Incinerar 5,0g sem o uso de ácido sulfúrico, com a adição de 1,5 a
2,0g de parafina, para evitar perdas, devido a inchamento. A seguir levar a
cinza em uma mufla a 550ºC por 15 a 20 horas: o peso do resíduo não deve
exceder 2,0%.
C-3.18.1.5 Odor e substâncias insolúveis em água
Uma solução aquecida (1 em 40) está livre de qualquer odor
desagradável, e quando se observa uma camada de 2 cm de espessura é só
levemente opalescente.
C-3.18.1.6 Dióxido de Enxofre
Dissolver 20,0 g em 150 ml de água quente em um balão de colo
alargado. Adicionar 5 ml de ácido fosfórico e 1 g de bicarbonato de sódio e
imediatamente conectar um condensador. (Nota pode-se diminuir a formação
excessiva de espuma com umas poucas gotas de antiespumante).
Destilar 50 ml, recebendo o destilado em 50 ml de iodo 0,1N.
Acidificar o destilado com poucas gotas de ácido clorídrico. Adicionar 2 ml
de cloreto de bário SR, e aquecer em banho Maria até que o líquido esteja
praticamente incolor. O precipitado de sulfato de bário, se presente, uma
vez filtrado, lavado e incinerado, deve pesar no máximo 3 mg, correspondente
a não mais de 0,004% de dióxido de enxofre. Devem ser feitas correções para
o sulfato que pode estar presente em 50 ml de iodo 0,1N.
C-3.18.1.7 Arsênio, Método I (USP XXIII-211)
Preparar a solução de ensaio como indicado em continuação. Misturar
3,75 g com 10 ml de água em um frasco gerador. Adicionar 10 ml de ácido
nítrico e 10 ml de ácido perclórico, misturar, aquecer cuidadosamente até a
produção de fumaça intensa de ácido perclórico. Esfriar, lavar as laterais
do frasco gerador com água, adicionar 10 ml de ácido nítrico e novamente
aquecer até a formação intensa de fumaça. Esfriar, lavar novamente e
novamente aquecer até formação de fumaça. É necessário, repetir a digestão,
até obter uma solução clara. Esfriar, diluir com água a 52 ml, adicionar 3
ml de ácido clorídrico: a solução resultante, segue os requerimentos do
ensaio, a adição de 20 ml de ácido sulfúrico 7N especificada no procedimento
não se faz necessária. Limite: 0,8 ppm.
C-3.18.1.8 Metais pesados (U.S.P. XXIII-231).
Ao resíduo obtido no ensaio 3.18.1.4 adicionar 2 ml de ácido
clorídrico e 0,5 ml de ácido nítrico e evaporar em banho-maria. Adicionar ao
resíduo 1 ml de ácido clorídrico 1N e 15 ml de água e aquecer por uns
minutos. Filtrar, lavar com água até obter 100 ml de filtrados. Diluir 8 ml
de solução a 25 ml com água. Limite: 0,005%.
C-4 Reagentes e Métodos gerais
C-4.1 Soluções SR
Ver características, preparação e usos em "Test Solutions (TS)"e USP
XXIII páginas 2050-2057.
C-4.2 Soluções SV
Ver características preparação e usos em "Volumetric Solutions (VS)"
em USP XXIII páginas 2057-2064.
C-4.3 Métodos gerais
Ver metodologia em "General Requirements for Tests and Assays" em
USP XXIII páginas 1650-1672.
ANEXO D
RECIPIENTES DE VIDRO PARA SOLUÇÕES PARENTERAIS
DE GRANDE VOLUME
D-1. OBJETIVO
D-2. DEFINIÇÕES
D-3. CONDIÇÕES GERAIS
D-4. CONDIÇÕES ESPECÍFICAS
D-5. CRITÉRIO PARA APROVAÇÃO OU REJEIÇÃO
D-1. OBJETIVO
Esta norma fixa as condições relativas aos aspectos físicos e
químicos dos recipientes de vidro indicados especificamente para o
envasamento de Soluções Parenterais de Grande Volume (SPGV).
D-2. DEFINIÇÕES
Para os efeitos desta norma se adotam as definições 2.1 e 2.2.
D-2.1 Vidro Tipo I
Vidro borossilicato neutro, destinado a envasar medicamentos de uso
parenteral.
D-2.2 Vidro Tipo II
Vidro sódico-cálcico tratado, geralmente usado para soluções
parenterais neutras ou ácidas. Caso se comprove sua estabilidade em relação
a solução envasada, pode ser utilizado para preparação parenteral alcalina.
D-3 CONDIÇÕES GERAIS
D-3.1 Dos frascos
Os frascos devem ser acondicionados pelo fabricante da seguinte
forma:
a) Dispostos em forma ordenada e com a boca para baixo.
b) separados por paredes divisórias.
c) cada embalagem deve conter um único produto e um único número de
lote.
D-3.2 Das embalagens
As embalagens que acondicionam os frascos devem oferecer segurança
durante seu transporte e armazenamento, não permitir a entrada de
contaminantes e obedecer às seguintes recomendações:
a) estar em bom estado de conservação, ou seja, sem deformações,
rachaduras, manchas, umidade ou corpos estranhos;
b) possuir resistência suficiente para permitir o empilhamento e
armazenamento sem sofrer deformações;
c) estar identificados, individual e externamente com a seguinte
informação:
* identificação do recipiente e tipo de vidro;
* nome do produto a que o frasco se destina (frasco impressão);
* volume nominal;
* quantidade de recipientes por embalagem;
* possuir indicação de posicionamento (seta ou símbolo);
* possuir indicação de altura máxima de empilhamento;
* número de lote;
* data de fabricação;
* nome do fabricante;
* código do recipiente (se necessário).
D-4 CONDIÇÕES ESPECÍFICAS
Os frascos de vidro devem possuir as características e responder aos ensaios
descritos em D-4.1 a D-4.3. Os ensaios de D-4.1 e D-4.2 devem ser realizados
realizam em amostras tomadas por planejamento estatístico de amostragem.
D-4.1 Inspeção visual
Os frascos não devem apresentar os seguintes defeitos:
D-4.1.1 Defeitos críticos
a) texto impresso ilegível ou com erros de impressão;
b) escala volumétrica ilegível ou errônea;
c) fragmentos ou rebarbas de vidro aderidas, ou não, às suas paredes
(interna ou externa);
d) contaminação por fungos em seu interior:
e) manchas nas paredes externa ou interna, irremovíveis nas condições
normais de limpeza;
f) Boca defeituosa (ovalização, estrangulamento) que comprometa a
hermiticidade do fechamento.
1.2 Defeitos maiores
a) irregularidades de espessura;
b) deformidade no corpo ou no fundo do frasco;
c) inclusão de material na fundição;
d) fissura, rachadura ou poro nas paredes do frasco;
e) bolha de ar (maiores de 2mm) em sua parede;
f) pescoço torcido, deformado ou incompleto.
D-4.2 Ensaios físicos
D-4.2.1. Dimensões: segundo a especificações da descrição padrão.
D-4.2.2. Volume: dentro de um limite de tolerância de +-2% do declarado.
D-4.2.3. Choque térmico: os frascos destinados a conter SPGV devem suportar
uma temperatura diferencial mínima de 42ºC, segundo os procedimentos
seguintes:
a) submergir completamente os frascos em um banho-maria a 20,0 +- 1,5ºC,
mantendo-os até que a temperatura se estabilize;
b) transferi-los imediatamente a um banho de água quente a 65,0 +- 1,5ºC,
mantendo-os completamente submergidos, durante 300 +- 10 seg. Secá-los e
recolocá-los em um banho de água fria durante mais de 15 segundos e menos de
1 minuto;
c) a capacidade de cada banho deverá ser de no mínimo 4,2L por cada 500g de
vidro a ser ensaiado.
D-4.2.4. Peso: dentro das tolerâncias estabelecidas.
D-4.3 Ensaios químicos
D-4.3.1. Ensaios de resistência química ou hidrolítica
Determinam a resistência do material, seja sobre o vidro em pó, ou sobre a
superfície interna do recipiente de vidro, ao ataque por água. O grau de
ataque está determinado pela alcalinidade liberada ao meio nas condições
especificadas e é extremamente pequeno nos vidros de maior resistência.
Os ensaios devem ser realizados em ambiente isento de fumaça e pó.
D-4.3.1.1. Ensaio sobre vidro em pó, para vidro Tipo I
Lavar cuidadosamente com água para injetáveis (condutividade não maior de
0,15 umho/cm a 25ºC) 6 (seis) ou mais recipientes selecionados casualmente,
e segundo o procedimento de amostragem correspondente.
Secá-los com uma corrente de ar limpo e seco. Quebrar os recipientes em
fragmentos de aproximadamente 25 mm. Dividir aproximadamente 100 g do vidro
fragmentado em três porções aproximadamente iguais. Colocar uma dessas
porções em um almofariz especial, e moer o vidro golpeando 3 ou 4 vezes com
martelo. Preparar os tamizes de aços inoxidável de 20,3 cm (8") (Nº 20-850
µm-Nº 40-425 µm-Nº 50-300µm), e esvaziar o almofariz em tamiz Nº 20. Repetir
a operação com as outras porções restantes de vidro, esvaziando o almofariz
cada vez em tamiz Nº 20. Agitar os tamizes um breve tempo, logo retirar o
vidro dos tamizes Nº 20 e Nº 40, e moer e tamizar novamente como antes.
Repetir novamente esta operação de moagem e tarmização. Esvaziar o
recipiente coletor, rearmar os tamizes e, agitar em um agitador mecanismo ou
manual durante 5 minutos. Transferir a porção retida no tamiz Nº 50, que
deve pesar no mínimo 10g, a um recipiente fechado, e armazenar em um
dessecador até ser usado para o ensaio.
Espalhar a amostra sobre um pedaço de papel parafinado, e passar um irmã
sobre a mesma, para retirar as partículas de ferro que puderam passar para a
mostra durante a moagem. Transferir a amostra a um erlenmeyer de vidro
resistente de 250 ml de capacidade, e lavá-la com seis porções de 30 ml de
acetona, agitando aproximadamente durante 30 segundos, e decantando
cuidadosamente a acetona. Logo após lavada, a amostra deve estar livre de
aglomerações de pó de vidro, e a superfície destes grãos deve estar
praticamente livre de partículas finas aderidas. Secar o erlenmeyer e seu
conteúdo durante 20 minutos a 140ºC. Esfriar os grãos secos e Transferi-los
para um recipiente de pesagem.
Procedimento
Transferir 10,00 g da amostra preparada, pesada exatamente a um erlenmeyer
de vidro borossilicato de 250 ml de capacidade, que tenha sido previamente
tratado com água para injetáveis em um banho a 90ºC até 24 horas ou a 121ºC
durante 1 hora. Adicionar 50,0 ml de água para injetáveis ao erlenmeyer e a
outro preparado do mesmo modo que servirá de branco. Tampar os erlenmeyer
com tampas de vidro borossilicato que tenham sido previamente tratadas como
os erlenmeyer, e que vedem bem a boca dos mesmos. Colocar os erlenmeyer em
autoclave, e fechar perfeitamente, deixar a válvula de purga aberta. Aquecer
até que solte vapor vigorosamente pela válvula, e continuar aquecendo
durante 10 minutos. Fechar a válvula e ajustar a temperatura em 121ºC,
levando de 19 a 23 minutos para atingir a temperatura desejada. Manter a
temperatura a 121 +- 2,0ºC, durante 30 minutos, contando o tempo a partir do
momento em que se alcançar esta temperatura. Reduzir o aquecimento de modo
que a autoclave se esfrie e chegue à pressão atmosférica entre 38 e 46
minutos, ventilando adequadamente para prevenir a formação de vácuo. Esfriar
rapidamente o erlenmayer com água corrente, decantar e transferir a água a
um recipiente convenientemente limpo, e lavar o vidro moído que restou com
quatro porções de 15 ml de água para injetáveis, transferindo as águas de
lavagem à porção principal que restou. Adicionar 5 gotas de solução de
vermelho de metila, e titular imediatamente com a solução de ácido sulfúrico
0,02N usando uma microbureta. Registrar o volume da solução de ácido
sulfúrico 0,02N usada para neutralizar o extrato obtido de 10 g da amostra,
e corrigir o branco. O volume utilizando não deve exceder o indicado na
Tabela I.
D-4.3.1.2. Ensaio sobre recipientes de vidro, para vidro Tipo I e II
Lavar cuidadosamente duas vezes, 3 ou mais recipientes de vidro selecionados
casualmente, com água para injetáveis.
Procedimento
Encher cada recipiente até 90% de sua capacidade com água para injetáveis,
tampar os recipientes com papel alumínio previamente lavrado com água
purificada. Colocar os recipientes em autoclave e fechá-los perfeitamente,
deixando a válvula de purga aberta. Aquecer até que solte vapor
vigorosamente pela válvula, e continuar aquecendo durante 10 minutos. Fechar
a válvula e ajustar a temperatura em 121ºC aguardando de 19 a 23 minutos
para chegar à temperatura desejada. Manter a temperatura a 121 +- 2,0ºC
durante 60 minutos, contanto o tempo a partir do momento em que se alcança
esta temperatura. Reduzir o aquecimento de modo que a autoclave se esfrie e
volte a pressão atmosférica entre 38 e 46 minutos, ventilando adequadamente
para prevenir a formação de vácuo. Transferir o conteúdo dos recipientes em
ensaio a um novo recipiente com capacidade suficiente.
Tomar uma alíquota de 100 ml com uma proveta e transferi-la a um erlenmeyer
de 250 ml de vidro borossilicato. Adicionar 5 gotas de solução de vermelho
de metila, e titular ainda quente com solução de ácido sulfúrico 0,02N.
Completar a titulação dentro de 60 minutos, após abertura da autoclave.
Registrar o volume da solução de ácido sulfúrico 0,02N usada para
neutralizar o extrato da amostra e corrigir com um branco. O volume não deve
exceder o indicado na Tabela 1 segundo o tipo de vidro em questão.
D-4.3.1.4. Tabela I: Tipos de vidro e limites de ensaios
Tipo de Descrição Tipo de Limites
vidro ensaio Capacidade (ml) Volume de
H2SO4
0,02
N (ml)
I Vidro borosili- 4.3.1.1 Todas
1,0
cato neutro 4.3.1.2
Todas 0,2
II Vidro sódico
cálcico 4.3.1.2
maior de 100 0,2
tratado
D-5. CRITÉRIOS PARA APROVAÇÃO E REJEIÇÃO
Os recipientes serão aceitáveis sempre que cumpram os requisitos
obrigatórios deste Regulamento, caso contrário, serão rejeitados.
ANEXO E
RECIPIENTES PLÁSTICOS PARA
SOLUÇÕES PARENTERAIS DE GRANDE VOLUME
E-1. OBJETIVO
E-2. DEFINIÇÕES
E-3. CONDIÇÕES GERAIS
E-4. CONDIÇÕES ESPECIFICAS
E-5. MÉTODOS DE ENSAIO DOS RECIPIENTES PLÁSTICOS
E-6. CRITÉRIOS PARA APROVAÇÃO E REJEIÇÃO
E-1. OBJETIVO
E-1.1 Esta Norma fixa as condições exigidas relativas aos aspectos físicos,
químicos e biológicos para os recipientes plásticos indicados
especificamente para o envasamento de Soluções Parenterais de Grande Volume
(SPGV).
E-1.2 As exigências para os recipientes plásticos, para Soluções Parenterais
de Grande Volume são os seguintes:
a) Assegurar que a qualidade da solução parenteral se mantenha durante a
vida útil do produto;
b) Possibilitar o envasamento, a esterilização, a embalagem, o
armazenamento, o transporte, a manipulação e a administração da solução
parenteral de forma segura e eficaz;
c) Evitar a contaminação microbiológica da solução;
d) Evitar interações físicas, químicas ou biológicas entre o recipiente e a
solução, que afete a estabilidade da preparação e que ocasione problemas de
toxicidade ao usuário;
e) Assegurar compatibilidade funcional com os equipos de infusão.
E-2 DEFINIÇÕES
Para efeitos deste Regulamento, adotam-se as seguintes definições:
E-2.1 Recipiente plástico
Recipiente flexível ou rígido, de forma e capacidade variada.
E-2.1.1 Recipiente plástico vazio
Recipiente liso, com inscrição, apropriado para conter SPGV.
E-2.1.2 Recipiente Plástico cheio
Recipiente contendo SPGV estéril e apirogênica.
E-2.2 Manufatura
Todas as operações que intervêm na produção de recipiente plástico.
E-2.3 Fabricante
Pessoa jurídica que realiza as operações de manufatura até a obtenção do
recipiente plástico.
E-2.4 Matérias-Primas
Polímeros e aditivos para a fabricação de recipientes plásticos, que
respondem aos requisitos da Farmacopéia Européia "Materiais Plásticos usados
para a fabricação de recipientes para o uso parenteral e/ou soluções aquosas
para infusões intravenosas" e "Recipientes".
No caso de matérias-primas não incluídas na Farmacopéia Européia, seu uso se
submeterá ao acordo dos países integrantes do MERCOSUL.
E-2.5. Água para injetáveis
Água para fabricação de SPGV, conforme os requisitos do anexo II.
E-2.6. Marcação
Inscrição no recipiente pelo processo de moldagem, ou por impressão.
E-2.7. Volume nominal
Volume previsto ou declarado do recipiente.
E-3. CONDIÇÕES GERAIS
E-3.1. Generalidades
Os recipientes plásticos devem reunir as seguintes condições segundo
especificações que se detalham abaixo:
a) suficientemente transparentes ou translúcidos para permitir uma inspeção
visual do conteúdo contra a luz;
b) fabricados com materiais plásticos isentos de pigmentos e corantes;
c) facilmente esvaziável sem insulflar ar, e resistente à tração e à
pressão.
d) de paredes uniformes, sem fissuras, rachaduras, rebarbas, bolhas de ar ou
materiais estranhos;
e) compatíveis com as SPGV durante o armazenamento;
f) apirogênicos, atóxicos e relativamente impermeáveis a vapor de água;
g) que possam ser fechados convenientemente, vazios ou cheios, a fim de
evitar a contaminação das SPGV;
h) providos de um elemento resistente para a sustentação a uma escala
graduada de volume.
E-3.2. Fabricação
A fabricação, armazenamento e transporte dos recipientes plásticos, devem
ser realizados de acordo com as Boas Práticas de Fabricação e as seguintes
exigências;
a) a fabricação de recipiente deve ser realizada em uma área limpa;
b) a fabricação por laminação deve ser realizada em uma área de classe
10.000, ou em área classe 100.000 com um dispositivo de eliminação de
partículas por eletricidade estática, ou sobre um fluxo laminar classe 100.
c) o ar utilizado nas máquinas deve ser filtrado através de filtros, cuja
porosidade não seja maior que 0,45 µm.
E-3.3. Marcação
A marcação dos recipientes deve seguir as especificações do fabricante dos
SPGV e a escala graduada deve ser recalibrada cada vez que se retifica o
molde ou se modifica os sistemas de impressão.
E-3.4. Embalagem
Os recipientes plásticos produzidos devem ser imediatamente acondicionados
em sistemas fechados de tal forma que se cumpram as exigências deste
Regulamento Técnico.
Os recipientes plásticos fechados, fabricados para terceiros, devem ser
acondicionados em sacos plásticos fechados, com uma espessura de 0,10mm como
mínimo, com proteção externa adicional, por exemplo: caixas de papelão ou
plástico, conectores flexíveis, sacos de papel ou plástico.
Cada peça de embalagem deve ser identificada no mínimo, com a seguinte
informação:
a) capacidade nominal dos recipientes;
b) número de lote;
c) quantidade
d) matéria-prima;
e) data de fabricação
f) número de máquinas ou moldes;
E-4 CONDIÇÕES ESPECÍFICAS
O recebimento e o controle das matérias-primas e dos recipientes plásticos
elaborados por terceiros devem ser realizados de acordo com os procedimentos
estabelecidos pelas Boas Práticas de Fabricação se SPGV (Anexo A).
E-4.1. Requisitos físicos
E-4.1.1 Controle Visual
Os recipientes plásticos devem ser observados quanto ao seu aspecto geral
não devem apresentar:
a) falhas de sopro (fisuras, rachaduras, rebarbas, escamas, bolhas);
b) inclusão de materiais, internos e externos;
c) partículas estranhas;
d) sistemas de fechamento deficientes;
e) falta de centralização e falhas internas (fisuras, rachaduras) das
paredes do bico, desde sua base até o lugar de corte para sua utilização;
f) falta de uniformidade da união do molde.
E-4.1.2 Solda do Bico
O fechamento do bico, nas condições do processo, deve garantir um perfeito
fechamento do recipiente.
E-4.1.3 Distribuição do material
O recipiente plástico deve apresentar paredes uniformes e com espessura que
assegurem a resistência à penetração de microorganismos.
E-4.1.4 Transparência
O recipiente plástico deve ter uma transparência tal que possibilite a
verificação contra a luz do aspecto e limpidez da solução contida,
permitindo a observação de partículas, turbidez ou troca de cor da solução.
E-4.1.5 Permeabilidade ao vapor de água
O recipiente plástico cheio com solução parenteral, que pode conservar-se
também dentro de uma embalagem protetora externa, hermeticamente fechada,
não deve perder mais de 2,5% da massa ao ano a 28°C e a 65% de umidade
relativa.
E-4.1.6 Resistência da base do bico
A base do bico deve ser resistente a movimentos de flexão, sem produzir
fissuras, rachaduras ou picadas, mesmo que sejam superficiais.
E-4.1.7 Estanqueidade e resistência à temperatura e à pressão interna
O recipiente plástico cheio deve suportar variações de temperatura e de
pressão sem perda de sua estanqueidade.
E-4.1.8 Firmeza e estanqueidade de conexão do bico do recipiente com o
equipo
O bico do recipiente plástico cheio deve permitir uma perfeita conexão com a
ponta perfurante do equipo de infusão, de modo que não existe vazamento e
que a ponta perfurante permaneça segura quando submetida à tração.
E.4.1.9 Resistência da alça de sustentação
A alça deve permitir a utilização do recipiente colocado, nas condições de
uso e durante o tempo de infusão da solução, sem apresentar sinais de
ruptura ou deformações.
E-4.1.10 Resistência ao impacto
Os recipientes cheios devem resistir ao impacto sem apresentar ruptura,
fissura ou vazamento.
E-4.1.11 Estanqueidade do lugar de inoculação
Se é previsto um lugar de inoculação em recipiente plástico, este deve
permanecer intacto depois da punção e retirada da agulha.
E-4.1.12 Aderência do rótula (etiqueta)
A etiqueta deve aderir ao recipiente de maneira que não se separe durante a
vida útil do produto.
Deverá cumprir com o ensaio de aderência.
E-4.1.13 Peso de dimensões
Os recipientes plásticos devem possuir um peso e dimensões de acordo com as
especificações e limites de tolerância estabelecidos pelo fabricante.
E-4.2 Requisitos químicos
Os polímeros e os recipientes para envasamento de SPGV devem responder aos
requisitos da Farmacopéia Européia: "Materiais Plásticos usados para a
fabricação de recipientes para o uso parenteral e/ou soluções aquosas para
infusões intravenosas" e "Recipientes".
E-4.3 Requisitos biológicos
E-4.3.1 Impermeabilidade aos microorganismos
Depois de sua esterilização e durante o armazenamento o recipiente plástico
deve garantir a esterilidade da solução nele contida.
E-4.3.2 Toxicidade
O recipiente plástico não deve liberar na solução nele contida, substâncias
capazes de exercer efeitos tóxicos.
Os componentes de adesivos, de colas de rótulos e de tintas de impressão,
não devem atravessar as paredes do recipiente.
E-4.3.3 Substâncias pirogênicas
O recipiente plástico não deve liberar na solução nele contida substâncias
capazes de exercer efeitos pirogênicos.
E-5. Métodos de ensaios dos recipientes plásticos
Os ensaios seguintes devem ser realizados sobre amostras obtidas seguindo um
número aceitável de amostragem. Em cada caso deverá estabelecer-se um
critério de aceitabilidade e de tolerância.
E-5.1 Ensaios físicos
E-5.1.1 Controle Visual
Os envasamentos examinados não devem apresentar os efeitos visíveis
descritos no item 4.1.1.
E-5.1.2 Solda prévia do bico
Os bicos dos recipientes plásticos cheios, devem ser fechados simulando o
procedimento industrial, observando se existe uma solda perfeita com
fechamento hermético do bico.
E-5.1.3 Distribuição do material
A espessura das paredes deve ser medida nas partes superior, média e
inferior do recipiente plástico.
E-5.1.4 Transparência
Encher um frasco com um volume igual à sua capacidade nominal, com solução
opalescente primária diluída 1 em 200, no caso de frascos de polietileno ou
polipropileno, 1 em 400, para outros envasamentos. A turvação da suspenção
deve ser perceptível quando se observa através de frasco e se compara com um
frasco similar cheio de água.
Reagentes
Solução de sulfato de hidrazina
Dissolver 1,0 de sulfato de hidrazina em água e diluir 100 ml com o mesmo
solvente.
Deixar em repouso durante 4 a 6 horas.
Solução de hexametilenotetramina
Dissolver 2,5 g de hexametilenotetramina em 25 ml de água, em um frasco de
vidro com tampão de 100 ml de capacidade.
Solução opalescente primária
Adicionar à solução de hexametilenotetramina contida em um frasco de vidro,
25,0 ml de solução de sulfato de hidrazina. Misturar e deixar em repouso por
24 horas. Esta solução é estável durante 2 meses, quando se armazena em
recipiente de vidro livre de defeitos superficiais.
A suspensão não deve aderir-se ao vidro e deve ser bem misturada, antes de
ser usada.
E-5.1.5 Permeabilidade ao vapor de água
Os recipientes plásticos fechados com a solução parenteral, que podem
conservar-se também dentro de um envazamento protetor externo,
hermeticamente fechado, deverão armazenar-se a 28°C e 65% de umidade
relativa, durante 3 meses. Cada 7 dias a partir do começo do ensaio, deverão
ser pesados a fim de estabelecer a curva de uma eventual perda de peso por
permeabilidade a vapor de água. Ao finalizar o ensaio a perda de peso não
deve exceder 0,625% (2,5 ao ano) nas condições especificadas pelo fabricante
para espessura da parede do recipiente plástico que contém a solução e a
espessura da parede do envazamento protetor externo.
E-5.1.6 Resistência da base do bico.
A parte superior dos recipientes plásticos (bico) deve dobrar-se 10 vezes
para a esquerda a para a direita, formando um ângulo de 30 graus respectivo
de sua posição inicial. Na base dos bicos não devem ser formadas fissuras,
rachaduras ou picadas, mesmo que superficiais.
E-5.1.7 Estanqueidade e resistência à temperatura e à pressão interna.
Colocar os recipientes cheios, durante 24 horas, a uma temperatura entre -
5°C e + 5°C, e a continuação entre 50 e 55°C. Depois de levá-los à
temperatura ambiente, colocar os recipientes entre placas paralelas e
submetê-los a uma pressão interna de 100 kPa, durante 10 minutos, 1 20°C.
Não devem ser produzidas perdas de líquido.
E-5.1.8 Firmeza e estanqueidade de conexão do bico do recipiente com o
equipo.
Conectar as pontas perfurantes dos equipos aos bicos dos recipientes
plásticos cheios, simulando as condições de uso.
Pendurar os conjuntos de suportes de infusão, e aplicar nas câmaras de
gotejamento uma força de tração dirigida para baixo de 10N durante 5 horas.
Os equipos de infusão não devem desprender-se e a estanqueidade deve ser
garantida.
E-5.1.9 Resistência da alça de sustentação
Aos recipientes cheios pendurados, aplicar uma força longitudinal mínima de
25N durante 5 horas. As alças de sustentação não devem apresentar sinais de
ruptura ou de deformações.
E-5.1.10 Resistência ao impacto
Deixar cair os recipientes plásticos, cheios de uma altura de 2m sobre uma
superfície lisa e rígida. Este impacto não deve causar estalos, rupturas,
fissuras ou vazamento em qualquer lugar dos recipientes.
E-5.1.11 Estanqueidade do lugar de inoculação
Puncionar os lugares de inoculação dos recipientes vazios e fechados, com
uma agulha de 0,6 mm de diâmetro externo.
Retirar a agulha e verificar a estanqueidade dos pontos de inoculação,
submergindo os recipientes em água e submetendo-os a uma pressão interna de
20 kPa durante 15 segundos. Não deve haver perda de ar.
E-5.1.12 Aderência do rótulo
Manter não menos de 5 envasamentos, à temperatura ambiente, durante 5 dias.
Logo submergi-los em água a 24°C + 2°C, durante 48 horas. No final do ensaio
todos os rótulos devem permanecer aderidos aos recipientes.
E-5.1.13 Peso e dimensões
O peso e dimensões do envasamento devem estar dentro dos limites de
tolerância estabelecidos no item E-4.1.13.
E-5.2 Ensaios químicos
Para os ensaios químicos dos polímeros e dos recipientes plásticos deve ser
adotada a metodologia descrita na Farmacopéia Européia: "Materiais plásticos
usados para a fabricação de recipientes para uso parenteral e/ou soluções
aquosas para infusões intravenosas" e "Recipientes".
E-5.3 Ensaios biológicos
E-5.3.1 Impermeabilidade aos microorganismos
Encher 4 recipientes plásticos até seu volume nominal com meio de cultura,
caldo triptona-soja, e esterilizar; ou usar um processo de enchimento
estéril.
Incubar os recipientes durante 48 horas a 37°C, de modo que se houver
contaminação, esta poderá ser visualizada. Colocar os recipientes em frascos
de vidro com tampa, contendo no mesmo meio de cultura usado anteriormente,
de modo que ¾ dos recipientes plásticos estejam imersos. Inocular o meio de
cultura do frasco de vidro com uma cultura de Serratia marcescens em caldo e
incubar a 30-32°C durante 10 dias.
Preparar como controle positivo um recipiente plástico como indicado acima,
inoculado com 1 ml de cultura bacteriana usado no ensaio. O recipiente de
controle não deve ser colocado no frasco de vidro como os outros quatro
recipientes. Deverá ser incubado durante 10 dias a 30 - 32°C. O meio de
cultura contido no recipiente controle deve apresentar nítida turvação,
enquanto que os meios de cultura contidos nos recipientes plásticos em
ensaio devem permanecer límpidos.
E-5.3.2 Ensaios de toxicidade
Utilizar a metodologia descrita no ANEXO M-Ensaios biológicos
M-5 Ensaios de reatividade biológica
M-5.1 Ensaio de reatividade biológica "in vitro"
M-5.2 Ensaio de reatividade biológica "in vitro"
E-5.3.3 Substâncias pirogênicas
E-5.3.3.1 Obtenção do extrato
Tomar uma amostra de 25 cm x 25 cm (625 cm²) do recipiente plástico
verificando que não possui etiquetas nem impressões. O tamanho da amostra
eqüivale a 1250 cm² de superfície total, tendo em conta ambas as faces.
Quando as dimensões do recipiente não permitir tomar em um só pedaço o
material nas medidas indicadas, tomar tantos pedaços quantos forem
necessários para se obter uma superfície total de 1250 cm².
Cortar a amostra em pedaços de 2 cm x 5 cm (10cm²). Lavar duas vezes com
água destilada.
Introduzir em um balão de borosilicato que contenha 250 ml de solução
isotônica de cloreto de sódio. Autoclave a 121°C, durante 60 minutos.
Esfriar e elevar o volume a 250ml, com água estéril e apirogênica.
Efetuar paralelamente um ensaio em branco, com a mesma quantidade de solução
isotônica de cloreto de sódio.
Notas:
1) não tem importância que durante o processo de autoclavação os pedaços do
material plástico se aderem ligeiramente entre si;
2) quando o material plástico for sensível ao calor, aquecer a balão com seu
conteúdo a 70°C durante 24 horas ou 50°C durante 72 horas.
3) a extração pode ser realizada com um recipiente plástico completo
mantendo a relação: 250 ml de água destilada para cada 1250 cm² de
superfície total de material.
4) quando for necessário um maior volume de extrato que o indicado no
procedimento de extração (250ml) para poder complementar os distintos
ensaios, tomar maior quantidade de amostras, respeitando a relação indicada
em.
E-5.3.3.2 Ensaios
Utilizar a metodologia descrita no ANEXO M Ensaios Biológicos
M-2 Ensaio de pirogênio.
M-3 Ensaio de endotoxinas bacterianas. Limite de endotoxinas: 0,5 E U/ml.
E-6. Critério para aprovação ou rejeição
Os recipientes serão aceitos sempre que cumprirem os requisitos obrigatórios
deste Regulamento. Em caso contrário, serão rejeitados.
ANEXO F
ESPECIFICAÇÕES E CONTROLE DE PRODUTO ACABADO
F-1. OBJETIVO
F-2. PRODUTOS ACABADOS
F-3. REQUERIMENTOS GERAIS
F-4. REAGENTES
F-1. OBJETIVO
Este Regulamento estabelece especificações para os produtos acabados e os
respectivos procedimentos para seu controle.
F-2. PRODUTOS ACABADOS
F-2.1 SOLUÇÃO DE CLORETO DE SÓDIO INJETÁVEL
A solução de Cloreto de Sódio injetável é uma solução estéril de Cloreto de
Sódio em água para injetáveis. Não contém agentes antimicrobianos. Contém de
95,0% até 105,0% da quantidade indicada de NACI no rótulo.
F-2.1.1 Especificações e Procedimentos de Controle
F-2.1.1.1 Embalagem e conservação: Conservar em envasamentos de dose única
de plástico ou vidro, este último preferencialmente de tipo I ou tipo II.
F-2.1.1.2 Rotulagem: O rótulo responderá ao especificado no Regulamento
Técnico para SPGV ponto 8.
F-2.1.1.3 Identificação: Responde aos ensaios para sódio (USP XXIII-191) e
para Cloreto (USP XXIII-191).
F-2.1.1.4 Substâncias pirogênicas: Optar-se-á por um dos seguintes ensaios:
a) Ensaio de pirogênio: Cumpre com os requisitos do ensaio de Pirogênio
(Anexo XI.2). (NOTA: Diluir com água para injetáveis aquelas soluções que
contenham mais de 0,9% de cloreto de sódio para dar uma concentração de
0,9%).
b) Ensaio de endotoxinas bacterianas: realizar-se-á de acordo com o descrito
em "Ensaio de endotoxinas bacterianas:" Anexo M. Não deverá conter mais de
0,5 UE/ml quando a concentração de cloreto de sódio se encontrar entre 0,5%
e 0,9%. Para soluções com concentração de cloreto de sódio entre 3% e 24,3%,
esta não poderá conter mais de 3,6 UE/ml.
F-2.1.1.5 pH (USP XXIII-791): entre 4,5 e 7,0
F-2.1.1.6 Partículas estranhas: cumpre com o ensaio de "Partículas
estranhas"(F.3.1.10).
F-2.1.1.7 Ferro (USP XXIII-241): Diluir 5,0 ml de solução com água até 45
ml, e adicionar 2 ml de ácido clorídrico. Limite: 2ppm.
F-2.1.1.8 Metais pesados (USP XXIII-231 Método I):Colocar um volume de
solução equivalente a 1,0g de cloreto de sódio em um recipiente adequado, se
necessário evaporar a um volume de aproximadamente 20ml. Adicionar 2 ml de
ácido acético 1N, a seguir diluir com água a 25 ml. Proceder como está
indicado, exceto que se deve usar 1 ml de Solução Padrão de chumbo (10 ug de
Pb) na Preparação Padrão e na Preparação Controle. Limite: 0,001% com base
na quantidade de cloreto de sódio.
F-2.1.1.9 Outros requisitos: Cumpre com os "Requisitos gerais para as SPGV"
(F.3.1).
F-2.1.1.10 Doseamento: Pipetar um volume de Solução de Cloreto de Sódio para
injetáveis equivalente a aproximadamente 90 mg de cloreto de sódio, em uma
cápsula de porcelana, e adicionar 140 ml de água e 1 ml de
diclorofluoresceína SR. Misturar e titular com nitrato de prata 0,1N SV até
que precipite o cloreto de prata e a mistura adquira uma cor rosa fraco.
Cada ml de nitrato de prata 0,1N eqüivale a 5,844 mg de NaCI.
F-2.2. Solução de Dextrose injetável
A solução de dextrose injetável é uma solução estéril de dextrose em água
para injetáveis. Contém de 95,0% até 105,0% da quantidade indicada no rótulo
de C6H12O6.H2O. Não contém agentes antimicrobianos.
F-2.2.1 Especificações e Procedimentos de Controle
F-2.2.1.1 Embalagem de conservação: Conservar em embalagem/acondicionamento
de dose única de plástico ou vidro, este último do tipo I ou tipo II.
F-2.2.1.2 Rotulagem: O rótulo responderá a especificação de Regulamento
Técnico para SPGV item 8.
F-2.2.1.3 Identificação: Responde a prova de identificação detalhada para
dextrose em ANEXO C-3.1.
F-2.2.1.4 Substâncias pirogênicas: Optar-se-á por um dos seguintes ensaios.
a) Ensaio de pirogênio: Cumpre com os requisitos do ensaio de pirogênio
(Anexo M.2) (NOTA. Diluir com água para injetáveis as soluções que contenham
mais de 10% de dextrose para uma concentração de 10%).
b) Ensaio de endotoxinas bacterianas: Realizar-se-á de acordo com o descrito
no "Ensaio de endotoxinas bacterianas" Anexo M.3. Não deverá conter mais de
0,5 UE/ml quando a concentração de dextrose for menor que 5%. Para soluções
com concentração de dextrose entre 5% e 70%, estas não poderão conter mais
de 10,0 UE/gramas de dextrose . NOTA: Antes da análise, diluir as soluções
que contenham mais de 10% de dextrose para uma concentração de 10%.
F-2.2.1.5 pH (USP XXIII-791): entre 3,5 e 6,5 determinado em uma aliquota na
qual se tenha adicionado 0,30 ml de solução saturada de cloreto de potássio
a cada 100 ml e que previamente se tenha diluído com água, se necessário, a
uma concentração de não mais de 5% de dextrose.
F-2.2.1.6 Partículas estranhas: Cumpre com o ensaio de "Partículas
estranhas" (F-3.1.10).
F-2.2.1.7 Metais pesados (USP XXIII-231): Transferir um volume da solução
equivalente a 4,0 g de dextrose, a um recipiente adequado, e ajustar o
volume a 25 ml por evaporação ou adicionado de água, caso seja necessário.
Limite: 0,0005C%, onde C é a quantidade rotulada, em gramas de C6H1206H2O
por ml de solução.
F.2.2.1.8 5-Hidroximetilfurfural e substâncias relacionadas
Diluir um volume exatamente medido de solução, equivalente a 1,0 g de
C6H12O6H2O, com água até 250,0 ml. Determinar a absorbância desta solução em
uma cela de 1 cm a 284 nm, com um espectrofotômetro adequado, usando água
como branco: a absorbância não deve ser maior de 0,25.
F.2.2.1.9 Outros requisitos: Cumpre com os "Requisitos gerais para SPGV:
(F.3.1).
F-2.2.1.10 Doseamento: Transferir um volume exatamente medido de Solução de
Dextrose injetável que contenha 2 a 5 g de dextrose, a um balão de 100ml.
Adicionar 0,2 ml de hidróxido de amônia 6N, completar o volume com água e
misturar. Determinar a rotação angular em um tubo polarimétrico adequado a
25° (Ver Rotação Óptica (USP XXIII-781). A rotação observada, em grau,
multiplicada por 1,0425 A, na qual A é o quociente entre 200 e a longitude,
em mm, do tubo de polarímetro ampliado, representa o peso, em g, de
C6H12O6H2O no volume da solução tomada.
F.2.3 Solução injetável de Dextrose e Cloreto de Sódio
A solução injetável de Dextrose e Cloreto de Sódio é uma solução estéril de
Dextrose e Cloreto de Sódio em água para injetáveis. Contém de 95,0% até
105,0% da quantidade indicada no rótulo de C6H12O6H2O e de NaCI. Não contém
agentes antimicrobianos.
F-2.3.1 Especificações e Procedimentos de Controle
F-2.3.1.1 Embalagem e Conservação: Conservar em recipientes de dose única,
de plástico ou vidro, este último preferencialmente do tipo I ou tipo II.
F-2.3.1.2 Rotulagem: O rótulo responderá a especificação no Regulamento
Técnico para SPGV item 8.
F-2.3.2.3 Identificação: Responde ao ensaio de Identificação indicado em
Dextrose ANEXO C-3.1, e aos ensaios para sódio (USP XXIII-191) e para
cloreto (USP XXIII-191).
F-2.3.1.4 Substâncias pirogênicas: Optar-se-á por um dos seguintes ensaios:
a) Ensaio de pirogênio: Cumpre com os requisitos do ensaio de pirogênios
(Anexo M-2); estabelecidos em Solução de Dextrose injetável.
b) Ensaio de endotoxinas bacterianas: Realizar-se-á de acordo com o descrito
no "Ensaio de endotoxinas bacterianas" Anexo M.3. Não deverá conter mais de
10,0 UE/gramas de dextrose.
F-2.3.1.5 pH (USP XXIII-791):entre 3,5 e 6,5 determinado em uma alíquota
diluída com água, se necessário, até uma concentração de 5% de dextrose.
F-2.3.1.6 5-Hidroximetilfurfural e substâncias relacionadas
Diluir um volume exatamente medido de solução, equivalente a 1,0 g e
C6H12O6H2O com água, até 500,0 ml. Determinar a absorbância desta solução em
uma cela de 1 cm a 284 nm, com umespectrofotômetro adequado, usando água
como branco: a absorbância será no máximo de 0,25.
F-2.3.1.7 Outros requisitos: Cumpre com os "Requisitos gerais para as SPGV"
(F.3.1).
F.2.3.1.8 Doseamento de Dextrose: Transferir um volume exatamente medido de
Solução injetável de Dextrose e Cloreto de Sódio, que contém de 2 a 5 g de
dextrose, a um frasco volumétrico
de 100 ml.
Adicionar 0,2 ml de hidróxido de amônia 6N, completar o volume com água, e
misturar. Determinar a rotação angular em um tubo polarimétrico adequado a
25° (Ver Rotação Óptica (USP XXIII-781) A rotação observada, em graus,
multiplicada por 1,0425 A, onde A é a relação 200 dividido a longitude, em
mm, de tubo polarimétrico empregado, representa o peso em g, de C6H12O6H2O
no volume de solução tomado.
F-2.3.1.9 Doseamento de Cloreto de Sódio. Transferir um volume exatamente
medido de Solução injetável de Dextrose e Cloreto de Sódio, equivalente a
aproximadamente 90 mg de cloreto de sódio, para uma cápsula de porcelana, e
adicionar 140 ml de água e 1 ml de diclorofluoresceína SR. Misturar e
titular com nitrato de prata 0,1N SV até que haja precipitação do cloreto de
prata, e a mistura, adquiram uma leve cor rosa. Cada ml de nitrato de prata
0,1N é equivalente a 5,844 mg de NaCI.
F-2.4 ÁGUA ESTÉRIL PARA INJETÁVEIS
A água estéril para injetáveis é água para injetável esterilizada e
adequadamente envasada. Não contém agentes antimicrobianos ou outras
substâncias agregada.
F-2.4.2 Especificações e procedimentos de Controle
F-2.4.1.1 Embalagem e Conservação: Conservar em recipientes de dose única de
plástico ou vidro, este último preferencialmente de tipo I ou tipo II.
F-2.4.1.2 Rotulagem: O rótulo responderá ao especificado no Regulamento
Técnico para SPGV ponto 8.
F-2.4.1.3 Substâncias pirogênicas: Optar-se-á por um dos seguintes ensaios:
a) Ensaio de pirogênio: Cumpre com os requimentos do ensaio (Anexo M.2)
NOTA: isotonizar a água antes de sua injeção;
b) Ensaio de endotoxinas bacterianas: Realizar-se-á de acordo com o descrito
em "Ensaio de endotoxinas bacterianas" Anexo XI.3. Não deverá conter mais de
0,25 UE/ml.
F-2.4.1.4 Esterilidade: Cumpre com os requerimentos de Ensaio de
Esterilidade (Anexo M.4)
F-2.4.1.5 Partículas estranhas: Cumpre com o ensaio de "Partículas
estranhas" (F.3.1.10).
F-2.4.1.6 Amônia: Usar 100 ml de Água Estéril para injetáveis como solução
de ensaio.
A 100 ml da solução de ensaio, adicionar 2 ml de iodeto mercúrio potássio
alcalino SR: qualquer cor amarela produzida imediatamente não deve ser mais
escura que a de um controle que contenha 30ug de NH3 adicionado a Água para
injetáveis (condutividade até 0,15 umho/cm a 25°C). Limite: 0,2 ppm.
F-2.4.1.7 Cloreto: A 20 ml em um tubo para comparação de cor, adicionar 5
gotas de ácido nítrico e 1 ml de nitrato de prata SR, e misturar suavemente:
qualquer turvação formada dentro de 10 minutos não deve ser maior que a
produzida em um controle tratado em forma similar realizado com 20 ml de
Água quimicamente pura (III.4.3.1.1) que contenha 10 ug de CI (0,5 ppm)
observando as soluções de cima para baixo sobre uma superfície escura com
luz lateral.
F-2.4.1.8 Substâncias Oxidáveis: A 100 ml adicionar 10 ml de ácido sulfúrico
2N, e aquecer até ebulição. Para água Estéril para injetável em recipientes
de vidro de até 50 ml, adicionar 0,4 ml de permanganato de potássio 0,1N e
ferver durante 5 minutos; para volumes maiores, adicionar 0,2 ml de
permanganato de potássio 0,1N e ferver 5 minutos; a cor rosa não desaparece
completamente.
F-2.4.1.9 Resíduo por evaporação: Proceder como indicado no ensaio de
"Resíduos por evaporação" para Água para injetáveis (B-II.1.8). O limite
para Água Estéril para injetáveis é 0,002%.
F-2.4.1.10 Outros requisitos: Cumpre com os requisitos dos ensaios de: pH
(USP XXIII-791): entre 5,0 e 7,0, determinado potenciometricamente em uma
solução preparada por adição de 0,30ml de solução saturada de cloreto de
potássio a 100 ml da amostra a analisar:
Sulfato: a 100 ml adicionar 1 ml de cloreto de bário SR: não se produz
turvação.
Cálcio: a 100 ml adicionar 2ml de oxalato e amônia SR: não se produz
turvação.
Dióxido de Carbono: a 25 ml adicionar 25 ml de hidróxido de cálcio TS. A
mistura permanece clara.
Metais Pesados: ajustar 40 ml de Água estéril para injetáveis com ácido
acético 1 N a um pH de 3,0 a 4,0 (usando um papel indicador de pH de pequena
faixa), adicionar 10 ml de sulfeto de hidrogênio SR recentemente preparado e
deixar descansar o líquido 10 minutos: a cor do líquido, quando se observa
de cima para baixo sobre uma superfície branca, não deve ser mais escura que
a cor de uma mistura de 50 ml da mesma água estéril para injetáveis com a
mesma água estéril para injetáveis com a mesma quantidade de ácido acético 1
N que se agrega à amostra usando-se tubos para comparação de cor para o
ensaio.
F-2.5 SOLUÇÃO DE MANITOL INJETÁVEL
A solução de Manitol injetável é uma solução estéril, que pode ser
hipersaturada, de Manitol em Água para injetáveis. Pode requerer aquecimento
ou autoclavação antes de usar se tiver ocorrido cristalização. Contém de
95,0% até 105,0% da quantidade rotulada de C6H14O6. Não contém agentes
antimicrobianos.
F-2.5.1 Especificações e Procedimentos de Controle
F-2.5.1.1 Embalagem e Conservação: Conservar em recipientes de dose única de
plástico ou vidro, este último preferencialmente do tipo I ou tipo II.
F-2.5.1.2 Rotulagem: O rótulo responderá ao especificado no Regulamento
Técnico para SPGV item 8.
F-2.5.1.3 Identificação: Evaporar e secar em banho de vapor uma alíquota da
solução injetável, e secar o resíduo a 105° durante 4 horas: o resíduo
responde aos ensaios de Identificação que figuram em Manitol.
F-2.5.1.4 Rotação específica (USP XXIII-781): Transferir a um frasco
volumétrico um volume exatamente medido da Solução injetável, equivalente a
aproximadamente 1g de manitol determinado por "Doseamento". Cumpre com os
requisitos da prova para Rotação Especifica para Manitol (C-3.15.1.5).
F-2.5.1.5 Substâncias pirogênicas: Cumpre com os requisitos do ensaio de
Pirogênios (M.2).
NOTA: diluir, se necessário, com Água para injetável para conter até 10% de
C6H14O6.
F-2.5.1.6 pH (USP XXIII-791): entre 4,5 e 7,0 determinado
potenciometricamente, em uma solução preparada por adição de 0,30 ml de
solução saturada de cloreto de potássio a 100ml de solução injetável de
Manitol, previamente diluída a uma concentração até 5%, se necessário.
F-2.5.1.7 Partículas estranhas: Cumpre com o ensaio de "Partículas
estranhas" (F-3.1.10).
F-2.5.1.8 Outros requerimentos: Cumpre com os "Requisitos gerais para as
SPGV" (F-3.1).
F-2.5.1.9 Doseamento: Transferir um volume exatamente medido de Solução
Injetável de Manitol, equivalente a aproximadamente 1g de manitol, a um
balão volumétrico de 1000ml. Adicionar água até completar o volume e
misturar. Transferir 4,0 ml desta solução a um frasco cônico de 250 ml, e
adicionar 50,0 ml de um reativo preparado, misturando 40 ml de ácido
sulfúrico 2N com 60 ml de uma solução de periodato de potássio (1 em 1000)
acidificada com 3 a 5 gotas de ácido sulfúrico. Aquecer a solução em banho
de vapor durante 15 minutos. Esfriar à temperatura ambiente e adicionar 1g
de iodeto de potássio. Deixar descansar 5 minutos e titular com tiosulfato
de sódio 0,02N SV, adicionando 3 ml de amido SR quando se aproximar o ponto
final. Realizar a determinação em um branco, usando água em lugar de Solução
de Manitol injetável, e considerar a diferença no volume consumido. Cada ml
da diferença em volume de tiossufato de sódio 0,02N consumido é equivalente
a 0,3643 mg de C6H14O6.
F-2.6. SOLUÇÃO DE LACTATO DE SÓDIO INJETÁVEL
A solução de Lactato de Sódio injetável é uma Solução estéril de Lactado de
Sódio em água para injetáveis, ou uma solução estéril de Ácido Láctido em
Água para injetáveis preparada com a ajuda de Hidróxido de Sódio. Contém de
95,0% até 110,0% da quantidade indicada no rótulo de C3H5NaO3.
F-2.6.1. Especificações e Procedimentos de Controle
F-2.6.1.1 Embalagem e Conservação: Conservar em recipientes de dose única de
plástico ou vidro. Este último preferencialmente do tipo I ou tipo II.
F-2.6.1.2 Rotulagem: O rótulo responderá ao especificado no Regulamento
Técnico para SPGV item 8.
F-2.6.1.3 Identificação:
A: Estender 2 ml da Solução injetável sobre 5 ml de uma solução 1 em 100 de
catecol em ácido sulfúrico: produz-se uma cor vermelha profunda na zona de
contato.
B: A 2 ml da solução injetável adicionar 5 ml de ácido sulfúrico 2N e 2 ml
de permanganato de potássio SR e aquecer: desenvolve-se odor de acetaldeído.
F-2.6.1.4 Substâncias pirogênicas: Optar-se á por um dos seguintes ensaios:
a) Ensaio de pirogênio: Cumpre com os requisitos do ensaio de pirogênio
(Anexo M.2). NOTA: Diluída, se necessário, com água para injetáveis a
aproximadamente 0,16 M (20 mg por ml).
b) Ensaio de endotoxinas bacterianas: realizar-se á de acordo com o descrito
em "Ensaio de endotoxinas bacterianas" Anexo M.3. Não deverá conter mais de
2,0 UE/mEq.
F-2.6.1.5 pH (US XXIII-791): entre 6,0 e 7,3 diluindo uma alíquota da
solução injetável com água, se necessário, a aproximadamente 0,16 M (20 mg
por ml).
F-2.6.1.6 Partículas estranhas: cumpre com ensaio de "Partículas
estranhas"(F.3.1.10).
F-2.6.1.7 Metais Pesados: (USP XXIII-231): Evaporar um volume da Solução
injetável, equivalente a 2,0g de lactado de sódio, a 5 ml, e diluir com
ácido acético 1N a 25 ml: Limite: 0,001%.
F-2.6.1.8 Outros Requisitos: Cumpre com o "Requisitos gerais para a SPGV"
(F.3.1).
F-2.6.1.9 Doseamento: Pipetar dentro de um recipiente pequeno um volume de
Solução de Lactato de Sódio injetável, equivalente a aproximadamente 300 mg
de lactato de sódio, e evaporar e secar. Adicionar o resíduo 60 ml de uma
mistura 1 em 5 de anidrido acético, em ácido acético glacial, e agitar até
que o resíduo esteja completamente dissolvido. Titular com ácido perclórico
0,1N SV, determinando o ponto final potenciometricamente. Realizar a
determinação em um branco e fazer qualquer correção que for necessária. Cada
ml de ácido perclórico 0,1N é equivalente a 11,21 mg de C3H5NaO3.
F-2.7 SOLUÇÃO DE RINGER INJETÁVEL
A solução de Ringer injetável é uma solução estéril de Cloreto de Sódio,
Cloreto de Potássio e Cloreto de Cálcio em Água para Injetáveis. Contém de
95% até 105% da quantidade rotulada de NaCI, de 90% até 110% da quantidade
rotulada de KCI e de 90% até 110% da quantidade rotulada de CaCI2.2H2O. A
Solução de Ringer injetável não contém agentes antimicrobianos.
Dissolver os três sais em água para injetável, filtrar até que a solução
fique clara; colocar em recipientes adequadas e esterilizar.
F-2.7.1. Especificações e Procedimentos de Controle
F-2.7.1.1 Embalagem e Conservação: Conservar em recipientes de dose única de
plástico ou vidro, este último preferencialmente de tipo I ou tipo II.
F-2.7.1.2 RotulagemL: O rótulo responderá ao especificado no Regulamento
Técnico para SPGV ponto 8.
F-2.7.1.3 Identificação: Responde aos ensaios para Sódio (USP XXIII-191) e
para Cloreto (USP XXIII-191), e quando se concentra a metade de seu volume
original, o ensaio de Cálcio (USP XXIII-191) e o ensaio de chama para
Potássio (USP XXIII-191).
F-2.7.1.4 Substância pirogênicas: Optar-se á por um dos seguintes ensaios:
a) Ensaio de pirogênio: Cumpre com os requisitos do ensaio de pirogênios
(Anexo XI):
b) Ensaio de endotoxinas bacterianas. Realizar-se á de acordo com descrição
em "Ensaio de endotoxinas bacterianas" Anexo M. Não deverá conter mais de
0,5 UE/ml.
F-2.7.1.5 pH (USP XXIII-791): entre 5,0 e 7,5
F-2.7.1.6 Metais Pesados (USP XXIII-232): Evaporar 67 ml a um volume em
torno de 20 ml. Adicionar 2 ml de ácido acético 1N, e diluir com água a 25
ml. Limite: 0,3 ppm.
F-2.7.1.7 Outros requisitos: Cumpre com os "Requisitos gerais para as SPGV"
(F.3.1).
F-2.7.1.8 Doseamentos de Cálcio: Pipetar 50 ml da Solução de Ringer
Injetável em um recipiente de 250 ml, adicionar 15 ml de hidróxido de sódio
1N e 300 mg de azul de hidroxinaftol triturado e titular imediatamente com
etilenodiaminotetracetato dissódico 0,005 M SV a um ponto final azul
profundo. Cada ml de etilenediaminotetracetato disódico 0,005 M e
equivalente a 200,4 mg de Ca++.
F-2.7.1.9 Doseamento de Potássio
Solução Estoque Padrão -
Dissolver 190, mg de cloreto de potássio, previamente seco a 105ºC, durante
2 horas, em 50 ml de água. Transferir a um frasco volumétrico de 1000 ml e
diluir com água até volume, e misturar. Cada ml desta solução contém 100 mg
de potássio.
Preparação Padrão -
Dissolver 1,093 g de cloreto de sódio em 100,0 ml de água e transferir 10 ml
desta solução a cada um dos cinco frascos volumétricos de 100 ml, que contém
10,0 ml de uma solução de um agente umectante não iônico adequado (1 em
500). Diluir o conteúdo de um dos frascos com água até completar o volume
para obter um branco. Ao restante dos frasco adicionar, respectivamente,
5,0,10,0, 15,0 e 20,0 ml da Solução Estoque Padrão. Diluir com água até o
volume e misturar.
Preparação de ensaio -
Pipetar 10 ml da Solução de Ringer injetável em um frasco volumétrico de 100
ml, adicionar 10,0 ml de uma solução de um agente umectante adequado (1 em
500), diluir com água até completar volume e misturar.
Gráfico Padrão -
Colocar um fotômetro de chama adequado em transmissão máxima de uma
longitude de onda de aproximadamente 766 nm. Ajustar o instrumento a 0% de
transmissão com o branco e a 100% de transmissão com a mais concentrada das
preparações-padrão. Ler a porcentagem de transmissão das outras Preparações
Padrão, e elaborar um gráfico das transmitâncias versus a concentração de
potássio.
Procedimento -
Ajustar o instrumento como indicado em Gráfico Padrão, ler a porcentagem de
transmitância da Preparação de prova e calcular o conteúdo de potássio, em
mg por 100 ml, da Solução de Ringer Injetável.
F-2.7.1.10 Doseamento de Sódio
Solução Estoque Padrão
Dissolver 254,2 mg de Cloreto de sódio, previamente seco a 105ºC durante 2
horas, em 50 ml de água, transferir a um frasco volumétrico de 1000 ml,
diluir com água até completar o volume e misturar. Cada ml desta solução
contém 100 mg de sódio.
Preparações Padrão -
Transferir a cada um dos cinco frascos volumétricos de 100 ml, 10 ml de uma
solução de um agente umectante não iônico adequado (1 em 500). Diluir o
conteúdo de um dos frascos com água até completar o volume para obter um
branco. Aos frascos restantes adicionar, respectivamente, 5,0; 10,0; 15,0 e
20,0 ml da Solução Estoque Padrão. Diluir com água até completar o volume e
misturar.
Preparação de Ensaio
Pipetar 5 ml de Solução de Ringer Injetável em um frasco volumétrico de 1000
ml que contenha 100 ml de uma solução de um agente umectante adequado (1 em
500) diluir com água até completar o volume e misturar.
Procedimento
Proceder como indicado em Gráfico Padrão e em Procedimento no Ensaio para
Potássio colocando o fotômetro de chama em transmitância máxima a uma
longitude de onda de aproximadamente 589 nm, em lugar de aproximadamente 766
nm. Calcular o conteúdo de sódio, em mg por 100 ml da Solução de Ringer
Injetável.
F-2.7.1.11 Doseamento de Cloreto: Pipetar 10 ml da Solução de Ringer
Injetável para uma cápsula de porcelana e adicionar 140 ml de água e 1 ml de
diclorofluresceina SR. Misturar e titular com nitrato de prata SV 0,1N até
que precipite e que o cloreto de prata e a mistura adquiriram cor rosa
frasco. Cada ml de nitrato de prata 0,1N e equivalente a 3,545 mg de CI-.
F-2.8 SOLUÇÃO DE RINGER LACTATO INJETÁVEL
A solução de Ringer Lactato Injetável é uma solução estéril de Cloreto de
Cálcio, Cloreto de Potássio, Cloreto de Sódio e Lactato de Sódio em Água
para Injetáveis. Contendo de 95% até 105% da quantidade rotulada de NaCI, de
90% até 110% da quantidade rotulada de KCI, de 90% até 110% da quantidade
rotulada de CaCI2.2H2O e de 90% e 110% da quantidade rotulada C3H5NaO3. A
Solução de Ringer Lactato Injetável não contém agentes antimicrobianos.
F-2.8.1 Especificações e procedimentos de Controle
F-2.8.1.1 Embalagem e Conservação: Conservar em recipientes de dose única de
plástico, ou vidro, este último preferencialmente do tipo I ou tipo II.
F-2.8.1.2 Rotulagem: O rótulo responderá ao especificado no Regulamento
Técnico para SPGV item 8.
F-2.8.1.3 Identificação: Responde aos ensaios para Sódio (USP XXIII-191),
para Cloreto (USP XXIII-191) e para lactato (USP XXIII-191) e quando está
concentrada a metade de seu volume original, ao ensaio de Cálcio (USP
XXIII-191) e ao ensaio de chama para Potássio (USP XXIII-191).
F-2.8.1.4 Substância pirogênicas: Optar-se-á por um dos seguintes ensaios:
a) Ensaio de pirogênio: Cumpre com os requisitos do ensaio de pirogênio
(Anexo M).
b) Ensaio de endotoxinas bacterianas: Realizar-se á de acordo ao descrito em
"Ensaio de endotoxinas bacterianas" Anexo M.3. Não deverá conter mais de 0,5
UE/ml.
F-2.8.1.5 pH (USP XXIII-791) entre 6,0 e 7,5.
F-2.8.1.6 Metais Pesados:(USP XXIII-231): Evaporar 67 ml a um volume de 20
ml, adicionar 2 ml de ácido acético 1N, a seguir diluir com água a 25 ml.
Limite: 0,3 ppm.
F-2.8.1.7 Outros requisitos: Cumpre com os "Requisitos gerais para a SPGV"
(F.3.1).
F-2.8.1.8 Doseamento de Cálcio
Proceder com a Solução de Ringer Lactato Injetável como indicado no
doseamento de Cálcio da Solução de Ringer Injetável.
F-2.8.1.9 Doseamento de Potássio
Proceder com a solução de Ringer Lactato Injetável como indicado no
doseamento de Potássio da Solução de Ringer Injetável.
F-2.8.1.10 Doseamento de Sódio
Proceder com a Solução de Ringer Lactato Injetável como indicado no
doseamento de Sódio da Solução de Ringer Injetável.
F-2.8.1.11 Doseamento de Cloreto
Proceder com a Solução de Ringer Lactato Injetável como indicado no
doseamento de Cloreto da Solução de Ringer Injetável.
F-2.8.1.12 Doseamento de lactato
Evaporar 50,0 ml de solução de Ringer Lactato Injetável em um cadinho ou
placa adequada, e queimar suavemente até que esteja completamente
carbonizado. Separar a massa bem queimada com um bastão de vidro, adicionar
25,0 ml de água e 25,0 ml de ácido sulfúrico 0,1N SV, e aquecer em banho de
vapor durante 30 minutos, separando qualquer grumo com um bastão de vidro
durante o aquecimento. Filtrar, lavar bem com água quente até que o último
lavado seja neutro ao papel de tomassol. Em seguida esfriar o filtrado (e
lavados combinados,) adicionar alaranjado de metila SR, e titular o excesso
de ácido com hidróxido de sódio 0,1N SV. Cada ml de ácido sulfurico 0,1N é
equivalente a 8,907 mg de C3H5O3.
F-3 REQUISITOS GERAIS:
F-3.1 Requisitos gerais para as Soluções Parenterais de Grande Volume
F-3.1.1 Generalidades
Deve-se ter todos os cuidados na preparação de todas as SPGV, para evitar
contaminação com microorganismos e materiais estranhos.
As boas práticas farmacêuticas requerem também que cada recipiente final de
SPGV seja submetido individualmente a uma inspeção física, sempre que a
natureza do recipiente permitir e que se exclua cada recipiente cujo
conteúdo mostre evidência de contaminação com material estranho visível.
F-3.1.2 Água
A Água como matéria prima para as Soluções Parenterais de Grande Volume deve
ser a Água Para Injetáveis, que responda à definição e especificações
estabelecidas no Anexo C item C.2.
F-3.1.3 Substâncias agregadas
As Soluções Parenterais de Grande Volume não devem conter agentes
antimicrobianos nem corantes.
As Soluções Parenterais de Grande Volume não deverão conter substâncias
estabilizantes a menos que estejam especificadas na monografia
correspondente.
F-3.1.4 Volume do envasamento
Os envasamentos de Soluções Parenterais de Grande Volume, deverão conter um
ligeiro excesso até 2% do volume rotulado.
A medida do conteúdo do envasamento se efetuará colocando o mesmo em um
recipiente calibrado e com graduação adequada.
Nos envasamentos em que não ocorrer escoamento sem ventilação, de pelo menos
90% do volume nominal, deverá constar no rótulo a seguinte advertência:
"Deve-se administrar de forma asséptica com filtração do ar de ventilação".
F-3.1.5 Partículas estranhas
Todas as Soluções Parenterais de Grande Volume para infusão de uma dose
devem cumprir com os limites de Partículas estranhas, estabelecidas no
Ensaio de Partículas Estranhas (F.3.1.10).
Todas as unidade de Soluções Parenterais de Grande Volume devem estar livres
de partículas que podem ser observadas em uma inspeção visual ou a olho nu.
NOTA: As Soluções Parenterais de Grande Volume envasadas e rotuladas para
uso como solução para irrigação estão isentas dos requisitos do ensaio de
partículas estranhas.
F-3.1.6 Ensaios de esterilidade
A Soluções Parenterais de Grande Volume devem cumprir os requisitos
estabelecidos em Ensaio de Esterilidade (Anexo M.4).
F-3.1.7 Rotulagem
Os rótulos deverão responder aos requisitos gerais estabelecidos no
Documento Regulamento Técnico Soluções Parenterais de Grande Volume item 8.
O envasamento deve ser rotulado de tal forma que, uma área de sua longitude,
ou circunferência total fique descoberto, a fim de permitir a inspeção do
conteúdo.
NOTA. Os recipientes com Soluções Parenterais de Grande Volume para diálises
peritoneal e irrigação devem ser rotulados indicando que o conteúdo não é
para uso por infusão intravenosa.
F-3.1.8 Embalagem e conservação
Em nenhum caso as Soluções Parenterais de Grande Volume para infusão
endovenosa deverão permitir a administração de volume maiores de 1 litro.
As Soluções Parenterais de Grande Volume para irrigação, diálise ou nutrição
parenteral, estão isentas da restrição de 1 litro dos requisitos anteriores
em relação ao envasado.
F-3.1.9 Esterilização e segurança de esterilidade
F-3.1.9.1 Introdução
Dentro da definição restrita e esterilidade, uma amostra deve ser
considerada estéril só quando há ausência completa de microorganismos
viáveis nela. Contudo, esta definição absoluta não pode aplicar-se
corretamente um lote inteiro do produto acabado devido às limitações no
ensaio.
Uma esterilidade absoluta não pode ser praticamente demostrada sem uma
destruição completa de cada produto acabado. A esterilidade de um suposto
lote como estéril se define portanto em termos probabilísticos, onde se a
possibilidade de encontrar uma unidade de produto contaminado é
aceitavelmente remota. Tal estado de segurança de esterilidade somente pode
ser estabelecido através do uso de ciclos de esterilização adequados e
subsequentes processamento asséptico, se existente, sob adequadas boas
práticas de fabricação, e não confiando somente no ensaio de esterilidade.
Os princípios básicos para validação e certificação do processo de
esterilização são enumeradas a seguir:
(1) estabelecer que o equipamento para o processo possua capacidade de
operar dentro dos parâmetros requeridos.
(2) demonstrar que o equipamento e instrumentação críticos para o controle
são capazes de operar dentro dos parâmetros estabelecidos para o equipamento
de processo.
(3) realizar ciclos repetidos que representem a classe operacional requerida
do equipamento, empregando um produto real ou simulado. Demonstrar que os
processos tenham sido realizados dentro dos limites estabelecidos no
protocolo e finalmente que a probabilidade de sobreviva microbiana nos
processos, repetidos completamente, não sejam maiores que os limites
estabelecidos.
(4) monitorar o processo validado durante a operação de rotina.
Periodicamente, se necessário, certificar e requalificar os equipamentos e
instrumentos.
(5) completar os protocolos e documentar os passos anteriores.
Para cumprir com os limites corretamente aceitáveis e alcançados nos
parâmetros de esterilização, é necessário empregar instrumentos e
equipamento adequados para controlar os parâmetros críticos como temperatura
e tempo. Um aspecto importante do programa de validação em muitos
procedimentos de esterilização implica no emprego de indicadores biológicos.
O processo validado e certificado deverá revalidar-se periodicamente.
Contudo o programa de revalidação não necessita necessariamente ser tão
extenso como o programa original.
A continuação detalha um programa típico para um autoclave de vapor.
O passo de qualificação de instalação se realiza para estabelecer que os
controles e outros instrumentos sejam adequadamente delineados e calibrados.
Deve arquivar-se a documentação demonstrado a qualidade dos insumos, como
vapor, água e ar. O passo de qualificação das operações tem por objetivo
confirmar que a câmara vazia funciona dentro dos parâmetros de temperatura
em todos os lugares chaves da câmara indicados no protocolo.
Geralmente é apropriado desenvolver registros de perfil de calor, por
exemplo, temperaturas simultâneas na câmara empregando múltiplos sensores de
temperatura. Uma variação aceitável típico de temperatura na câmara vazia é
de +/- 1ºC quando a temperatura na câmara é no mínimo 121ºC. O passo
confirmatório do programa de validação é a esterilização real dos materiais
ou produtos. Esta determinação requer o emprego de sensores de temperatura
dentro das amostras dos produtos e uma das seguintes alternativas: amostras
dos produtos aos quais se adicionam concentrações adequadas de
microorganismos de prova apropriada, ou indicadores biológicos soltos na
câmara de autoclave, completamente carregada, com a configuração
operacional.
A efetividade da liberação do calor ou penetração dentro dos produtos reais
e o tempo de exposição são os dois fatores principais que determinam a
letalidade do processo de esterilização. O passo final do programa de
validação requer a documentação dos dados de apoio desenvolvidos para
executar o programa.
Geralmente se aceita que os produtos injetáveis com esterilização final, ou
dispositivos críticos que se pretende que sejam estéreis quando se processa
em autoclave, alcancem uma probabilidade de sobrevida microbiana de 10-6,
quer dizer, a segurança de que a probabilidade de encontrar microorganismos
viáveis no produto esterilizado é menor que um em um milhão. Com produtos
termoestáveis, a aproximação geralmente é exceder consideravelmente o tempo
crítico necessário para alcançar uma probabilidade de sobrevida microbiana
de 10-6 (Overkill).
Contudo, com um produto onde uma prolongada exposição ao calor pode afetar
prejudicialmente, pode não ser fácil empregar este enfoque.
Neste último caso, o desenvolvimento do ciclo de esterilização depende muito
do conhecimento da carga microbiana do produto, baseado no exame, em um
período de tempo adequado, de um número considerável de lotes do produto
pré-esterilizado.
Nota: Para o desenvolvimento e validação do ciclo de esterilização por
vapor, referir-se ao Anexo VIII "Validação de ciclos de esterilização por
vapor" deste documento.
Nota: Para o desenvolvimento e validação do ciclo de esterilização por
vapor, referir-se ao Anexo VIII "Validação de ciclos de esterilização por
vapor" deste documento.
F-3.1.9.2 Ensaio de esterilidade de Lotes
Deve-se reconhecer que o ensaio de esterilidade de referência, poderia não
detectar contaminação microbiana se esta estiver presente somente em uma
pequena porcentagem dos produtos acabados no lote, devido a que o número
especificado de unidades a tomar impões um limite estatístico significativo
sobre a utilidade dos resultados do ensaio. Todavia, esta limitação
intrínseca deve ser aceita já que o conhecimento corrente não oferece
alternativas não destrutivas para averiguar a qualidade microbiológica de
cada produto acabado no lote, e não é uma opção factível aumentar o número
de amostras significativas.
Os principais meios que apoiam que um lote de produto acabado supostamente
estéril cumpre as especificações, consistem na documentação da produção
real, o registro de esterilização do lote e os registros de validação
adicionais que asseguram que o processo de esterilização possui a capacidade
de inativar totalmente a carga microbiana estabelecida no produto, ou um
desafio microbiológico maior.
Se considerar que os dados derivados dos estudos de validação de
esterilidade do processo e dos controles do processo fornecem maior
segurança de que o lote alcance a baixa probabilidade requerida de conter
uma unidade contaminada (comparado com os resultados do ensaio de
esterilidade das unidades acabadas amostradas de cada lote), qualquer
procedimento de ensaio de esterilidade adotado pode ser mínimo. O ensaio de
esterilidade geralmente se realiza diretamente depois da fabricação do loto
como um ensaio de qualidade final do produto. Os ensaios de esterilidade
empregados nesta forma de controle de manufatura não devem confundir-se com
os descritos no Ensaio de Esterilidade (XI.4). Os detalhes do procedimento
podem ser os mesmos com respeito aos meios, inócuos e manipulação das
amostras, porém o número de unidades e/ou tempos de incubação escolhido para
o ensaio podem diferir. O número deve ser escolhido em relação ao propósito
a servir, por exemplo, de acordo a se conceder maior ou menor segurança no
ensaio de esterilidade no contexto de todas as medidas para segurança de
esterilidade na fabricação. Também tempos maiores na incubação fariam o
ensaio mais sensível para os microorganismos de crescimento lento. Nos
ensaios de promoção do crescimento para os meios, os microorganismos de
crescimento lento, particularmente são isolados da carga microbiana do
produto, deveriam incluir-se com as outras cepas de ensaio. Os resultados de
esterilidade negativos ou satisfatórios servem somente como um aporte da
evidência existente a respeito da qualidade do lote se todos os registros de
produção correspondentes do lote estão em ordem, e se sabe que o processo de
esterilidação é efetivo.
F-3.1.9.3 Realização, observação e interpretação
As condições para o ensaio de esterilidade devem ser tais que não ofereçam
um maior desafio microbiano aos produtos que se analisam que o de uma área
de produção, para processamento asséptico. O processamento para o ensaio de
esterilidade deveria ser realizado por indivíduos que tenham um alto nível
de capacitação em técnicas assépticas. As grandes manipulações assépticas
requeridas para realizar um ensaio de esterilidade podem resultar em uma
probabilidade de contaminação não relacionada com o produto, da ordem de 10
-³.Um nível similar a eficiência geral de uma operação asséptica é
comparável a probabilidade de sobrevida microbiana dos produtos
assepticamente processados. Este nível de probabilidade é significativamente
maior que o geralmente atribuído a um processo de esterilização terminal,
uma probabilidade de uma em um milhão ou 10 -6 de sobrevida microbiana.
Deveriam-se empregar periodicamente produtos acabados reconhecidamente
estéreis, deveriam ampliar-se periodicamente como controles negativos, para
assegurar a confiabilidade do procedimento do ensaio. Preferivelmente os
técnicos que realizam o ensaio deveriam desconhecer que estão analisando
controles negativos. Destes ensaios é desejável uma freqüência de falsos
positivos que não exceda a 2%.
Contudo para os produtos efetivamente esterilizados terminalmente, a menor
probabilidade de sobrevida microbiana pode indicar o uso de um ensaio menos
extenso que o procedimento especificado no Ensaio de esterilidade. Esta
confiabilidade somada à segurança de esterilidade da esterilização terminal
depende de um processo de esterilização validado e documentado.
O ensaio de esterilidade só, não é um substituto
F-3.1.10 Ensaio de partículas estranhas.
F-3.1.10.1 Generalidades
Partículas estranhas são substâncias móveis insolúveis, diferentes de bolhas
de gás, presentes não intencionalmente nas soluções parenterais.
As soluções parenterais de grande volume devem estar livres de partículas
que podem ser observadas na inspeção visual. Nos seguintes ensaios, para
injetáveis de grande volume, os resultados obtidos ao examinar uma unidade
isolada ou um grupo de unidades não podem extrapolar com certeza a outras
unidades que não tenham sido analisadas.
Devem elaborar-se planos de amostras estatisticamente válidos, baseados em
um grupo conhecido de fatores operacionais dados, se quiser obter deduções
válidas de dados observados para caracterizar o nível de Partículas
Estranhas em um grande grupo de unidades.
F-3.1.10.2 Ensaio
Este ensaio para partículas estranhas é adequado para revelar a presença de
partículas cujo eixo longitudinal, ou dimensão linear efetiva é de 10 um ou
superior. Podem ampliar-se procedimentos alternativos para medir partículas,
sempre que os resultados obtidos sejam de confiabilidade equivalente.
Todavia, quando aparece uma diferença, ou em caso e uma dúvida, só é
conclusivo o resultado obtido pelo procedimento dado neste Regulamento.
F-3.1.10.3 Procedimento
material de vidro, equipos escrupulosamente limpos que tenham sido
enxaguados sucessivamente com uma solução aquecida de detergentes, água
quente, água e álcool isopropílico. Aplicar a água como um jato para frente
através da superfície do objetivo suspenso verticalmente, trabalhando
lentamente de cima para baixo. Realizar o enxágüe com álcool isopropílico
sob uma câmara de fluxo laminar equipada com filtros ultra-HEPA (ar
particulado de alta eficiência). Deixar secar os objetos sob a câmara
contracorrente das demais operações. Preferivelmente, colocar a câmara em
uma sala separada com ar condicionado, filtrado e mantido baixa pressão
positiva a respeito da área circulante. Antes de concluir o ensaio, limpar a
câmara de fluxo laminar (exceto a superfície dos filtros médios) com um
solvente apropriado. Manter uma velocidade de fluxo de ar a 90 +/- 20
pies/minuto).
F-3.1.10.4 Equipamento e membrana filtrante
Usando pinças, retirar uma membrana reticulada de cor contrastante de seu
envasamento. Lavar ambos os lados da membrana com uma corrente de água que
tenha sido filtrada através de uma membrana adequada para eliminar
partículas que tenham uma dimensão efetiva linear maior de 5 um. Sustentas o
filtro em posição vertical, e começar pela parte superior do lado sem
reticulado, passando a corrente de trás para adiante através da superfície,
trabalhando lentamente de cima para baixo de forma que as partículas se
enxágüem passando para o filtro, e repetindo o processo sobre o lado
reticulado. Colocar a membrana (o lado reticulado para cima) sobre a base do
porta filtro, e instalar o funil de filtração sobre a base sem deslizar o
funil sobre o filtro de membrana. Inverter a unidade armada e lavar o
interior do filtro aproximadamente 10 segundos com um jato de água filtrada.
Deixar drenar a água e colocar a unidade sobre o recipiente de filtração.
F-3.1.10.5 Realização
Misturar a solução invertendo o recipiente 20 vezes. Limpar profundamente a
superfície externa do recipiente com um jato de água filtrada, e retirar o
fechamento cuidadosamente evitando a contaminação do conteúdo. Transferir 25
ml da solução bem misturada no funil, deixar descansar 1 minuto e aplicar
vácuo e filtrar. Retirar o vácuo suavemente, e lavar as paredes interiores
do funil com um jato de 25 ml de água filtrada. Dirigir o jato de água
filtrada de forma tal a lavar as paredes do funil deixando-as sem partículas
que podem ficar sobre as paredes, evitando dirigir a corrente sobre a
superfície do filtro. Depois que desaparecer a turbulência, filtrar com
vácuo e enxaguar. Retirar suavemente a seção superior do equipo filtrante
enquanto se mantém o vácuo, interromper o vácuo, e retirar com pinça a
membrana. Fixar a membrana em uma placa de petri, usando uma película muito
delgada de fixador, se necessário para manter o filtro plano em seu lugar.
Deixar secar a membrana com a placa de petri semifechada. Colocar
cuidadosamente a placa de petri sobre a platina do microscópio, e contar as
partículas sobre o filtro como se descreve mais adiante.
F-3.1.10.6 Determinação
Examinar a membrana completa em um microscópio adequado com um aumento de
100 vezes com a luz incidente em um ângulo de 10º a 20º com a horizontal.
Contar o número de partículas que tenham uma dimensão linear efetiva igual
ou maior que 10 um e igual ou maior que 25 um. Realizar a determinação em um
branco, usando um equipo e membrana filtrante como é indicado em Realizações
de ensaio, começando com "lavar as paredes internas do filtro com um jato".
Subtrair o total obtido no branco do total, não corrigido, obtido na
amostra.
material morfologicamente indistinto que mostre pouco ou nenhum relevo de
superfície e que apresente um aspecto gelatinoso ou tipo película. Como em
soluções este material consiste em unidades de ordem de 1 um ou menos, e é
provável que seja contado só depois de sua agregação ou deformação da
membrana. A interpretação de sua contagem pode ser ajudada com a análise de
uma amostra de solução com um contador eletrônico de partículas adequado.
F-3.1.10.7 Interpretação
Examinar amostras e branco em duplicata como se indicado. Se a determinação
do branco dá mais de 5 partículas que têm dimensões linear efetiva de 25 um
ou mais, o resultado operacional não é satisfatório e o ensaio não é válido.
Os injetáveis de grande volume para infusão de uma dose cumprem com os
requisitos do ensaio se contém até 50 partículas por ml que sejam iguais ou
maiores de 10 um e até 5 partículas por ml que sejam iguais ou maiores de 25
um em sua dimensão linear efetiva.
F-4. REAGENTES
F-4.1 Soluções - SR:
Ver características, preparação e usos em: "Test Solution (TS)" em USP XXIII
páginas 1786-1792.
F-4.2 Soluções - SV:
Ver características, preparação e usos em: "Volumetric Solution (VS)" em USP
XXIII páginas 1792-1798.
ANEXO G
TRANSPORTE DE SOLUÇÕES PARENTERAIS DE GRANDE VOLUME
G-1. OBJETIVO
G-2. DEFINIÇÕES
G-3. CONDIÇÕES GERAIS
G-1. OBJETIVO
Este Regulamento estabelece os procedimentos a serem observados, a fim de se
evitar que as Soluções Parenterais de Grande Volume (SPGV) sofram alterações
durante seu transporte. Na distribuição, nível primário, o cumprimento deste
Regulamento é de responsabilidade do fabricante.
G-2. DEFINIÇÕES
G-2.1 Soluções Parenterais de Grande Volume (SPGV)
São soluções em base aquosa, estéreis, apirogênicas, acondicionadas em um
recipiente único de 100 ml ou maior e esterilizadas terminalmente.
Incluem-se nesta definição tanto as soluções para administração endovenosa
quanto as destinadas à irrigação ou à diálise peritonial. O termo
"Parenteral de Grande Volume" não inclui nenhum produto de origem biológica.
G-2.2 Fabricante
Pessoa jurídica que elabora SPGV, com prévia autorização de funcionamento
por parte da autoridade sanitária nacional competente.
G-2.3 Distribuidor
Pessoa jurídica que realiza fases de comercialização de SPGV.
G-2.3.1 Distribuidor a nível primário
O que entrega em forma direta na cadeia de comercialização, promoção e
investigação aplicada, desde o fabricante do produto até o primeiro receptor
do mesmo.
G-2.4 Transportador
A empresa que realiza o transporte de SPGV (em caixa fechada).
G-3 Condições Gerais
G-3.1 O transporte de SPGV deve ser feito de maneira tal que não se afete a
identidade, integridade ou pureza das mesmas.
G-3.2 A empresa transportadora deve oferecer condições que garantam a
execução deste serviço, de acordo com a presente norma.
G-3.3 A pessoa responsável pelo transporte deve ser devidamente orientada
para seguir as indicações desta Norma.
G-3.4 A carga, transporte, descarga e armazenamento dos produtos deve seguir
as seguintes recomendações:
G-3.4.1 Os veículos ou depósitos devem estar perfeitamente limpos e isentos
de qualquer sujeira ou odor.
G-3.4.2 Não se deve transportar ou depositar os produtos em ambiente úmidos,
sem ventilação ou expostos ao sol;
G-3.4.3 As SPGV devem ser transportadas e depositadas sob condições tais de
segurança que assegurem que não se afete sua integridade e qualidade. Em
especial não devem ser transportadas com os produtos que se enumeram a
seguir:
a) alimentos e materiais perecíveis;
b) solventes orgânicos;
c) gases;
d) substâncias corrosivas e/ou tóxicas;
e) pesticidas, agrotóxicos;
f) materiais radiativos.
G-3.4.4 respeitar o empilhamento máximo recomendado pelo fabricante.
G-3.4.5 empilhar os produtos de acordo com os símbolos presentes nas
embalagens;
G-3.4.6 deve-se ter cuidado com as embalagens durante o transporte ou
armazenamento dos produtos. Evitar jogar, utilizar como assento e caminhar
sobre as mesmas, a fim de não danificá-las;
G-3.4.7 proteger as caixas da chuva e sol e do ataque de insetos e roedores;
G-3.5 Qualquer suspeita de danos nos produtos deve ser comunicado
imediatamente ao fabricante, a fim de que se torne as providências
necessárias;
G-3.6 A entrega de material deve ser realizada na presença de uma pessoa
devidamente autorizada pelo estabelecimento para o recebimento do produto;
G-3.7 Em caso de acidente, o transportador deve comunicar imediatamente ao
fabricante, a fim de que se tornem as providências necessárias.
ANEXO H
RECEBIMENTO, ARMAZENAMENTO E DISTRIBUIÇÃO
SOLUÇÕES PARENTERAIS DE GRANDE VOLUME
H-1. OBJETIVO
H-2. DEFINIÇÕES
H-3. CONDIÇÕES GERAIS
H-1. OBJETIVO
Este Regulamento estabelece os procedimentos de recebimento, armazenamento e
distribuição de soluções parenterais de grande volume, com o objetivo de
evitar que as mesmas sofram alterações durante tais operações.
H-2. DEFINIÇÕES
H-2.1 Solução parenteral de grande volume (SPGV).
São soluções em base aquosa, estéreis, apirôgenicas, acondicionadas em um
recipiente único de 100 ml ou maior e esterilizadas terminalmente.
Incluem-se nesta definição tanto as soluções para administração endovenosa
quanto as destinadas à irrigação ou à diálise peritoneal. O termo
"Parenteral de Grande Volume" não inclui nenhum produto de origem biológica.
H-2.2 Fabricante
Pessoa jurídica que elabora SPGV com a prévia autorização de funcionamento
por parte da Autoridade Sanitária Nacional Competente.
H-2.3 Distribuidor Pessoa jurídica que realiza fases de comercialização de
SPGV.
H-2.4 Transportador
A empresa que realiza o transporte de SPGV (em caixa fechada).
H-2.5 Lote
Conjunto de SPGV que se produz em um ciclo de fabricação cuja característica
essencial é a homogeneidade.
H-2.6 Número de lote
Designação impressa no rótulo de cada unidade do produto, constituída por
combinações de letras, números ou símbolos, que permita identificar o lote a
que esta pertença e, em caso de necessidade localizar e repassar todas as
operações de produção, inspeção e controle praticadas durante a fabricação,
acondicionamento, armazenamento e distribuição do mesmo.
H-2.7 Quarentena
Retenção temporária de um lote de produto com a proibição de usá-lo até que
o mesmo seja aprovado pelo Controle de Qualidade.
H-3. CONDIÇÕES GERAIS
H-3.1 Recebimento
H-3.1.1 A recepção da SPGV deve estar orientada por procedimentos escritos
que incluam diretrizes específicas com respeito a cada produto, em um todo
de acordo com as recomendações desta Norma.
H-3.1.2 A recepção deve ser efetuada por pessoa devidamente habilitada e
treinada quanto às características do produto, de maneira a avaliar suas
condições.
H-3.1.3 O responsável pelo recebimento deve consignar e anotar na fatura:
a) nome do(s) produto(s);
b) nome do fabricante;
c) número do lote;
d) nome do transportador;
e) número de placa do veículo;
f) tipo de veículo (fechado, aberto com cobertura, furgão);
g) condições higiênicas;
h) condições de carga;
i) data e hora de chegada.
H-3.1.4 Levar-se-ão em conta as seguintes observações na descarga do
material:
a) evitar golpes que possam ocasionar danos ao produto;
b) verificar e separar os produtos de acordo com seus números de lote, para
facilitar seu armazenamento;
c) inspecionar visualmente algumas unidades para verificar a integridade das
mesmas.
H-3.1.5 Em caso de que o veículo seja considerado inadequado ou que os
produtos apresentarem danos em sua embalagem externa, a carga deve ser posta
em quarentena devidamente identificada e o comprador deverá comunicar por
escrito o ocorrido ao fabricante ou enviar a cópia à Autoridade Sanitária,
se considerar necessário.
H-3.2 Armazenamento
H-3.2.1 O armazenamento de SPGV deve estar orientado por procedimentos
escritos que incluam indicações específicas para cada produto, de acordo com
as recomendações deste Regulamento.
H-3.2.2 O lugar de armazenamento deve ter capacidade suficiente para
permitir a separação seletiva e ordenada dos produtos e a rotação de
estoques.
H-3.2.3 A área de armazenamento deve estar seca, ventilada, protegida de sol
e limpa.
H-3.2.4 O armazenamento dos produtos deve ser realizado em condições
adequadas de temperatura, umidade e iluminação de acordo com as instruções
do fabricante, de maneira a não afetar a identidade e qualidade do produto.
H-3.2.5 O empilhamento das caixas deve ser separado de modo a facilitar a
limpeza e seguir as instruções do fabricante quanto ao máximo de caixas a
empilhar.
H-3.2.6 O armazenamento deve ser ordenado de maneira que permita
individualizar cada lote e dispensar os mesmos em ordem cronológica de suas
datas de vencimento.
H-3.3 Distribuição
H-3.3.1 A distribuição de SPGV deve ser orientada por procedimentos escritos
que incluam instruções específicas para cada produto, conforme as
recomendações deste Regulamento.
H-3.3.2 Antes da distribuição deve-se:
a) identificar o número de lote e sua data de vencimento;
b) inspecionar visualmente cada unidade a ser dispensada, e verificar o
aspecto da solução e a integridade do recipiente;
c) transportar o material de forma adequada, evitando comprometer a
embalagem e sem retirar a proteção plástica ou de cartolina;
d) criar um registro de distribuição por lote e área de uso.
Em caso de haver observações de reações adversas ou outras, separar o lote e
comunicar imediatamente, por escrito, ao fabricante ou distribuidor e à
Autoridade Sanitária se considerar necessário.
ANEXO I
VALIDAÇÃO DO PROCESSO DE ESTERILIZAÇÃO POR VAPOR
I-1. OBJETIVO
I-2. DEFINIÇÕES
I-3. CONDIÇÕES GERAIS
I-4. CONDIÇÕES ESPECIFICAS
I-5. CRITÉRIOS PARA REVALIDAÇÃO
I-6. RECERTIFICAÇÃO
I-1. OBJETIVO
Esta norma estabelece as condições exigidas para validar um ciclo de
esterilização por calor úmido, de modo a garantir a eficiência do processo
quer dizer, garantir uma probabilidade de sobrevida microbiana não superior
a 1 x 10-6 (menos de uma unidade não estéril por cada milhão de unidades)
para produtos parenterais esterilizados terminalmente.
I-2. DEFINIÇÕES
Para efeitos desta Norma, são adotadas as seguintes definições:
I-2.1 Validação: Programa formal para comprovar a eficiência e
reprodutibilidade de uma técnica, operação ou processo.
I-2.2 Validação de ciclos de esterilização: Procedimento que confirma que a
letalidade do ciclo é suficiente para garantir uma probabilidade de
sobrevida microbiana não superior a 1 x 10-6.
I-2.3 Protocolo: Documento contendo uma descrição do programa a seguir na
evolução do processo de esterilização.
I-2.4 Certificação: Função administrativa na qual se realiza a revisão e a
aprovação do processo, como etapa final do programa de validação.
I-2.5 Esterilização terminal: Procedimento aplicado a recipientes fechados
que contém SPGV, garantindo uma probabilidade de sobrevida microbiana não
superior a 1x10-6 no produto.
I-2.6 Esterilidade: A ausência de microorganismos viáveis. Supõe-se que os
produtos que cumprem os critérios de esterilização terminal estão estéreis.
I-2.7 Biocarga pré-esterilização: Número de microorganismos viáveis
presentes no produto, envasado e fechado, antes da esterilização.
I-2.8 Indicador biológico: É um sistema contendo microorganismos de
concentração e resistência térmica conhecidas, do qual se pode antecipar uma
taxa de mortalidade previsível quando exposto a parâmetros físicos
específicos.
I-2.9 Qualificação: Parte do programa de validação, onde o controle dos
parâmetros físicos do sistema de esterilização é avaliado para demostrar sua
adequação para realizar o que foi proposto no processo projetado.
I-2.10 Requalificação: Repetição de uma parte ou de todos os requisitos de
qualificação para reavaliar a utilidade do processo.
I-2.11 Estudo de distribuição de calor: Estudo para documentar que a
distribuição do meio esterilizante no interior da câmara garanta que todos
os recipientes recebam uma quantidade aceitável e uniforme de calor, durante
o processo de esterilização.
I-2.12 Estudo de penetração do calor: Estudo para assegurar que o recipiente
menos aquecido no interior da carga seja suficientemente exposto ao calor
letal.
I-2.13 Valor "D": Tempo, expresso em minutos, à determinada temperatura,
necessária para conseguir uma redução logarítmica (ou de 90%) no número de
microorganismos.
I-2.14 Valor "z": Número de graus de temperatura necessários, sob condições
específicas, para conseguir uma redução logarítmica (ou de 90%) no o valor
"D".
I-2.15 Valor de "Fzt": Tempo equivalente a uma temperatura t e dado a um
produto com o propósito de sua esterilização, para um valor específico de z.
I-2.16 Valor de Fo: Tempo equivalente a 121ºC e dado a um produto com o
propósito de sua esterilização, para um valor de z=10.
I-3. Condições Gerais
I-3.1 Este documento fixa os procedimentos a seguir para a qualificação e
validação do processo de esterilização das SPGV, de modo a garantir sua
eficiência.
I-3.2 A esterilização requer uma abordagem multidisciplinar, integrando
programas microbiológicos, físicos e de engenharia, para garantir a
esterilidade, sem comprometer a qualidade total do produto.
Características das soluções tais como potência, composição química, pH,
ausência de partículas, não devem ser adversamente afetadas pelo processo de
esterilização.
I-3.3 Uma SPGV está definida como estéril se sofrer uma esterilização
terminal. A eficiência da esterilização terminal pode ser estabelecida por
uso de indicadores biológicos apropriados e métodos físicos que relacionem a
resistência térmica da biocarga de pré-esterilização ao ciclo de
esterilização terminal. Neste caso, a resistência ao calor e a biocarga de
pré-esterilização devem ser conhecidas e monitoradas.
I-4. CONDIÇÕES ESPECÍFICAS
I-4.1 Estudos de pré-validação
São um grupo de atividades pré-estabelecidas em procedimentos escritos, que
devem ser completadas e documentadas antes que se inicie a validação do
ciclo de esterilização.
Os estudos de pré-validação envolvem:
I-4.1.1 Definição dos parâmetros físicos do ciclo, os critérios de controle
e os limites de tolerância.
Estes limites devem ser estabelecidos para garantir que se alcance os
requisitos mínimos para a letalidade, e que não ocorram efeitos adversos no
produto.
I-4.1.2 Documentação adequada de cada operação.
I-4.1.3 Calibração, contra padrões certificados, de todos os equipamentos e
instrumentos de medição usados na pré-validação.
I-4.1.4 Determinação das características do produto que podem ser afetadas
por influência do processo de esterilização, tais como:
a) integridade física do recipiente de SPGV durante e depois do processo.
b) Avaliações microbiológicas do sistema de fechamento do recipiente.
c) Estabilidade do produto sob condições de tempo e temperatura.
I-4.1.5 Definição de configuração das cargas e estabelecimentos da densidade
da carga para que exista condições uniformemente reprodutíveis de
transferência de calor.
I-4.2 Validação
I-4.2.1 Introdução
A validade de esterilização é necessária nas seguintes situações:
a) Para a confirmação da eficiência do processo empregado.
b) Com cada troca das condições de um ciclo.
c) Ao instalar um novo equipamento.
Deverão ser realizados estudos de validação, nos quais todos os critérios de
aceitação descritos no protocolo devem ser cumpridos:
A validação deve incluir:
a) Toda a documentação dos equipamentos;
b) A preparação do protocolo;
c) Os ensaios de classificação para demonstrar a adequação do processo e,
portanto, a certificação final.
I-4.2.2 Protocolo de validação.
O protocolo de validação da esterilização deve ser preparado com a
participação dos técnicos especializados em engenharia, produção e Controle
de Qualidade de produtos.
O protocolo de conter:
I-4.2.2.1 Especificações e identificação do equipamento, produto e processo
de esterilização a ser qualificado.
I-4.2.2.2 Especificações do tipo de equipamento a usar para coleta de dados,
método de calibração e intervalos de tempo na coleta de dados:
I-4.2.2.3 Critérios de aceitação para:
a) Ciclo de esterilização;
b) Distribuição e penetração de calor;
c) Controle e desempenho de indicadores biológicos;
d) Aprovação do processo de esterilização.
I-4.2.3 Qualificação dos equipamentos e instalações.
O programa de qualificação deve ser estabelecido antes do uso rotineiro do
sistema de esterilização novo ou modificado. A finalidade é assegurar que o
equipamento seja capaz de reproduzir os parâmetros dentro dos limites
estabelecidos para as especificações do processo.
A qualificação dos equipamento deve incluir a descrição e/ou desenhos,
projetos, diagrama de fluxos de:
a) Câmara de esterilização;
b) Sistema de encanamento;
c) Sistema de instrumentação (os instrumentos usados devem ser calibrados
contra padrões certificados).
I-4.2.4 Métodos
Identificam os procedimentos básicos para a definição dos ciclos de
esterilização em função da termorresistência dos produtos a ser
esterilizados.
I-4.2.4.1. Método de probabilidade de sobrevida
a) Fundamentos e indicações:
O método de probabilidade de sobrevida estabelece os parâmetros do ciclo com
base no número de microorganismos que se encontram presentes normalmente no
produto a ser esterilizado e em sua resistência térmica.
A combinação destes dados determina a quantidade mínima de calor necessário
para reduzir a biocarga de pré-esterilização a uma probabilidade de
sobrevida microbiana não superior a 1 x 10-6.
Geralmente este critério é empregado quando se desenvolve e se validam
ciclos da esterilização para produtos termossensíveis. Entretanto, se é
aprovado, podem ser empregados para materiais termoestáveis.
b) Etapas do método de probabilidade de sobrevida:
Probabilidade Estudo de biocarga
de preesterilização
sobrevida (Anexo VII item I-4.3.1)
Estudo de probabilidade
de Laboratórios Estudo de resistência
Determinação do valor
sobrevida térmica de biocarga
item (I-4.3.3)
item (I-4.3) item I-4.3.2
Determinação de biocarga
item (I-4.3.4)
Cálculo de probabilidade
de sobrevida e determinação
do valor F mínimo para o ciclo
(I-4.3.5)
Estudo da distribuição de calor
(I-4.4.1)
Estudos industriais Estudo da penetração de
calor
(I-4.4) (I-4.4.2)
Critérios de aceitação dos
estudos de penetração de calor
(I-.1.4.2.3)
Cálculo de F (I-4.4.3)
Biovalidação
(I-4.5)
I-4.2.4.2 Método de sobremorte ("overkill")
a) Fundamentos e indicações;
O método de sobremorte estabelece pelo menos a mesma probabilidade de
sobrevida microbiana (não superior a 10-6), sem levar em conta o número de
microorganismos viáveis-biocarga e sua resistência térmica. Este método é
amplamente empregado quando se esterilizam materiais termoestáveis.
b) Etapas do método de sobremorte.
Determinação do valor
D I2I (I-4.6.4)
Calibração de
indicadores Determinação do valor
biológicos z (I-4.6.5)
(I-4.6)
Determinação de Fo Para o cilco
(I-4.6.6)
Sobremorte
Estudos Estudo de distribuição de
calor
industriais (I-4.4.1)
(I-4.4)
Estudo de penetração de calor
(I-4.4.2)
Cálculo de Fo
(I- 4.4.3)
Biovalidação
(I-4.7)
I-4.3 Estudos de laboratório
I-4.3.1 Estudos de biocarga de pré-esterilização
Consiste na determinação do número de microorganismos associados com o
produto. O número e a freqüência dos lotes analisados devem ser determinados
pelo fabricante com base na variação do número de microorganismos de lote a
lote, em potencial crescimento microbiano antes da esterilização e a
variação estacional da biocarga.
As contagens microbianas (determinação de número de unidades formadoras de
colonias-ufc) de SPGV devem ser realizadas em áreas adequadas para ensaios
microbiológicos (fluxo laminar), conforme a seguinte metodologia:
a) Filtrar um volume adequado da SPGV, contido no recipiente final, através
de um filtro de membrana de 0,45 micra (o método de contagem de colonias em
placa pode ser utilizado quando o número de microorganismos na solução seja
elevado).
b) Inocular as membranas com um meio de cultivo não seletivo adequado
(Soybean Casein Digest Agar, Tryptone Glicose Extract Agar, Eugon Agar) a
30°C-35°C no mínimo de 72 (setenta e duas) horas.
c) Calcular o número de unidades formadoras de colonias (ufc) por recipiente
de SPGV.
I-4.3.2 Estudo de resistência térmica (RT) dos microorganismos
Nos produtos termolábeis, o estudo da RT dos microorganismos associados com
o produto e definidos no estudo da biocarga de pré-esterilização é
necessário para determinar o tempo mínimo de esterilização, para uma redução
decimal na biocarga a determinada temperatura (Valor D), de modo a oferecer
uma garantia aceitável para o processo. Os microorganismos resistentes devem
ser aqueles periodicamente isolados de vários produtos, que por meio de
ensaio de seleção demonstram ser resistentes ao calor.
I-4.3.2.1 Sistemas para a determinação da RT dos microorganismos
Existem diversos tipos de aparatos para a determinação precisa e
reprodutível da RT dos microorganismos. Os mais simples são:
a) Banho de azeite ou glicerol: Ampolas vedadas ou tubos capilares contendo
a suspensão líquida dos microorganismos se submergem em banho de azeite ou
glicerol a uma determinada temperatura, constante, por um tempo também
determinado.
b) Retorta em miniatura ou autoclave: Vários tipos de amostras (suspensão em
ampolas, tiras de papel inoculadas, esporos inoculados em veículos sólidos,
ou produtos inoculados) podem ser expostos dentro da câmara, que pode
ministrar fases rápidas de aquecimento e esfriamento durante o período de
exposição.
I-4.3.2.2 Ensaios de seleção de RT para a biocarga de um produto.
O objetivo dos ensaios de seleção é selecionar os microorganismos
resistentes para os quais o valor D deve ser determinado.
a) Dar um choque térmico na solução durante 10 a 15 (dez a quinze) minutos a
80°C-100°C, para eliminar células vegetativas e estimular a esporulação dos
microorganismos.
b) Utilizar a suspensão de esporos resultantes para a determinação do valor
D.
I-4.3.3 Determinação do valor D (redução decimal de biocarga, a determinada
temperatura).
I-4.3.3.1 Metodologia.
a) Com as formas esporuladas obtidas nos ensaios de seleção, inocular
amostras de SPGV, em duplicata, com um número conhecido de esporos ou
utilizar tiras de papel ou veículos sólidos contendo também um número
conhecido de esporos.
b) Preparar controles positivos para determinar o número de esporos na
suspensão (ou tira, etc) a ser analisada. O número de esporos necessários
será baseado no esquema de cada experimento, porém geralmente está em ordem
de (10 ) a (10 ) esporos por amostras.
c)Expor pelo menos 05 (cinco) amostras a uma temperatura especificada
durante, pelo menos 3 (três) intervalos de tempo diferentes, para determinar
o número de sobreviventes (Cálculo do valor D).
I-4.3.3.2 Cálculo do valor D.
O valor D ou tempo de redução decimal, a uma determinada temperatura é o
tempo necessário para inativar 90% da população microbiana do produto e pode
ser calculado por curvas de sobrevida (contagem ufc) ou pelo método de
frações negativas.
a) Cálculo por curvas de sobrevida (contagem de ufc)
a1)Com os dados de sobrevida, realizar uma curva semilogarítmica, colocando
em um gráfico o logaritimo do número de sobreviventes (no eixo y) e o tempo
de aquecimento a uma determinada temperatura (no eixo x).
a2)Ajustar a reta de regressão linear, seguindo uma equação de y=a+bx.
Considerando:
y = log10 do número de sobrevivente no tempo x
x = tempo de aquecimento a uma temperatura determinada
a = intersecção do eixo y a tempo 0
b = inclinação da reta
O valor D é a reciproca negativa da inclinação da reta.
Log Nº de
Sobrevida 10 6 90
10 5 99.9
10 4 99.99
10³ 99.999
10² 99.9999
10 1
10 0
área de 10 1 % de
probabi- 10 -² destruição
lidade 10 -³
de 10 -4
sobre- 10 -5
vida
0 10 20 30 40 50
Tempo (minutos)
Fig.1 - Curva de sobrevida
b) Cálculo por método de frações negativas.
b1) Pelo menos 10 (dez) amostras inoculadas com o mesmo número de esporos
são aquecidas a uma temperatura determinada durante, pelo menos 3 (três)
intervalos de tempos diferentes.
b2) Logo após o aquecimento, as amostras são incubadas em meio adequado
(Soybean Casein Digest Medium, Thioglycolate Fluid,etc) a uma temperatura
ideal para o crescimento dos microorganismos, no mínimo de 7 (sete) dias.
b3) Após 7(sete) dias de incubação registrar a fração das amostras negativas
(sem crescimento) sendo:
U = tempo de exposição a temperatura especificada
A = concentração inicial de microorganismos na amostra
B = 2,303 log10 (n/q)
n = número total de amostras inoculadas
q = número total de amostras negativas após a esterilização.
U
D = -------------------------
log10A-log10B
I-4.3.4 Determinação do valor z (número de graus de temperatura necessários
para obter uma redução logarítmica do valor D).
O valor z, se define como o número de graus de temperatura necessários para
mudar o valor D em um fator de 10; é útil para realizar cálculos que
permitam a comparação da letalidade dos esporos a diferentes temperaturas.
Para fins de cálculo, quando envolve a resistência térmica dos
microorganismos naturais, é apropriado pressupor um valor z=10°C.
Quando se utilizam indicadores biológicos para medir a letalidade durante a
validação, deve-se verificar o valor z dos mesmos, já que podem existir
discrepâncias entre os valores de Fo determinados por sensores de
temperatura (Fo pressupõe um z=10°C)
e valores de F determinados por indicadores biológicos quando o valor z dos
indicadores varia significativamente de 10°C.
I-4.3.5. Cálculo da probabilidade de sobrevida e do valor F mínimo
necessário para a esterilização: usando os dados da biocarga e os valores D
e Z:
O valor usado para representar a biocarga, é geralmente o número máximo de
microorganismos (contagem total por recipiente) encontrado em um dado
produto. Quando existe preocupações pelos efeitos adversos de um aquecimento
excessivo, é aceitável considerar a biocarga como um número máximo de
bactérias formadoras de esporos por recipiente de produto. Os valores D
usados nos cálculos do processo são geralmente aqueles obtidos nos
microorganismos mais resistentes isolados em um produto, pressupondo-se que
toda a população esteja constituída pelo microorganismos mais resistentes ao
calor.
I-4.3.5.1. Determinação da probabilidade de sobrevida
Quando se conhece o valor F para um ciclo de esterilização, a probabilidade
de sobrevida microbiana para este ciclo é calculada através da seguinte
fórmula:
log10B = log10A - F
-------
D
onde:
B = probabilidade de sobrevida (nível máximo aceitável para a probabilidade
de sobrevida = 1x10-6).
A = biocarga do produto
D = tempo necessário para reduzir em 90% a população de microorganismos mais
resistentes encontrados em um produto.
F = letalidade mínima necessária, pressupondo z = 10°C expressa como o
número de minutos em que o recipiente mais frio na carga deve ser aquecido à
temperatura especificada.
I-4.3.5.2 Determinação do valor F mínimo necessário
Quando se conhece a biocarga do produto, a resistência dos microorganismos
naturais e o nível máximo de sobrevida microbiana aceitável, F se calculada
pela seguinte fórmula;
F = D (log10A -log 10B)
B = nível máximo aceitável para a probabilidade de sobrevida
I-4.3.5.3 Determinação do tempo de exposição.
O tempo de exposição de um ciclo de esterilização necessário para fornecer o
valor F mínimo exigido pode ser determinado da seguinte maneira:
Estabelecer o ponto frio da carga por sensores de temperatura e ajustar o
tempo de esterilização, de modo que o recipiente mais frio esteja a
temperatura de exposição pelo tempo especificado. Isto não considera a
letalidade adicional recebida pelo produto durante as fases de aquecimento e
esfriamento do ciclo de esterilização.
I-4.4 Estudos industriais
A validação de um novo processo de esterilização devido às novas condições
do ciclo ou novos equipamentos. inclui estudos de classificação nos quais se
devem cumprir todos os critérios de aceitação descritos no protocolo. Cada
câmara de esterilização (autoclave) de produção deve ser qualificada. Quando
uma série de autoclaves idênticas tenha sido qualificada para um mesmo ciclo
de esterilização, poder-se-á biovalidar novos produtos em qualquer das
autoclaves idênticas.
Se um produto novo puder ser esterilizado usando um ciclo previamente
qualificado por sua semelhança a um produto já qualificado, o produto novo
pode ser qualificado por equivalência só para ser esterilizado empregando
aquelas autoclaves qualificadas.
I-4.4.1 Estudos de distribuição de calor
I-4.4.1.1 Introdução
Estes estudos devem ser realizados em toda autoclave para cada configuração
de carga e para cada tamanho de recipiente a não ser que se estabeleça um
tamanho particular que represente o tamanho menos ideal. Deve-se realizar
estudos suficientes para confirmar que a distribuição de calor é uniforme e
reproduzível em toda a câmara. Cada estudo deve empregar um mínimo de 10
(dez) sensores de temperatura (calibrados antes e depois de seu uso nos
estudos) que serão expostos em meio esterilizante dentro do autoclave. Os
estudos de distribuição de calor deverão repetir sempre que exista qualquer
alteração na configuração da carga ou qualquer modificação no autoclave que
possa alterar a distribuição de calor.
I-4.4.1.2 Colocação de sensores de temperatura na carga.
Deve-se distribuir um número adequado de sensores de temperatura no espaço
geométrico do autoclave para que as zonas verticais e horizontais fiquem
representadas. Colocar um dos sensores de temperatura em posição próxima ao
sensor de temperatura do registrador do autoclave. Cada sensor deve ser
situado em posição definida e deve permanecer nesta posição durante todo o
estudo, assegurado por dispositivos de fixação e não deve estar apoiado
sobre os produtos ou as superfícies internas autoclave.
4.4.1.3 Critérios de aceitação dos estudos de distribuição de calor.
a) Não devem apresentar variações de temperatura superior a 2°C acima ou
abaixo da média das temperaturas de todos os sensores, durante o período em
que as cargas permaneçam à temperatura de exposição.
b) Os sensores de temperatura devem ser calibrados antes e depois de cada
estudo e os resultados das calibrações não devem apresentar variações de
temperatura de ± 0,5°C com respeito ao termômetro de referência.
c) Os parâmetros operacionais do ciclo de esterilização devem obedecer as
especificações do protocolo.
d) A diferença de temperatura entre o sensor do registrador de temperatura
da autoclave e do sensor em estudo não deve variar mais de 1,0°C.
e) Deve haver pelo menos 9 (nove) sensores funcionando corretamente durante
o estudo.
I-4.4.2 Estudos de penetração de calor
I-4.4.2.1 Introdução:
Os estudos de penetração de calor são realizados para assegurar que os
envasamentos mais frios, dentro de uma determinada configuração de carga,
estejam expostos consistentemente a suficiente letalidade térmica. Devem ser
realizados em cada câmara usando pelo menos as configurações de carga máxima
e mínima. Realizar o estudo em envasamentos de diferentes tipos e tamanhos.
O envasamento deve conter o volume de enchimento máximo com uma solução com
características de aquecimento tão lento como a de aquecimento mais lento
entre as soluções a esterilizar.
I-4.4.2.2 Colocação dos sensores de temperatura na carga
a) Em cada estudo se deve empregar no mínimo 10 (dez) recipientes com um
sensor de temperatura submerso em solução, situada no setor de carga
previamente determinados.
b) Para cada estudo podem-se usar 10 (dez) envasamentos inoculados com um
indicador biológico, que podem ser os mesmos 10 (dez) envasamentos com
sensores ou unidades diferentes, colocados em posição adjacentes aos
sensores de temperatura.
c) Realizar um número suficiente de estudos de penetração de calor para
determinar se o valor de Fo pré-estabelecido se reproduz consistentemente
através de toda a autoclave.
Os dados empregados para calcular o valor Fo devem ser obtidos na etapa do
ciclo de esterilização onde a temperatura no interior do autoclave está
estabilizada e tenha alcançado os valores especificados no protocolo, de
acordo com o estabelecimento nos estudos de distribuição de calor.
d) Deve-se fixar o sensor de temperatura ao recipiente cheio com solução, de
modo que possa submergir no líquido sem tocar nas paredes do recipiente.
Dado que cada recipiente possui características próprias, o fabricante deve
desenvolver dispositivos funcionais que garantam que o sensor tenha boa
colocação, além de permanecer imobilizado em posição pré-estabelecida dentro
da autoclave, durante os estudos. As unidades com sensores não devem
apresentar vazamentos.
e) Distribuir as 10 (dez) unidades com sensores no espaço geométrico
interior da autoclave, variando posições de estudo em estudo, de modo a
detectar possíveis setores de aquecimento lento. Recomenda-se o emprego de
um programa de computação para calcular a posição sem previsão dos sensores.
I-4.4.2.3 Critérios de aceitação dos estudos de penetração de calor.
a) Os sensores de temperatura devem ser calibrados antes e depois de cada
estudo e os resultados das calibrações não devem apresentar variações de
temperatura de +/- 0,5°C com respeito ao termômetro de referência.
b) Deve-se cumprir com os parâmetros de operação de ciclo de esterilização
de acordo com especificado no protocolo.
c) Devem funcionar corretamente pelo menos 9 (nove) sensores durante o
estudo.
d) Os recipientes com sensores de temperatura não devem apresentar
vazamentos durante o estudo.
e) Os dados coletados durante os estudos de penetração de calor devem ser
avaliados estatisticamente para determinar a variação esperada na letalidade
gerada por um determinado ciclo.
I-4.4.3 Cálculo de valor de F.
Existem várias fórmulas para o cálculo do valor F.
a) utilizando a fórmula:
F=t.L
Onde:t = intervalo de tempo entre as medidas de temperatura;
L = somatória das taxas de letalidade em cada intervalo;
Calcular as taxas de letalidade (L) a intervalos de tempo predeterminadas
para cada sensor. Para maior precisão se recomenda que as leituras de
temperatura sejam realizadas em intervalos de 1 (um) minuto.
L = 10T1 - T2/Z
Onde:
L = taxa de letalidade de cada intervalo de tempo;
T1= temperatura do sensor no instante T1.
T2= temperatura de referência = 121°C
Z = Constante igual a 10°C (valor de Z)
b) Todavia, uma forma mais prática de calcular o valor de F é através do uso
de uma Tabela de Taxas de Letalidade. Para cada leitura de temperatura de
sensor busca-se o valor correspondente de L na Tabela. O cálculo do valor de
F é realizado somando os valores de L encontrados na tabela, considerando
Taxa de Letalidade (L) para uma temperatura de referências de 121,11°C e um
valor de Z= 10°C.
L= minutos a 121,11°C por minuto a T°C.
Tempo º C 0 0.1 0.2 0.3
0.4 0.5 0.6 0.7 0.8
0.9
90 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001
0.001 0.001
91 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001
0.001 0.001
92 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001
0.001 0.002
93 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002
0.002 0.002
94 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002 0.002
0.002 0.002
95 0.002 0.003 0.003 0.003 0.003 0.003 0.003 0.003
0.003 0.003
96 0.003 0.003 0.003 0.003 0.003 0.003 0.004 0.004
0.004 0.004
97 0.004 0.004 0.004 0.004 0.004 0.004 0.005 0.005
0.005 0.005
98 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.006 0.006
0.006 0.006
99 0.006 0.006 0.006 0.007 0.007 0.007 0.007 0.007
0.007 0.008
100 0.008 0.008 0.008 0.008 0.008 0.009 0.009 0.009
0.009 0.010
101 0.010 0.010 0.010 0.010 0.010 0.011 0.011 0.011
0.011 0.012
102 0.012 0.013 0.013 0.013 0.013 0.014 0.014 0.014
0.014 0.015
103 0.015 0.016 0.016 0.017 0.017 0.017 0.017 0.016
0.016 0.019
104 0.019 0.020 0.020 0.021 0.021 0.022 0.022 0.023
0.023 0.024
105 0.024 0.025 0.026 0.026 0.027 0.027 0.028 0.029
0.029 0.030
106 0.031 0.032 0.032 0.033 0.035 0.035 0.035 0.038
0.037 0.038
107 0.039 0.040 0.041 0.042 0.043 0.044 0.045 0.046
0.047 0.048
108 0.049 0.050 0.051 0.052 0.054 0.055 0.056 0.057
0.050 0.060
109 0.062 0.063 0.064 0.066 0.067 0.069 0.071 0.072
0.074 0.076
110 0.077 0.079 0.081 0.083 0.085 0.087 0.089 0.091
0.093 0.095
111 0.097 0.100 0.102 0.104 0.107 0.109 0.112 0.115
0.117 0.120
112 0.123 0.126 0.128 0.131 0.135 0.138 0.141 0.144
0.148 0.151
113 0.154 0.158 0.162 0.168 0.169 0.173 0.177 0.182
0.186 0.190
114 0.194 0.199 0.204 0.208 0.213 0.218 0.223 0.228
0.234 0.239
115 0.245 0.251 0.256 0.0282 0.268 0.275 0.281 0.288
0.294 0.301
116 0.308 0.315 0.323 0.330 0.338 0.348 0.354 0.362
0.371 0.379
117 0.388 0.397 0.408 0.416 0.425 0.453 0.446 0.456
0.467 0.477
118 0.489 0.500 0.512 0.523 0.536 0.548 0.561 0.574
0.587 0.601
119 0.615 0.629 0.644 0.659 0.674 0.690 0.708 0.723
0.739 0.757
120 0.774 0.792 0.811 0.830 0.849 0.869 0.889 0.910
0.931 0.953
121 0.975 0.997 1.021 1.044 1.069 1.094 1.119 1.145
1.172 1.199
122 1.227 1.256 1.285 1.315 1.346 1.377 1.409 1.442
1.475 1.510
123 1.545 1.581 1.618 1.655 1.694 1.733 1.774 1.815
1.857 1.901
124 1.945 1.990 2.037 2.084 2.133 2.182 2.223 2.285
2.338 2.393
125 2.448 2.505 2.564 2.624 2.685 2.747 2.811 2.877
2.944 3.012
126 3.082 3.154 3.228 3.303 3.380 3.459 3.539 3.622
3.706 3.792
127 3.881 3.971 4.063 4.158 4.255 4.354 4.455 4.559
4.665 4.774
128 4.885 4.999 5.116 5.235 5.357 5.481 5.609 5.740
5.873 6.010
129 6.150 6.293 6.440 6.590 6.744 6.901 7.081 7.226
7.394 7.566
130 7.743 7.923 8.106 8.296 8.490 8.687 8.890 9.097
9.309 9.528
131 9.747 9.974 10.207 10.445 10.688 10.937 11.192 11.453
11.719 11.992
132 12.271 12.557 12.650 13.149 13.445 13.769 14.089 14.418
14.753 15.097
133 15.449 15.806 16.177 16.554 16.939 17.334 17.737 18.151
18.573 19.006
134 19.449 19.902 20.365 20.840 21.325 21.822 22.330 22.850
23.382 23.927
I-4.5 Biovalidação pelo método de probabilidade de sobrevida
I-4.5.1 Introdução
O método estabelece os parâmetros do ciclo com base no número de
microorganismos presentes no produto antes da esterilização (biocarga) e a
resistência térmica dos referidos microorganismos.
A combinação do número e da resistência térmica determinará a quantidade de
calor requerida para alcançar a probabilidade de sobrevida microbiana no
produto a um valor não superior a 10-6 microorganismos. Geralmente este
método se emprega na validação de ciclos de esterilização de produtos
termolábeis.
I-4.5.2 Os estudos microbiológicos para a biovalidação devem incluir:
a) Programa de monitoração microbiológica ambiental
b) Programa de monitoração de biocarga pré-esterilização e de determinação
da resistência térmica dos microorganismos.
c) Estudo de laboratório dos valores de D e Z dos bioindicadores.
d) Avaliação dos dados microbiológicos com o objetivo de assegurar que a
letalidade do processo responde às especificações projetadas para a
esterilização.
I-4.5.3 Metodologia
I-4.5.3.1 Preparação dos recipientes inoculados com bioindicador na carga de
esterilização.
a) Usar 10 (dez) recipientes cheio com solução recentemente preparada, e
inocular cada um deles com a suspensão de esporos na magnitude aproximada a
106 a 107.
Os microorganismos a serem utilizados como bioindicadores devem ser
selecionados a partir de biocarga de pré-esterilização com base em sua
resistência ao calor.
b) Os sensores de temperatura devem ser colocados nos recipientes inoculados
ou em posições adjacentes aos mesmos.
I-4.5.3.2 Preparação e contagem dos controles positivos
a) Preparar 2(dois) recipientes inoculados de modo similar ao indicado em
4.5.3.1 (a) para controle positivo.
b) Homogeneizar a solução dentro dos recipientes, agitando vigorosamente por
3(três) a 5(cinco) minutos.
c) Pipetar 1,0 ml de amostras e efetuar uma série de diluições 1:10 em
solução estéril de cloreto de sódio a 0,9% até obter uma concentração final
de aproximadamente 30-300 esporos por ml. Inocular as diluições em
triplicata, em placa de petri com meio de cultura e incubar por 24 (vinte e
quatro) horas -72 (setenta e duas) horas.
d) Efetuar a contagem de unidades formadoras de colonias (UFC).
NOTA: Os meios de cultura a serem utilizados e as condições do ensaio e
incubação dependerão do tipo de microorganismo utilizado como bioindicador.
I-4.5.3.3 Ensaios dos recipientes inoculados
a) Recolher os recipientes inoculados e esterilizados imediatamente depois
de completado o ciclo de esterilização;
b) Considerar os recipientes como amostras para ensaio de esterilidade,
efetuando o ensaio por método de filtração por membrana em um ambiente
adequado.
c) Incubar durante 7 (sete) dias a membrana em meio de cultura e condições
indicadas para os microorganismos utilizados como bioindicadores.
d) Efetuar a contagem de UFC ou utilizar o método de frações negativas a fim
de determinar o número de sobreviventes.
I-4.5.3.4. Avaliação dos resultados
Determinar a letalidade efetiva do ciclo de esterilização mediante a
seguinte equação:
Fzt = Dzt (log10A - log10B)
Onde:
Dzt = Valor determinado previamente por estudos do laboratório para o
bioindicador empregado.
A = número de esporos inoculados por recipiente.
B = número de microorganismos sobreviventes por recipiente.
Quando se utiliza o método de fração negativa.
B = 2.303 log 10 (n/q)
Onde:
n = número total de recipiente inoculados
q = número de recipientes inoculados negativos
I-4.6 Calibração dos indicadores biológicos para o método de sobremorte.
I-4.6.1 Introdução
Os indicadores biológicos são utilizados na validação para medir a
letalidade produzida pelo ciclo de esterilização de maneira a assegurar que
a probabilidade de sobrevida microbiana seja não superior a 1 x 10-6.
Os indicadores biológicos que são utilizados devem ser calibrados antes de
seu uso, sejam de origem comercial ou preparados em laboratório.
Quando a letalidade do ciclo seja suficiente para produzir 12 log de redução
em microorganismos que tenham um valor D de 1 (um) minuto, não será
necessário efetuar estudos rotineiros de biocarga nem de resistência térmica
em produtos isolados.
I-4.6.2 Microorganismos utilizados como indicadores biológicos.
Devido à sua elevada resistência a calor utilizam-se freqüentemente como
microorganismos de prova tanto em Clostridium sporogenes como em Bacillus
Stearothermophilus.
O número e resistência térmica da população de esporos são critérios
importantes na seleção de indicadores biológicos para o processo de
esterilização por vapor.
I-4.6.3 Tipos de suporte
O tipo de suporte é um fator importante na determinação dos valores D e Z
dos indicadores biológicos por poder afetar a resistência dos mesmos;
Freqüentemente são utilizados os seguintes tipos de suporte:
a) microorganismos suspensos em solução.
b) tiras de papel
c) material da mesma composição que a do produto a ser esterilizado.
Os valores de D e Z devem ser determinados utilizando o mesmo tipo de
suporte usado para controlar o ciclo da esterilização.
I-4.6.4 Determinação de valor D (redução decimal de indicador biológico)
I-4.6.4.1 Metodologia
a) Inocular amostras de SPGV, por duplicata, com uma suspensão que contenha
um número conhecido de esporos do indicador biológico selecionado.
b) Preparar controles positivos para determinar o número de esporos na
suspensão (ou tira, etc)a ser ensaiada. O número de esporos necessários
deverá basear-se no esquema de cada experiência, porém, geralmente a ordem é
de 104 a 107 esporos por amostras.
c) Expor pelo menos 5 (cinco) amostras a uma temperatura determinada por,
pelo menos 3 (três) intervalos de tempo diferentes, a fim de determinar o
número de sobreviventes (cálculo do valor D).
I-4.6.4.2 Cálculo
O valor D, ou tempo de redução decimal à determinada temperatura, é o tempo
necessário para inativar 90% da população microbiana do produto por método
de fração negativa, de acordo a descrição em 4.3.3.2 (a) e (b) desta norma.
I-4.6.5 Determinação do valor de Z. (número de grau de temperatura
necessários para obter a redução logarítmica do valor D).
Define-se o valor Z como o número de grau de temperatura necessários para
trocar o valor de D por um fator de 10. Pode-se determinar mediante o
estabelecido no ponto 4.3.4 desta norma.
I-4.6.6 Determinação do valor Fo
Recomenda-se o uso de Bacillus Stearothermophilus como indicador biológico
para ciclos de esterilização de produtos resistentes ao calor, devido à sua
elevada resistência térmica. O valor D destes indicadores biológicos deve
ser maior de 1 (um) minuto.
F0 =D121 (log10A -log10B)
Onde:
F0 = Tempo a 121°C necessário para reduzir em 90% a população de
microorganismos.
A = Concentração inicial de esporos por recipientes
B = Nível máximo aceitável para a probabilidade de sobrevida de 1 x 10-6.
I-4.7 Biovalidação por método de sobremorte ("Overkill")
I-4.7.1 Introdução
O método estabelece os parâmetros do ciclo com base na resistência térmica
dos indicadores biológicos utilizados no processo de validação e a
concentração de esporos presentes no suporte utilizado no ensaio.
Devido à sua elevada resistência térmica se utilizam freqüentemente como
indicadores biológicos o CI. Sporogenes e o B.stearothermophilus. Também se
podem utilizar outras espécies bacterianas formadoras de esporos, sempre que
sejam devidamente calibradas.
I-4.7.2 Os estudos microbiológicos para biovalidação devem incluir:
a) Suporte inoculado com um volume conhecido de uma suspensão calibrada de
esporos.
b) Controles positivos para verificar o conteúdo inicial.
c) Estudos microbiológicos a efetuar durante os ensaios de penetração de
calor em 10 (dez) pontos da autoclave, de maneira a assegurar que se achem
representados os pontos frios da autoclave.
d) Carga padrão idêntica à especificada para o uso rotineiro da produção.
I-4.7.3 Metodologia
I-4.7.3.1 Ensaio do produto com indicadores biológicos
a) inocular com o indicador biológico 10 (dez) recipientes que contenham o
produto.
b) Retirar os recipientes inoculados imediatamente depois de esterilizados.
c) Considerar os recipientes como amostras para ensaio de esterilidade e
realizar os ensaios em um ambiente adequado.
d) Inocular em um meio de cultura apropriado para o crescimento de
microorganismos (Trypticase Soy Broth) colocar à temperatura ideal para seu
crescimento e deixar por um período não inferior a 72 (setenta e duas)horas.
e) Registrar o número de indicadores biológicos com resultados positivos e
negativos enquanto ao desenvolvimento dos microorganismos.
I-4.7.3.2 Avaliação dos resultados
Calcular a letalidade efetiva do ciclo de esterilização mediante a equação.
Fzt = Dzt (log10A -log10B)
Onde:
Dzt = Valor previamente determinado por estudos de laboratório para o
indicador biológico utilizado
A = número de esporos inoculados por recipiente.
B = número de microorganismos sobreviventes por recipiente
Quando se utiliza o método de fração negativa deve-se usar a seguinte
equação:
B = 2.303 log10 (n/q)
Onde:
n = número total de recipientes inoculados.
q = número de recipiente inoculado negativos quanto ao crescimento de
microorganismos.
I-4.8 Critérios de aceitação da biovalidação
I-4.8.1 Considera-se aceitável o estudo de penetração de calor quando,
depois dos requisitos estabelecidos em I-4.4.2.3. Todas as unidades
inoculadas submetidas ao ensaio de esterilidade não mostraram crescimento de
microorganismos.
I-4.8.2 Se ocorrer a presença de um falso positivo pode-se aceitar a
biovalidação, caso seja demonstrado logo após ensaio microbiológico, que o
microorganismo positivo é diferente do utilizado como indicador biológico.
I-4.8.3 A contagem de microorganismos dos recipientes de controle deve ser
igual, ou maior de 4 x 105.
I-4.8.4 Pelo menos 9 (nove) unidades das inoculadas devem estar integras
(sem perda de solução)
4.9 Condições de carga da autoclave
Os estudos de qualificação devem utilizar a carga máxima da autoclave. Se os
resultados obtidos mostrarem variações significativas na distribuição de
calor, também deverão ser efetuados estudos com cargas intermediárias.
I-4.10 Modificações nos produtos e/ou seu recipiente
I-4.10.1 Será requerida uma nova validação se houver mudanças significativas
no recipiente.
I-4.10.2 Também se requer novos estudos de validação que confirmem a
eficácia do processo, em caso de haver troca na composição, viscosidade,
volume da solução ou da capacidade do recipiente que poderá afetar os
valores de transferência do calor.
I-4.11 Avaliação dos resultados
A documentação, incluindo protocolos, dados obtidos dos instrumentos,
procedimentos, validação e classificação, deve ser revisada pelo responsável
pela Garantia de Qualidade que aprovará, por meio de uma certificação formal
a validação do processo para esterilizar com segurança os produtos
especificados no protocolo. No caso em que os dados não sejam considerados
suficientemente confiáveis, deve-se solicitar novos estudos antes da
liberação do processo em etapa de validação.
I-5 Critérios para a revalidação
I-5.1 Deve-se planejar um estudo simples de qualificação periódica com o
objetivo de detectar mudanças inadvertidas. O período de tempo deve ser
determinado pelas características do processo de produção.
I-5.2 Nos intervalos de tempo que se especifiquem devem-se, requalificar
equipamentos e procedimentos, empregando métodos de engenharia ou
microbiológicos.
I-5.3 Depois de efetuar qualquer modificação no equipamento deve-se efetuar
um estudo simples de qualificação a fim de demonstrar que o processo de
esterilização não foi alterado.
I-5.3.1 A manutenção regular preventiva ou corretiva ou a reposição de
partes equivalentes não obrigam a novos estudos de revalidação.
I-5.3.2 Se a manutenção implicar em componentes eletrônicos ou de controle,
deverá ser efetuada uma revalidação, a menos que se possa demonstrar que não
se produzirão alterações significativas como resultado da manutenção.
I-5.4 Se não efetuar uma revalidação por alguma das razões expostas, deverá
ser realizada a mesma, com intervalos não superiores a um ano.
I-6 Recertificação
Deverá ser efetuada ao longo de cada estudo de revalidação, com o objetivo
de revisar, documentar e aprovar os estudos efetuados.
ANEXO J
TAMPAS DE ELASTÔMERO PARA SOLUÇÕES PARENTERAIS DE GRANDE VOLUME
J-1. OBJETIVO
J-2. CONDIÇÕES GERAIS
J-3. CONDIÇÕES ESPECÍFICAS
J-4. MÉTODOS DE ANÁLISES
J-5. ACEITAÇÃO E REJEIÇÃO
J-1. OBJETIVO
Este Regulamento fixa as condições exigíveis relativas aos aspectos físicos,
químicos e biológicos para elastômeros naturais ou sintéticos, utilizados
como tampas de recipientes contendo SPGV.
J-2. CONDIÇÕES GERAIS
Um tampão de elastômero natural ou sintético para recipientes com SPGV deve:
a) estar sujeito a exigências especiais, principalmente no que se refere aos
componentes solúveis, devido a seu contato com medicamentos das mais
diversas composições;
b) ser analisado pelo fabricante, quanto à possibilidade de desprender seus
componentes e a incompatibilidade com o produto;
c) ser usado uma única vez;
d) ter a garantia do fabricante de que todas as peças de uma entrega tenham
sido fabricadas com material da mesma formulação e que apresente as mesmas
propriedades. Cada lote deve ser examinado separadamente;
e) estar livre de matérias estranhas, pó, fibras, partículas de elastômero,
pigmentos e de qualquer substância que possa ceder, em particular,
substâncias tóxicas, pirogênicas, de ação bacteriostática ou bactericida e
hemolítica;
f) ser armazenado a temperatura entre 0ºC e 30ºC ao abrigo da luz e da
radiação ultravioleta;
g) ser lavado, antes do uso, de acordo com as instruções específicas
previstas pelo fabricante e que dependam do material com o qual foi
fabricado.
J-3. CONDIÇÕES ESPECÍFICAS
J-3.1 REQUISITOS FÍSICOS
J-3.1.1 Cor
A cor de cada lote de tampas de elastômero deve ser uniforme.
J-3.1.2 Dureza
A dureza "Shore", de acordo com o método descrito no item J-4.3.2 não deve
variar de ± 15% do padrão, dentro do período de aplicação, garantido pelo
fabricante e sem a influência de outras substâncias.
J-3.1.3 Fragmentação
Somente para tampas que possuam um lugar para ser perfurado com agulhas
hipodérmicas. Deve apresentar como máximo, uma média de 5 fragmentos por
tampa de elastômero, de acordo com o método descrito em 4.3.3.
NOTA - O aparecimento de fragmentos depende de numerosas particularidades,
inclusive o do modo de punção. Mesmo utilizando uma agulha hipodérmica nova,
com boa ponta e bem polida, podem-se produzir fragmentos.
J-3.1.4 Penetrabilidade
Somente para tampas que possuam um lugar para perfurar com agulha
hipodérmica. A força necessária para obter a penetração de uma agulha
hipodérmica em tampas de elastômero não deve ser superior a 1000g, de acordo
com o método descrito em J-4.3.4.
J-3.1.5 Compatibilidade com produtos injetáveis
Realizar o ensaio somente com cada produto novo segundo o indicado no
J-4.3.5.
J-3.1.6 Embalagem e identificação
As tampas devem ser embaladas, limpas, protegidas de pó e da luz,
identificadas com um rótulo que indique:
a) declaração do conteúdo;
b) data de fabricação;
c) número de lote;
d) identificação do fabricante.
J-3.2 Requisitos químicos
As tampas de elastômero utilizados no recipientes de SPGV devem cumprir as
exigências da Tabela I.
TABELA I
ANÁLISES ESPECIFICAÇÕES
Aspecto da solução extrativa Passa o ensaio
Metais pesados Máximo 2,0 ppm
Amônia Máximo 2,0 ppm
Cloretos Máximo 4,0 ppm
Sulfetos voláteis Máximo 0,154 mg Na2S / 20cm²
Zinco solúvel Máximo 5,0 ppm
Substâncias redutoras Máximo 1,5 ml de Na2S2O3 0,01N/ 10
ml.
Acidez ou alcalinidade Máximo 0,8 ml HCI 0,01N ou 0,3 ml
NaOH 0,01N / 20 ml
Resíduo seco Máximo 4 mg/100 ml de extrativo
Absorvância Máximo 0,2 entre 220 e 360 nm
J-3.3 Requisitos biológicos
a) Substâncias pirogênicas: as tampas de elastômeros não devem liberar às
soluções substâncias capazes de exercer efeitos pirogênicos.
Requisito para o ensaio de pirogênio: negativo
Limite para o ensaio de endotoxinas bacterianas: menor a 0,5 UE/ml
b) Toxicidade: as tampas de elastômeros não devem liberar as soluções
substâncias capazes de exercer efeitos tóxicos.
c) Ação bacteriostática ou bactericida: as tampas de elastômero não devem
ter ação bacteriostática ou bactericida.
J-4. MÉTODOS DE ANÁLISES
J-4.1 Periodicidade
Os ensaios devem ser realizados sobre cada lote, a menos que exista um
programa formal de certificação de fornecedor no qual a periodicidade está
definida.
J-4.2 Amostragem
As tampas de elastômero devem ser amostradas, lote a lote, segundo um método
estatístico Vn + 1, onde n é igual ao número de envasamentos e em quantidade
suficiente para, como mínimo, pode realizar duas repetições de ensaios
físicos, químicos e biológicos.
J-4.3 Ensaios físicos
As amostras destinadas a ensaios físicos devem ser lavadas duas vezes com
água deionizada, esterilizadas durante 30 minutos em vapor de água saturada
a pressão a 121ºC +/- 2ºC, colocados na estufa a 60ºC no máximo durante 60
minutos e guardados em frascos de vidro fechados até o início dos ensaios.
J-4.3.1 Cor
Examinar as amostras logo após esfriar, observando a presença de manchas ou
descoloração.
J-4.3.2 Dureza
Examinar a dureza do elastômero, realizando as leituras com um Durômetro em
partes planas, ou secções especiais da tampa. Em caso de ser necessário a
leitura, deve-se fazer sobre uma superfície plana com uma espessura de 6,25
mm obtida por superposição de uma quantidade suficiente de pedaços planos
cortados. O durômetro deve ser calibrado com freqüência com um bloco padrão
fornecido para cada instrumento.
J-4.3.3 Fragmentação
a) Encher até a metade com água livre de partículas, 20 frascos e tampa-los
de forma apropriada com tampas em ensaio.
b) Usando uma agulha hipodérmica 21G (0,813 mm x 38 mm) e de ponta normal,
perfurar 5 vezes na face da tampa, com uma velocidade de 20+/- 1 cm/min
assegurando que as 5 perfurações estão dentro de um círculo de 5 mm de
diâmetro e tão eqüidistantes umas das outras como seja possível.
c) Logo após a 5ª perfuração, sem retirar a agulha da tampa, conectar à
agulha uma seringa hipodérmica limpa, contendo cerca de 1 ml de água livre
de partículas e injetar a água no frasco.
d) Retirar a agulha e examinar cuidadosamente para verificar-se a ponta do
bisel ficou despontada. Se isto for evidente, descartar o frasco e seu
conteúdo, substituí-lo por um novo.
e) Repetir o ensaio sobre os outros frascos tampados, usando uma agulha nova
para cada tampa.
f) Filtrar a água de cada frasco, através de um filtro Buchner usando papel
de filtro de cor contrastante; (se a tampa do ensaio for branca, o papel de
filtro deverá ser tingido com uma cor contrastante, por exemplo com azul de
metileno.
g) Contar o número de fragmentos sem ajuda artificial (como por exemplo
lentes de aumento).
J-4.3.4 Penetrabilidade
Tampar 5 frascos com as tampas a serem ensaiados. Penetrar, em cada um deles
uma agulha hipodérmica 21G (0,813 mm x 38 mm) a uma velocidade de 20 +/-
1cm/min, usando um dispositivo para medir o esforço de penetração, com uma
precisão de +/-25g para uma leitura de 1000g.
Assegurar que a penetração da agulha esteja na posição perpendicular a
superfície da tampa. Registrar a força máxima para cada penetração.
J-4.3.5 Compatibilidade com produtos injetáveis (somente para produtos novos
ou formulações novas da tampa).
a) Para a preparação das amostras de ensaio, empregar como mínimo 32 e como
máximo 50 tampas preparadas de acordo com indicado em 4.3, para cada produto
injetável com o qual se pretenda ensaiar sua compatibilidade e usar frascos
do mesmo tipo em que normalmente se emprega com o produto.
b)Preparar o mesmo número de frascos controle com tampas lavadas,
autoclavadas e previamente aprovadas.
c) Encher os frascos com a solução com a qual vão ser usados, nas condições
normais de envasamento dos produtos.
d) Fechar os frascos adequadamente e examinar para verificar se apresentam
qualquer alteração (por exemplo cor, turbidez, etc).Se
o exame não for satisfatório, descartá-lo e preparar novas amostras.
e) Esterilizar os frascos nas condições recomendadas para o produto,
colocando a metade deles em posição invertida.
f) Manter os frascos com a metade em posição invertida, nas condições de
armazenamento indicados e inspecionar visualmente a cada um dos períodos
recomendados, na tabela seguinte, para observar a presença de qualquer
alteração visível.
Condições de Número de amostras Inspeção (*)
armazenamento ensaio e controle (meses)
4ºC (geladeira) 4 + 4 1, 3, 6, 9 e
12
25ºC 8 + 8 1, 3, 6, 9 e 12
38ºC 8 + 8 1, 3, 6, 9 e 12
38ºC/16 h e 4ºC/8 h 1, 3, 6, 9 e 12
alternadamente, a 90%
- 100% de UR 8 + 8 1, 3, 6, 9 e 12
50ºC ou outra
temperatura 4 + 4 1, 2 e 3
conveniente
(*) Inspeção nos intervalos logo após o início do ensaio.
Observações:
1. O armazenamento a 25ºC e 38ºC é de suma importância para avaliação da
compatibilidade das tampas com os produtos.
2. O armazenamento a 50ºC ou temperaturas mais altas tem importância só nos
casos em que a incompatibilidade só pode ser evidenciada a temperatura acima
de 38ºC e pode ser usado como um ensaio acelerado.
3. O armazenamento a 4ºC não é importante para a avaliação da
compatibilidade, mas é útil para avaliar se a aparência inicial sofre alguma
alteração por ação da temperatura.
4. O armazenamento com alto teor de umidade (90%-100% de HR) está
incluído pelo possível efeito adverso na penetrabilidade e fragmentação das
tampas em ensaio.
g) Avaliar a solução de produto ensaiado, para verificar se continua
cumprindo suas especificações (potência, toxicidade, conteúdo
bacteriostático, etc), ao mesmo nível que os frascos de controle.
h) Inspecionar as tampas observando descoloração, porosidade, inchaço ou
qualquer outra indicação de deterioração.
As tampas devem ser ensaiadas também quanto à penetrabilidade e
fragmentação.
Se as tampas se apresentaram descoloridas após o contato com o líquido devem
ser reensaiadas logo após uma noite de repouso para secagem.
A ocorrência de qualquer das anormalidades citadas deve ser considerada como
evidência de incompatibilidade entre a tampa e o produto.
J-4.3.6 Embalagem e identificação
A embalagem e identificação das tampas no momento de seu recebimento deve
cumprir com os requisitos indicados em J-3.1.6.
J-4.4 Ensaios químicos
Os ensaios químicos se farão de acordo com o estabelecido na edição vigente
da Farmacopéia Européia.
J-4.5 Ensaios biológicos
J-4.5.1 Substâncias pirogênicas
Utilizar a metodologia descrita no Anexo M "Ensaios biológicos", Ensaios de
pirogênio e Ensaio de endotoxinas bacterianas.
Pode-se realizar qualquer dos ensaios.
J-4.5.1.1 Preparação das amostras para o ensaio de pirogênio.
a) Usar uma quantidade de amostras correspondente a uma superfície total de
100 cm² +/-5 cm² para preparar 200 ml de solução extrativa.
b) Colocar as amostras em um frasco previamente lavado com água para
injetáveis, estéril e apirogênica. Adicionar 200 ml de solução fisiológica
de cloreto de sódio e tampar o frasco adequadamente.
Extrair durante 30 minutos a 121ºC +/- 2ºC.
c) Esfriar à temperatura ambiente e levar ao volume originalmente contido no
frasco, com água para injetáveis estéril e apirogênica.
J-4.5.2 Ensaios de toxicidade
As tampas de elastômero devem ser submetidas aos ensaios de reatividade
biológica, de acordo com o indicado no Anexo M Ensaios de reatividade
biológica.
J-4.5.2.1 Preparação de amostras para o ensaio de reatividade biológica "in
vitro".
a) Usar uma quantidade de amostra correspondente a uma superfície total de
100 cm²+/-5 cm² para preparar 200 ml de solução extrativa.
b) Colocar as amostras em um frasco e lavar duas vezes com água para
injetáveis estéril e apirogênica a 60ºC, deixando escorrer as águas de
lavagem. Adicionar 200 ml de solução fisiológica de cloreto de sódio. Tampar
os frascos com papel de alumínio e extrair durante 30 minutos a 121ºC+/-2ºC.
c) Esfriar a temperatura ambiente e levar ao volume originalmente contido no
frasco, com água para injetáveis estéril e apirogênica.
J-4.5.3 Ensaio para verificar a atividade bacteriostática ou bactericida.
J-4.5.3.1 Preparação da amostra
a) Usar uma quantidade de amostra correspondente a uma superfície total de
100 cm² +/- 5cm² para preparar 200 ml de solução extrativa.
b) Colocar as amostras previamente lavadas (duas vezes) com água para
injetáveis estéril e apirogênica a 60ºC em um frasco, previamente
esterilizado, com 200 ml de uma solução fisiológica de cloreto de sódio,
estéril e apirogênica. Rapidamente extrair, durante 30 minutos a 121ºC +/-
2ºC.
Observação: O líquido deve ser incolor e não deve apresentar turbidez.
J-4.5.3.2 Procedimento para o ensaio
a) Misturar 5 ml da amostra (solução de ensaio) com 5 ml de caldo de carne
(caldo nutriente) de concentração dupla em um tubo de ensaio previamente
esterilizado.
b) Preparar uma solução controle, misturando 5 ml de caldo de carne, com 5
ml de água para injetável estéril em um tubo de ensaio previamente
esterilizado.
c) Inocular ambos os tubos de ensaio com 0,2 ml de um cultivo de Micrococus
Pirogenes var: aureus de uma antigüidade de 16 horas, diluído em proporção
10: 10.000.
Incubar a 37ºC durante 72 horas.
d) Após incubação o conteúdo dos dois tubos de ensaio deve apresentar um
evidente crescimento das bactérias de ensaio.
e) Comprovar o crescimento de bactérias de ensaio mediante a realização de
um subcultivo em meio de cultura apropriado.
Interpretação: O crescimento de germes indica ausência de atividade
bacteriostática ou bactericida na amostra.
J-5 ACEITAÇÃO OU REJEIÇÃO
As tampas de elastômeros serão aceitas sempre que cumprirem as exigências
deste Regulamento, em caso contrário serão rejeitadas.
ANEXO L
ESTABILIDADE
L-1. OBJETIVO
L-2. DEFINIÇÕES
L-3. MÉTODOS
L-4. DETERMINAÇÃO DO PERÍODO DE VIDA ÚTIL POR MÉTODO DE ESTABILIDADE
ACELERADA.
L-5. CONSIDERAÇÕES GERAIS
L-1 OBJETIVO
Este Regulamento estabelece linhas gerais para os estudos de estabilidade e
critérios para a determinação do período de vida útil (data de vencimento)
das SPGV.
L-2 DEFINIÇÕES
Para fins deste Regulamento são adotadas as seguintes definições:
L-2.1 Estabilidade
É capacidade de um produto de manter suas característica originais conforme
as suas especificações de pureza, qualidade e potência.
O estudo da estabilidade se realiza em uma fase prévia da comercialização de
um produto novo, ou quando se efetuaram mudanças no processo de elaboração.
L-2.1.1 Características do produto
a) Características físicas: devem conservar as propriedades físicas tais
como: aspecto, limpidez, ausência de partículas estranhas, pH e
hermeticidade.
b) Características químicas: A degradação de seus princípio ativos não deve
superar a 10% e não deve apresentar substâncias estranhas na composição do
produto.
c) Características biológicas: o medicamento deve manter-se estéril, livre
de pirogênio e atóxico.
L-2.2 Período de vida útil
É o tempo (em dias, meses e ano) durante o qual um medicamento se mantém, na
totalidade de seu período de armazenamento e de uso, dentro dos limites
especificados e com as mesmas propriedades e característica que possui no
momento da fabricação.
L-3. Métodos
L-3.1 Estabilidade natural
Consiste em manter um produto a uma temperatura de 25ºC +/- 1ºC, em
condições de umidade e exposição a luz conhecidas, controlando as
características físicas, químicas e biológicas incialmente e a intervalos
regulares, durante um período de tempo determinado. Através deste estudo se
determinará o período de vida útil pressuposto, que estará limitado ao tempo
durante o qual se mantenham as características físicas, químicas e
biológicas do produto, encontrando-se a concentração dos princípios ativos
dentro das especificações da monografia.
L-3.2 Estabilidade acelerada
Utiliza-se este método para estimar o período de vida útil até quando se
completar os estudos de estabilidade natural.
Consiste em manter grupos de amostras de SPGV a temperaturas elevadas,
controlando as características físicas, químicas e biológicas inicialmente e
conforme a periodicidade que se sugere na seguinte tabela.
Temperatura ºC Período (dias)
40 30
60
90
50 10
20
30
60 3
7
10
L-4 Determinação do período de vida útil por método de estabilidade
acelerada.
O período de vida útil se estabelece inicialmente por meio dos resultados
obtidos no estudo de estabilidade acelerada, tendo-se em conta a velocidade
de reação (decomposição) e a ordem de reação.
L-4.1 Determinação da ordem de reação por método gráfico
Representar graficamente os valores experimentais obtidos das concentrações
em função do tempo requerido para alcançá-las.
Quando se obtém uma reta ao graficar concentrações versus tempo, a reação é
de ordem O. Se para obter uma reta é necessário representar o logaritmo da
concentração remanescente, em função ao tempo, a reação é de primeira ordem.
Se é necessário representar o inverso da concentração, em função do tempo,
para obter uma relação linear, a reação é de segunda ordem.
L-4.2 Determinação da velocidade de reação (decomposição)
A equação de Arrhenius mostra a influência da temperatura sobre a velocidade
de reação (decomposição).
log K = log A Ê . 1
------------- ---- .------
2.303.R T
Onde:
K : constante da velocidade de reação (decomposição)
A : Fator de freqüência
^E : energia de ativação
R : Constante dos gases perfeitos (1,987 cal. mol -1ºK-1)
T : Temperatura absoluta (ºK)
A constante dependerá da ordem de reação.
Para a reação de ordem zero a constante é = log A+0,30103-log Co
Para a reação de primeira ordem a constante é = log A-log 0,693
Para a reação de segunda ordem a constante é = log a + log A
Onde : Co = a metade da concentração inicial
a = concentração inicial
Cálculo de K pelo método gráfico.
Constituir um gráfico representando na ordenada, os valores de log K e em
abscissa 1/T.10 3 obtendo-se por simples extrapolação o valor de log K a
25ºC.
4.3 Cálculo para determinação de período de vida útil
tm = Xo - X
----------------
K
Onde:
Xo - concentração inicial de produto
X - concentração final aceitável (90%)
K - Constante de velocidade de reação (decomposição) a 25ºC +/- 1ºC.
Considerando uma reação de primeira ordem.
tm = 2,303 . log Xo
--------- ----
K X
Considerando uma reação de segunda ordem;
tm = Xo - X
-----------
Xo. X. K
Com a aplicação de uma das fórmulas acima citadas, obtém-se o período de
vida útil expresso em dias.
L-5 CONSIDERAÇÕES GERAIS
1. Os métodos de doseamento devem ser suficiente específicos e sensíveis
como para obter detectar uma eventual degradação dos princípios ativos.
2. Deverá ser utilizado um número adequado de lotes e amostras para permitir
a obtenção de dados estatisticamente válidos.
3. Deverá se verificar que ao longo do período de vida útil proposto não
aparecem substâncias originadas no envasamento em quantidade tais que afetem
as características físicas, químicas e biológicas do produto.
4. Deve-se ter em conta que os métodos de cálculo para determinar o período
de vida útil só consideram as características químicas do princípio ativo.
ANEXO M
ENSAIOS BIOLÓGICOS
M-1. OBJETIVO
M-2. ENSAIO DE PIROGÊNIOS
M-3. ENSAIO DE ENDOTOXINA BACTERIANA
M-4. ENSAIO DE ESTERILIDADE
M-5. ENSAIOS DE REATIVIDADE BIOLÓGICA
M-5.1 - "IN VITRO"
M-5.2 - "IN VIVO"
M-6. ENSAIO DE CONTAMINAÇÃO MICROBIANA
M-1 OBJETIVO
Este Regulamento estabelece os procedimentos para a realização dos ensaios
biológicos aplicados ao controle das SPGV.
M-2 Ensaio de Pirogênios
M-2.1 Condições gerais.
O ensaio de pirogênios se fundamenta na medida da variação da temperatura
corporal dos coelhos que são inoculados, por via endovenosa, com uma solução
estéril da substância em análise.
Para os produtos que requerem uma preparação preliminar, ou que necessitem
de condições especiais de administração, seguir as recomendações das
monografias específicas.
M-2.2 Materiais e diluentes.
Utilizar seringas, agulhas e material de vidro apirogênico (tratados a 250ºC
por um tempo mínimo de 30 minutos ou a 200ºC, durante um mínimo de uma
hora).
Preparar todos os diluentes e soluções de lavagem de materiais com água
estéril e apirogênica.
M-2.3 Controle, seleção e preparação dos animais
a) Organizar uma ficha própria para cada animal, registrando;
Idade;
Sexo;
Peso encontrado semanalmente, e no dia anterior de sua utilização para
ensaio;
Data em que o animal foi submetido ao último ensaio, e resultado do mesmo.
b) Utilizar animais com um peso corporal não inferior a 1,5kg,com veias
auriculares boas e pouco ramificadas, alimentados com ração isenta de
antibióticos e que não perderam peso durante a semana. Os animais que nunca
tenham sido utilizados para esta prova deverão submeter-se a um período de
adaptação e prévio controle. Para isto deverão ser colocados por duas horas
diárias na caixa de contenção durante uma semana. Durante a semana seguinte
se registrará sua temperatura aos 60 e 120 minutos, após terem sido
colocados na caixa de contenção. Finalmente se realizará uma prova com
Solução Fisiológica apirogênica, não devendo observar-se aumentos de
temperatura superiores a 0,6ºC.
c) Não utilizar animais para ensaio de pirogênios com um intervalo menor do
que 3 (três) dias. No caso de haver apresentado uma reação pirogênica, não
voltar a utilizá-lo no mínimo com 14 (quatorze) dias.
d) Os coelhos destinados ao ensaio de pirogênios que não tiverem perdido
peso na semana, são agrupados em grupos de 3 (três), preferencialmente do
mesmo sexo e acomodados em boxes apropriados .Estes serão instalados em um
ambiente livre de perturbações de qualquer espécie que possam excitá-los e a
uma temperatura que não apresente diferenças de +/-2ºC com relação a
temperatura ambiente onde se encontram alojados os animais (20-23ºC).Deve
ser suspensa sua alimentação 12 horas antes do início do ensaio, podendo,
entretanto, ter acesso a água.
e) Registro da temperatura: Utilizar termômetro clínico, ou qualquer outro
sensor de temperatura, calibrado, para assegurar uma precisão de +/-0,1ºC e
que tenha sido provado para determinar que a leitura máxima se alcança em
menos de 5 minutos. O sensor de temperatura deverá ser introduzido no reto
do animal em teste, até uma profundidade não menos de 7,5 cm. Se o sensor de
temperatura deve permanecer no reto durante todo o período de registro,
deve-se imobilizar o coelho mediante uma caixa de contenção folgada, que lhe
permita adotar uma postura natural. Quando se emprega um termômetro clínico,
deixar transcorrer o tempo necessário (previamente determinado) para que
alcance a temperatura máxima, antes de proceder a leitura.
f) Os animais selecionados para o ensaio devem apresentar uma temperatura
corporal não superior a 39,8ºC, podendo-se tornar 2 (duas) medidas de
temperatura 30 e 60 minutos antes da realização do ensaio, para verificar a
constância da temperatura.
f) Os animais selecionados para o ensaio devem apresentar uma temperatura
corporal não superior a 39,8ºC, podendo-se tomar 2 (duas) medidas de
temperatura 30 e 60 minutos antes da realização do ensaio, para verificar a
constância de temperatura.
g) Os animais de um mesmo grupo de ensaio não devem apresentar uma variação
de temperatura maior que 1ºC um do outro.
h) Os animais que apresentarem variações de temperatura de +/- 0,2ºC, não
devem ser usados no ensaio para pirogênio.
i) A média das temperaturas registradas é considerada a temperatura de
controle.
M-2.4 Amostragem e preparação da amostra para o ensaio
Proceder conforme o indicado nas monografias e nos Regulamentos específicos
para Soluções Parenterais de Grande Volume.
M-2.5 Procedimento para ensaio
a) Em condições assépticas, transferir a solução em ensaio a seringas e
mantê-las em estufa a 37ºC até a hora do ensaio.
b) Para fazer ressaltar melhor as veias auriculares e ao mesmo tempo
promover sua assepsia, friccioná-las com um algodão embebido em solução
alcoólica.
c) Ajustar o volume a ser injetado de acordo com o peso do animal (10 ml de
solução em teste por kg de peso corporal).
d) Injetar a solução em teste pela veia marginal de uma das orelhas dos
coelhos, com um fluxo de 3 ml por minuto.
e) Ao finalizar a injeção, retirar a seringa e comprimir o lugar da injeção
com um algodão seco, para estancar o sangue e evitar a formação de um
hematoma.
f) Registrar a temperatura a 1(uma) 2 (duas) e 3 (três) horas posteriores a
injeção. Um decréscimo de temperatura deverá ser registrado como zero.
M-2.6 Interpretação do ensaio
a) A temperatura máxima para cada coelho é considerada como sua resposta.
Quando as temperaturas medidas logo após a injeção forem inferiores a
temperatura de controle, a resposta eqüivale a uma elevação de temperatura
zero.
b) Se nenhum dos 3 (três) coelhos apresentarem elevações de temperatura de
0,5ºC ou mais, sobre suas respectivas temperaturas de controle, o material
de ensaio cumpre os requisitos com relação a ausência de pirogênios.
c) Se algum coelho apresentar um aumento de temperatura de 0,5ºC ou mais, o
ensaio deverá ser repetido usando 5 (cinco) diferentes animais.
d) Se não mais de 3 (três) dos 8 (oito) coelhos apresentar elevações de
temperatura de 0,5ºC ou mais, e se a soma das elevações das temperaturas dos
8 (oito) animais não exceder aos 3,3ºC, o material em ensaio cumpre os
requisitos com relação a ausência de pirogênios.
M-3 ENSAIO DE ENDOTOXINAS BACTERIANAS
M-3.1 Objetivo
O seguinte ensaio se estabelece para estimar a concentração das endotoxinas
bacterianas que podem estar presentes na amostra do produto a analisar.
M-3.2 Generalidades
Utiliza-se para isto o reativo Lisado de Amebocitos de Limulus (LAL) que
tenha sido obtido do lisado de extratos aquosos dos amebócitos circulantes
no caranguejo ferradura "Limulus polyphemus", preparado e caracterizado para
ser usado como reativo do LAL por formação de um gel.
A determinação do ponto final da reação se faz com diluições a partir do
material de ensaio em comparação direta com diluições paralelas de uma
endotoxina de referência, e as quantidades de endotoxina se expressam em
Unidades de Endotoxina.
Alternativamente pode se empregar outros métodos. Os mais conhecidos são:
turbidimetricos e colorimétricos (incluindo determinações cinéticas). Estes
ensaios requerem o estabelecimento de uma curva de regressão padrão e o
conteúdo de endotoxina do material em ensaio determinam-se por interpolação
da mesma.
Os procedimentos incluem a incubação durante um tempo de reação pré
selecionada da endotoxina, e as soluções de controle com reativo LAL e a
leitura da absorbância espectrofotométrica da luz a uma longitude de onda
adequada.
No caso do procedimento turbidimétrico, a leitura se faz imediatamente no
final do período de incubação ou na determinação cinética (turbidimétrico e
colorimetrico).
A absorbância se mede durante todo o período de reação e os valores de
velocidade se determinam a partir destas leituras.
No procedimento colorimétrico de ponto final, a reação cessa no final do
tempo pré-selecionado, por adição, antes da leitura, de uma quantidade
apropriada de agente que detenha a reação enzimática.
M-3.3 Padrões de referência.
M-3.3.1 Endotoxina padrão de referência (RSE)
A endotoxina padrão de referência (RSE) é a endotoxina que tem uma potência
definida em Unidades de Endotoxina (EU) por frasco, e que será reconstituída
de acordo com as instruções do rótulo. Emprega-se este concentrado para
efetuar as diluições seriadas adequadas. Conserva-se em geladeira por não
mais de 14 dias. Leva-se a temperatura ambiente, se necessário, e se agita
em Vortex até 5 minutos antes de usar. Agita-se cada diluição no Vortex
durante não menos de 1 (um) minuto antes de efetuar a diluição seguinte. Não
se deve armazenar as diluições.
M-3.3.2 Endotoxina padrão de controle (CSE)
Uma endotoxina padrão de controle (CSE) é uma preparação de endotoxina
distinta da RSE que tenha sido padronizada contra a RSE. Se uma CSE é uma
preparação ainda não caracterizada adequadamente, sua avaliação deve incluir
parâmetros, que a caracterizem tanto por qualidade de endotoxina e
comportamento (tal como reação em coelho), quando por adequabilidade do
material para servir como uma referência (tal como uniformidade e
estabilidade).
Deve-se incluir procedimentos detalhados para suas pesagens e/ou
reconstituição e uso, para assegurar uniformidade no comportamento.
A padronização de uma CSE contra a RSE usando um reativo LAL e o
procedimento de coagulação em tubo se podem efetuar ensaiando um mínimo de
01 frasco da CSE e um frasco da RSE como se assinala no "Procedimento para o
ensaio", mas usando os tubos em quadruplicata em cada nível da série de
diluições para a RSE e quadruplicadas similarmente para cada frasco.
O antilogaritimo da diferença entre a media do log 10 do ponto final da RSE
é a média do log 10 do ponto final da CSE é a potência padronizada da CSE
que, então se deve converter e expressar em Unidades/nanograma sob condições
de secagem estabelecidas para a CSE, ou em unidades por frasco, o que seja
mais apropriado. Padroniza-se cada lote novo de CSE antes de seu uso no
ensaio.
A calibração de uma CSE em termo da RSE realiza-se com o lote específico de
Reativo LAL e o procedimento de ensaio com o qual se vai trabalhar.
Uma CSE adequada tem uma potência de não menos de 2 Unidades de Endotoxina
por nanograma e não mais de 50 Unidades de Endotoxina quando se encontra a
granel, sob condições uniformes de secagem estabelecidas.
M-3.4 Ensaios preparatórios
Confirmar a sensibilidade rotulada do reativo LAL, a utilizar.
Tratar os recipientes e utensílios a empregar de modo a destruir endotoxinas
superficiais estranhas, que podem estar presentes, por exemplo,
esquentando-os em estufa a 250ºC durante 30 minutos ou 180ºC durante 3
horas. A validação dos resultados dos ensaios para endotoxinas bacterianas
requer uma demonstração adequada de que as amostras do produto ou de
soluções, lavados ou extratos destratos deste aos quais se vai aplicar o
ensaio, não inibam ou intensifiquem a reação ou interfiram de qualquer outra
maneira no ensaio. A validação se realiza pelo ensaio de inibição ou
intensificação, incluindo controles negativos apropriados. Deve-se repetir a
validação se mudar a fonte do reativo LAL ou o método de fabricação ou da
formulação do produto.
M-3.4.1 Ensaio de Sensibilidade.
Deve-se confirmar a sensibilidade do reativo LAL usando 1 frasco por lote e
1 frasco de endotoxina. Preparar uma série de diluições de Endotoxina (RSE
ou CSE) com concentrações de 0,25 ; 0,5 ; 1 ; 2 em quadruplicado onde é a
sensibilidade rotulada no Reativo LAL em EU/ml. Incluir os controles
negativos. A média geométrica das concentrações no ponto final (ver "Calculo
e Interpretação") deve ser maior ou igual a 0,5 lâmbda e menor ou igual a 2
lâmbda.
M-3.4 Ensaio de Inibição ou intensificação
Realiza-se o ensaio sobre aliquotas da amostra ou sobre uma diluição que não
exceda a Máxima Diluição Válida, nas quais não exista endotoxina detectável.
Realiza-se o ensaio, sobre a amostra sem adição de endotoxina, e com adição
de endotoxina para dar concentrações finais de 2,0 , 1,0 , 0,5 , 0,25 , como
se indica abaixo no "Procedimento para Ensaio", mas usando não menos de
quatro réplicas por amostra sem adição e com adição de endotoxina.
Em paralelo ensaia-se por duplicado, as mesmas concentrações de endotoxina,
em água e também controles negativos não tratados. Calcula-se a média
geométrica do ponto final da concentração da endotoxina para a amostra como
se descreve em "Cálculo e Interpretação". O ensaio é válido para o produto
se a média geométrica do ponto final da concentração na amostra é maior ou
igual a 0,5 e menor ou igual a 2,0 .
Se o resultado obtido para as amostras as quais se haja agregado endotoxina,
está fora do limite especificado, o produto é inadequado para ensaios de
endotoxinas bacterianas. Em caso de injeções ou soluções para administração
parenteral, podem-se adequar diluindo-as adequadamente.
Repete-se o ensaio para inibição ou intensificação usando as amostras
diluídas por um fator que não exceda a máxima diluição válida.
Para subsequentes determinações de endotoxinas nas amostras de ensaio de
emprega a diluição que não exceda a máxima diluição válida e seja suficiente
para superar a inibição ou intensificação. Se, sob as condições do ensaio de
inibição ou intensificação são detectáveis endotoxinas endógenas nas
amostras não tratadas, as mesmas podem, adequar-se, removendo a endotoxina
presente por ultrafiltração ou por uma diluição apropriada.
Dilui-se a amostra não tratada (como se indica, quando seja factível, para
sua administração ou uso), a um nível que não exceda a máxima diluição
válida na qual nenhuma endotoxina é detectável.
Repete-se o ensaio de inibição ou intensificação usando a amostra nestas
diluições.
M-3.4.3 Máxima Diluição Válida (MVD)
A máxima diluição válida é apropriada.
a) para injetáveis
b) para soluções para administração parenteral na forma reconstituída ou
diluída para administração.
c) quando seja aplicável, a quantidade de drogas por peso, se o volume do
produto puder variar em função da sua dose.
Quando se especifica a concentração limite de endotoxina na monografia
individual em termos de volume (em EU/ml) divide-se o limite por lâmbda que
é a sensibilidade indicada na etiqueta (em EU/ml) do lisado empregado no
ensaio, para obter o fator MVD.
Quando a concentração limite de endotoxina é especificada em termos de massa
das unidades de droga ativa (em EU/mg) ou em EU/unidade) multiplica-se o
limite pela concentração (em mg/ml ou u/ml) da droga na solução ensaiada, ou
da droga reconstituída de acordo com as instruções que aparecem no rótulo e
se divide o produto da multiplicação por lâmbda, para obter o fator MVD. O
fator MVD assim obtido é o fator de diluição limite para a preparação para
que o ensaio seja válido.
M-3.5 Procedimento para o ensaio.
Ao preparar e realizar o ensaio, deve-se tomar precauções ao manipular as
amostras para evitar uma contaminação bacteriana grosseira.
Para validar o ensaio para um produto, ou determinações de limite de
endotoxina, ou para propósitos especiais onde se especifique, o ensaio das
amostras realiza-se quantitativamente para determinar pontos finais de
resposta por leitura de gel coagulado. Fazem-se diversas diluições da
amostra e da endotoxina padrão, selecionam-se as diluições de modo que
correspondam a uma série geométrica na qual cada uma delas seja maior que a
mais próxima inferior em uma relação constante. A menos que se tenham dados
que o permita, não armazenar endotoxinas diluídas porque perdem atividade
por absorção. No ensaio deve incorporar-se controles negativos e positivos.
Para cada nível da série de diluições da amostra em ensaio deve operar-se
pelo menos por duplicado. Seja que o ensaio se empregue como um ensaio
limite ou com uma determinação quantitativa deve-se realizar em paralelo uma
série duplicada de tubos de reação de diluição de endotoxina padrão. Cada
grupo de tubos de reação deve incluir uma série de diluição de endotoxina
padrão, e que deverá ser incubada simultaneamente nas mesmas condições
ambientais.
M-3.5.1 Preparação
Posto que a forma a quantidade por frasco da endotoxina padrão e o reativo
LAL pode variar, a reconstituição e/ou diluição do conteúdo deverá
efetuar-se como indicado no rótulo.
O pH da mistura da amostra e do reativo LAL deverá estar entre 6,0 a 7,5 a
menos que se indique outra coisa.
Pode-se ajustar o pH por adição de hidroxido de sódio ou ácido clorídrico,
ou reguladores adequados, livres de endotoxina.
M-3.5.2 Procedimento
A tubos de ensaio de 10 mm x 75 mm se adicionam alíquotas do reativo LAL
reconstituído apropriadamente e os volumes especificados da amostra, padrão
de endotoxina, controles negativos e um controle positivo do produto que
consiste no produto, ou soluções ou lavados ou extratos destes aos quais a
RSE (ou uma CSE padronizada) tenha sido adicionada a uma concentração de
endotoxina de 2 para aquele reativo LAL. Ver ensaio de confirmação da
sensibilidade do reativo LAL.
Agita-se cada um suavemente para misturar e se coloca em um dispositivo para
incubar, tal como um banho-maria ou block calefador, registrando exatamente
a hora. Incuba-se cada tubo, sem agitá-lo por 60 minutos +/-2 minutos a
37+ºC +/- 1ºC e se retira cuidadosamente para sua observação.
A reação positiva é caracterizada pela formação de um gel firme que se
mantém quando se inverte o tubo a 180º. Registra-se tal resultado como
positivo (+).
Um resultado negativo é caracterizado pela ausência de tal gel ou por
formação de um gel viscoso que não mantém sua integridade. Registra-se tal
resultado como negativo (-).
Manipulam-se os tubos com cuidado e evita-se submetê-los a vibrações
indesejadas, porque podem resultar falsos negativos.
O ensaio não e válido se o controle positivo do produto der negativo, ou o
padrão de endotoxina não mostrar que a concentração do ponto final está
dentro de +/- uma diluição ao meio a partir da sensibilidade indicada em
etiqueta do reativo LAL, ou se algum controle negativo dá positivo.
M-3.6 Cálculo e interpretação.
3.6.1 Cálculo da média geométrica.
O ponto final é a última diluição positiva em uma série de concentrações
decrescentes de endotoxinas, amostra ou amostra que tenha adicionado com
endotoxina. Registrar a concentração (E) em cada ponto final, para cada
série replicada de diluições.
Determinar o logaritmo de cada concentração ponto final (e) e calcular a
média geométrica das concentrações ponto final usando a seguinte fórmula:
Média geométrica das concentrações ponto final = anti log ( e/f)
Onde e é a soma dos logaritmos da série de diluição da amostra ponto final e
f é o número de replicas por cada uma.
M-3.6.2 Cálculo do conteúdo de endotoxina
Calcular a concentração de endotoxina (em unidades por ml, ou em unidades
por g ou por mg) no produto que se ensaia, pela fórmula.
£
----
U
£= sensibilidade impressa em rótulo de lisado utilizado em ensaio expresso
em EU/ml.
U= antilog ( e/f)
e= o log10 dos fatores de diluições do ponto final, expressos em frações
decimal.
f= o número de réplicas de tubos de reação lido no ponto final da amostra
ensaiada.
M-3.6.3 Interpretação
O produto cumpre os requisitos de ensaio quando a concentração de endotoxina
não é maior que a especificada na monografia individual.
M-4 Ensaio de esterilidade
M-4.1 Condições gerais
Os seguintes procedimentos são aplicáveis para determinar se uma Solução
Parenteral de Grande Volume estéril cumpre os requisitos estabelecidos na
monografia individual com respeito ao ensaio de esterilidade.
Para o uso dos procedimentos do ensaio de esterilidade como parte do
Controle de Qualidade no processo de fabricação, ver F.3.1.9 Esterilização e
Segurança de Esterilidade.
Considerando a possibilidade de que os resultados positivos possam ser
devido a técnicas assépticas defeituosas ou a contaminação ambiental no
ensaio, incluem-se algumas medidas em Interpretação dos Resultados dos
Ensaios de Esterilidade para um ensaio de duas etapas.
Podem-se empregar procedimentos alternativos para demonstrar que uma Solução
Parenteral de Grande Volume é estéril, assegurando que os resultados obtidos
são ao menos de confiabilidade equivalente.
No caso de uma controvérsia quando se obtenha evidência de contaminação
microbiana pelo procedimento dado nesta Norma, o resultado obtido é
conclusivo de que o produto não cumpre com os requisitos do ensaio.
Em forma similar, em caso de não evidenciar contaminação microbiana pelo
procedimento dado nesta Norma, o produto cumpre com os requisitos do ensaio.
Para informação adicional, ver F-3.1.9 Esterilização e Segurança de
Esterilidade.
M-4.2 Meios de Cultura
Os meios para os ensaios podem ser preparados como se descreve mais adiante,
ou utilizar misturas desidratadas que dão formulações similares que podem
ser usadas considerando que, quando de reconstituem como indica o fabricante
ou distribuidor, tem propriedades de promoção do crescimento iguais ou
superiores aos obtidos das fórmulas citadas nesta Norma.
I. MEIO FLUIDO DE TIOGLICOLATO
L- Cistina.............................................
0,5 g
Cloreto de Sódio.......................................
2,5 g
Dextrose monohidratada.................................
5,5 g
Agar, granulado (o conteúdo de umidade não excede 15%)... 0,75 g
Extrato de Levedura (solúvel em água)................... 5,0
g
Digesto Pancreático de Caseína.........................
15,0 g
Tioglicolato de Sódio..................................
0,5 g
ou Acido Tioglicólico..................................
0,3 ml
Solução de Resazurina Sódica (1 em 1000),
recentemente preparada.................................
1,0 ml
Água...................................................
1000 ml
pH depois da esterilização: 7,1 +/-0,2
Misturar e aquecer até dissolução. Ajustar a solução com hidróxido de Sódio
1N de forma que, após a esterilização, tenha um pH 7,1 +/-0,2. Filtrar
enquanto quente por um papel de filtro de necessário.
Colocar o meio em recipientes adequados, que ofereça uma relação
superfície-profundidade de forma que não mais que a metade superior do meio
sofra uma troca de cor indicativa da captação de oxigênio ao final do
período de incubação. Esterilizar em autoclave. Se mais do que um terço
superior adquire uma cor rosa, pode-se recuperar o meio uma vez por
aquecimento em um banho de vapor ou com vapor fluente até que desapareça a
cor rosa. Quando estiver preparado para uso, não mais do que o décimo
superior do meio deve ter uma cor rosa.
Usar Meio Fluido de Tioglicolato, incubando-o em condições aeróbicas.
II. MEIO DE SEMENTE DE SOJA - CASEÍNA
Digesto pancreático de Caseína.................................. 17,0 g
Digesto papaico de farinha de semente de soja........... 3,0 g
Fosfato de potássio dibásico........................................2,5 g
Dextrose monohidratada.............................................. 2,5 g
Água
.........................................................................
1000 ml
pH depois da esterilização: 7,3 +/-o,2.
Dissolver os sólidos em água, aquecer ligeiramente até dissolução. Esfriar a
solução a temperatura ambiente e ajustar com hidróxido de sódio 1N, se
necessário para obter um pH de 7,3 +/-0,2 depois da esterilização.
Filtrar se necessário, e colocá-lo em recipientes adequados. Esterilizar por
vapor.
Usar Meio de Digesto de semente de Soja-Caseína incubando-o sob condições
aeróbicas.
M-4.3 Ensaio de promoção de crescimento
Confirmar a esterilidade de cada lote de meio por incubação de recipientes
representativos, a temperatura e tempo especificados no ensaio.
Analisar cada carga autoclavada de cada lote de meio sobre suas propriedades
de promoção de crescimento inoculando separadamente recipientes de ensaios
de cada meio por duplicata com 10 a 100 microorganismos viáveis de cada uma
das cepas que figuram na Tabela adjunta, e incubando de acordo com as
condições especificadas. Os meios de ensaio são satisfatórios se aparecem
uma clara evidência de crescimento em todos os recipientes com meios
inoculados dentro dos 7 dias. Os ensaios podem ser realizados
simultaneamente com o uso dos meios de ensaio para análise de esterilidade.
A prova de esterilidade é considerada não valida se o meio de ensaio mostra
resposta de crescimento inadequado.
Se um meio recentemente preparado não for usado dentro de 2 (dois) dias,
conservá-lo no escuro, preferencialmente entre 2° e 25°.
Os meios terminados, caso se conservem em recipientes não herméticos podem
ser usados não mais de um mês, assegurando que são analisados dentro da
semana de uso e cumprem os requerimentos de cor do indicador. Se for
conservado em recipientes fechados adequadamente, os meios podem ser usados
até um ano, assegurando que se realiza uma análise de promoção de
crescimento cada três meses e que cumpre os requisitos de cor do indicador.
Meio Microorganismos de ensaio* Incubação
T(°C)
Tioglicolato fluido (1)Bacillus subtilis 30 a 35
(ATCC Nr.6633)+
(2)Candida albicans 30 a 35A+
(ATCC Nr.10231)
(3)Bacteroides Vulgatus 30 a
35
(ATCC Nr.8482)++
Digesto de semente de (1)Bacillus subtilis 20 a 25
soja caseína. (ATCC Nr.6633)+
(2) Candida albicans 20 a
25A+
(ATCC Nr.10231)
T (°C): Temperatura (°C)
* De American Type Culture Colletion, 12301 Parklawn Drive, Rockville, MD
20852.
Nota: Deve-se empregar as técnicas de manutenção dos lotes de cultura de
forma que os microorganismos viáveis usados para a inoculação não tenham
mais de cinco repiques das culturas ATCC.
Nota: Deve-se empregar as técnicas de manutenção dos lotes de cultura de
forma que os microorganismos viáveis usados para a inoculação não tenham
mais de cinco repiques das culturas ATCC.
+ Se não se deseja um organismo formador de esporos, usar Micrococcus Luteus
(ATCC nr. 9341) às temperaturas de incubação indicadas na Tabela.
++ Se deseja um organismo formador de esporos, usar Clostridium sporogenes
(ATCC nr.11437) na temperatura de incubação indicada na Tabela.
M-4.4 Procedimento para o ensaio.
Utiliza-se a técnica de filtração por membrana, empregando a quantidade de
unidades, volume de solução e meio de cultura, indicados na tabela.
-----------------------------------------------------------------
Tabela de Quantidade
-----------------------------------------------------------------
Conteúdo A VM
Nr.de Recipientes/meio
(ml)
-----------------------------------------------------------------
100 a 500 Conteúdo total 100 10
-----------------------------------------------------------------
Mais de 500 500 ml 100 10
-----------------------------------------------------------------
VM: Volume mínimo de cada meio.
A: Volume mínimo tomado de cada recipiente para cada meio.
M-4.4.1 Equipamentos
Uma unidade de filtração por membrana adequada consiste em um equipamento
que facilita a manipulação asséptica dos produtos a analisar e que permite
retirar a membrana processada assépticamente para a inoculação em meio
adequado ou um equipamento onde possam ser agregados meios estéreis ao
filtro fechado e incubar a membrana em "in situ".
Uma membrana geralmente aceitável para a prova de esterilidade tem uma
porosidade nominal de 0,45 +/-0,02 u, um diâmetro de aproximadamente 47 mm e
uma velocidade de fluxo de 55 a 75 ml de água por minuto a uma pressão de 70
cm de mercúrio.
A unidade completa pode armar-se e esterilizar-se com as membranas em seu
lugar antes de usar-se em ensaio, ou as membranas podem ser esterilizadas
separadamente por qualquer modo que mantenha as características do
comportamento do filtro e assegurar a esterilidade do filtro e equipamento.
M-4.4.2 Procedimento
Transferir assépticamente os volumes requeridos para ambos os meios, como
indicado na tabela de quantidade, seja diretamente em um ou dois
equipamentos de filtração, por membrana separados, ou em um recipiente
estéril para fazer um pool antes de transferir. Se o volume de líquido é de
100 ml até 500 ml,
transferir assépticamente conteúdo completo não menos de 10 recipientes
através de cada um dos equipamentos de filtros, ou não menos de 10
recipientes quando se usa somente um equipamento de filtro. Se o volume de
líquido em produto é mais de 500ml, transferir assepticamente não menos de
500ml de cada não menos de 10 recipientes, através de cada um dos
equipamentos , ou não menos de 20 recipientes quando usa-se somente um
equipamento de filtro. Imediatamente passar cada amostra através do filtro
com ajuda de vácuo ou pressão.
Em alguns casos quando o liquido é altamente viscoso e não rapidamente
filtrável através de uma ou duas membranas, podem necessitar mais de dois
equipamentos de filtros nestes casos, a metade do número de membranas usadas
se incubam em cada meio, considerando que se cumpra com os volumes e
requisitos para o número de envasamentos por meio.
Se o produto é bacteriostático ou fungistático, enxaguar as membranas com
três porções de 100 ml de liquido de lavado A.
Nota: Liquido de lavado A
Dissolver 1g de Digesto Péptico de Tecido Animal (Peptona Bacteriológica),
em quantidade suficiente de água para atingir a 1 litro. Clarificar por
filtração, ou centrifugado e ajustar o pH a 7,1 +/-0,2. Fracionar em
quantidade de 100 ml e esterilizar por vapor.
Retirar assepticamente as membranas do suporte, cortá-las pela metade (se
somente usar uma)submergir a membrana, ou sua metade em 100 ml de Meio de
Digesto de Semente de Soja-Caseína, e incubar entre 20° e 25° não menos de 7
dias. Em forma similar, submergir a outra membrana, ou a outra metade em 100
ml de Meio Fluido Tioglicolato e incubar entre 30° e 35° não menos de 7
dias.
M-4.5 Interpretação dos resultados
M-4.5.1 Primeiro Passo
Nos intervalos indicados durante e na conclusão do período de incubação,
examinar o conteúdo de todos os recipientes para observar crescimento
microbiano, assim como o desenvolvimento de turbidez e/ou crescimento de
superfície. Se não se observar crescimento, o produto analisado cumpre com
os requisitos do ensaio de esterilidade.
Se houver crescimento, porém a revisão do lugar onde se realiza o ensaio de
esterilidade, dos materiais usados, dos procedimentos de ensaio e dos
controles negativos, indica que pode haver uma técnica inadequada ou um mal
manejo asséptico no ensaio. O Primeiro Passo é declarado inválido e deve ser
repetido.
Se for observado crescimento microbiano, porém não há evidência que invalide
o primeiro passo do ensaio, proceder com o segundo passo.
M-4.5.2 Segundo Passo
O número mínimo de amostras exigidas é o dobro do número analisado em
Primeiro Passo. Os volumes mínimos analisados de cada amostra e os meios e
períodos de incubação são os mesmos que os indicados para o Primeiro Passo.
Se não houver crescimento microbiano, o produto analisado cumpre os
requisitos de ensaio de esterilidade. Se houver crescimento microbiano, o
resultado assim obtido é conclusivo de que o produto analisado não cumpre
com os requisitos do ensaio de esterilidade.
Entretanto, caso se possa demonstrar que o Segundo Passo, for invalidado
devido a uma técnica asséptica defeituosa ou inadequada na realização de
ensaio, o Segundo Passo pode ser repetido.
Nota: Toda vez que houver crescimento microbiano, proceder-se-á o seu
isolamento e identificação. Em caso de ser encontrado o mesmo microorganismo
em mais de um ensaio, sem importar o passo da análise, considerar-se-á que o
produto analisado não cumpre com os requisitos do Ensaio de Esterilidade.
M-5 ENSAIOS DE REATIVIDADE BIOLÓGICA
Estabelece-se a continuação dos tipos de ensaios de reatividade biológica
"in vitro" e "in vivo".
O cumprimento do ensaio "in vitro" exime a realização do ensaio "in vivo".
Pode-se observar o primeiro e efetuar somente o ensaio "in vivo".
M-5.1 Ensaio de reatividade biológica "in vitro".
M-5.1.1 Condições Gerais
O seguinte ensaio é aplicado para determinar a reatividade biológica de
cultivos de células de mamíferos depois do contato com plásticos
elastoméricos e outros materiais poliméricos.
É essencial dispor de superfície especifica para a extração.
Quando a superfície da amostra não pode ser determinada, utilizar 0,1 g de
elastômero, ou 0,2 g de material plástico, ou outro material por cada ml de
líquido de extração.
Também é essencial ter cuidado na preparação das amostras, para evitar
contaminação com microorganismos ou outros materiais estranhos.
M-5.1.2 Padrão de referência
Padrão de referência para controles negativos de plásticos USP.
Padrão de referência de sólidos de biorreação positiva USP.
Padrão de referência de extratos de biorreação positiva USP.
M-5.1.3 Preparação do cultivo celular
Preparar múltiplos cultivos de fibroblastos de mamífero L-929 (linha celular
ATCC CCL 1, clon NCTC 929) em meio essencial mínimo, suplementado com soro,
com uma densidade de semeadura de aproximadamente 10 células por ml. Incubar
os cultivos a 37°C+/- 1°C até 24 horas em uma atmosfera de 5+/-1% de dióxido
de carbono em ar, até obter uma monocapa, com uma confluência maior de 80%.
Examinar os cultivos preparados sob o microscópio para assegurar monocapas
uniformes, quase confluentes.
(NOTA: a reprodutibilidade dos ensaios de reatividade biológica "in vitro"
depende da obtenção de uma densidade de cultivo uniforme).
M-5.1.4 Solventes de extração
Usar solução injetável de cloreto de sódio a 0,9%. Também podem ser
utilizados meios de cultura de células de mamífero sem soro, ou meios de
cultivo de células de mamífero suplementados com soro. Usa-se meio
suplementado com soro quando a extração é realizada a 37°C durante 24 horas.
M-5.1.5 Aparatos
Autoclave
Empregar um autoclave capaz de manter uma temperatura de 121°C +/-2°C,
equipado com um termômetro um manômetro, uma válvula, uma bandeja adequada
para acomodar os recipientes de prova acima do nível da água, e um sistema
de esfriamento de água que permita o esfriamento dos recipientes de ensaio
até aproximadamente 20°C, mas não abaixo dos 20°C, imediatamente depois do
ciclo de aquecimento.
Estufa
Utilizar uma estufa (preferencialmente um modelo de convecção mecânica), que
mantenha as temperaturas de operação na categoria de 50°C a 70°C, dentro de
+/-2°C.
Estufa de Cultivo
Utilizar uma estufa de cultivo capaz de manter uma temperatura a 37,7 +/-1°C
e uma atmosfera de 5+/-1% de dióxido de carbono em ar.
Nota: Caso se utilize tubos com tampa, não é necessário manter uma atmosfera
de dióxido de carbono na estufa de cultivo.
Envasamentos de Extração
Utilizar somente envasamentos como ampolas ou tubos de cultivo com tampa à
rosca, ou seu equivalente, de vidro Tipo I. Caso se usem tubos de cultivo ou
seu equivalente, fecha-se com a tampa a rosca com uma cobertura elastomérica
adequada. A superfície exposta da cobertura elastomérica deve estar
totalmente protegida com um disco sólido inerte de 50 a 75 um de espessura.
Pode ser fabricado um disco adequado a partir de politetrafluroetileno.
Preparação do aparato
Limpar cuidadosamente todo o material de vidro com mistura sulfocrômica e se
necessário com ácido nítrico aquecido, e seguido de enxágüe prolongado com
água estéril para injetáveis. Esterilizar os envasamentos e equipamentos
utilizados para a extração, transferência ou administração do material de
prova e seca-los por um processo adequado. Caso se use óxido de etileno como
agente esterilizante, deixá-los não menos de 48 horas para uma
desgaseificação completa.
M-5.1.6 Procedimento
Preparação da amostra para os extratos
Seguir o procedimento indicado no item M-5.2.2 Preparação das amostras.
Preparação dos extratos.
Seguir o procedimento indicado no item M-5.2.3 Preparação do Extrato, usando
solução injetável de cloreto de sódio a 0,9% ou meio de cultura de células
de mamífero, sem soro, como solventes de extração.
Nota: se a extração se realiza a 37° durante 24 horas, em uma estufa de
cultivo, usar o meio de cultura celular suplementado com soro.
M-5.1.7 Ensaio de difusão em Agar
Neste ensaio a capa de Agar atua como um apoio para proteger as células de
danos mecânicos, enquanto que permite a difusão de produtos químicos
extraíveis das amostras poliméricas. Os extratos de materiais que devem ser
analisados se aplicam a um pedaço de papel de filtro.
M-5.1.7.1 Preparação das amostras.
Usar extratos preparados em forma direta, ou usar porções de amostras de
ensaio que tenham superfícies achatadas até 100 mm² de superfície.
M-5.1.7.2 Procedimento
Preparar as monocapas em placas de 60mm de diâmetro, usando 7 ml de
Preparação de cultivo celular. Aspirar o meio de cultura das monocapas e
reemplacá-las com meio de cultura suplementado com soro que contenha 2% de
agar.
Colocar as superfícies achatadas da Preparação da amostra, Controle de
plásticos negativo USP (para ter um controle negativo), e um Extrato de
Biorreações Positiva USP, ou um Sólido Biorreações Positiva USP (para ter um
controle Positivo) em cultivos por duplicado em contato com a superfície de
agar solidificada. Incubar todos os cultivos até 24 horas a 37°C +/-1°C,
preferivelmente em uma estufa de cultivo umidificada contendo 5+/-1% de
dióxido de carbono. Examinar em cada cultivo a reatividade em torno de cada
amostra, Controle Negativo e Controle Positivo, sob microscópio, usando
corantes citoquímicos, se desejar.
M-5.1.8 Interpretação dos resultados
A reatividade biológica (degeneração e má formação celular) descreve e
qualifica em uma escala de 0 a 4 (ver tabela 1). Medir as respostas obtidas
com o Controle Negativo e o Controle Positivo. O ensaio é valido se a
resposta observada em padrão de referência corresponde ao grau de
reatividade biológica assinalado em cada um deles.
Medir a resposta obtida da Preparação da amostra.
A amostra cumpre com os requisitos do ensaio se em nenhum dos cultivos de
células expostas a ela, for observada mais que uma reatividade leve (Grau2).
Repetir o ensaio se não se confirmar sua validade.
TABELA 1
GRAUS DE REATIVIDADE PARA O ENSAIO DE DIFUSÃO EM AGAR
Grau Reatividade Descrição da zona de Reatividade
0 Nenhuma Não há zona detectável ao redor de ou debaixo da amostra
1 Fraca Zona limitada a área debaixo da amostra
2 Leve Zona que se estende menos de 0,5 cm além da amostra
3 Moderada Zona que se estende de 0,5 a 1,0 cm além da amostra
4 Severa Zona que se estende mais de 1,0 cm desde a amostra, porém
não inclui o disco completo
M-5.2 Ensaio de reatividade biológica "in vivo".
Os seguintes ensaios são empregados para determinar a resposta biológica de
animais, frente a materiais plástico e outros materiais polimétricos,
utilizados no envasamento das SPGV, através da injeção de extratos
preparados a partir do material em ensaio.
M-5.2.2 Preparação da amostra
M-5.2.2.1 Quantidade de amostra
Espessura do material Quantidade de amostra para
Subdivisão
plástico (mm) cada 20ml de solução extrativa (mm)
< 0,5 120cm² de superfície total 50 x
3
(combinadas ambas as fases)
0,5 a 1 60cm² de superfície total
50 x 3
(combinadas ambas as fases)
M-5.2.2.2 Soluções extrativas
Solução fisiológica para injetável.
Solução 1:20 de álcool em solução fisiológica para injetável.
M-5.2.2.3 Preparação do extrato
Colocar a amostra subdividida em um frasco de vidro limpo e estéril de 100
ml de capacidade. Lavar duas vezes com aproximadamente 70 ml de água para
injetáveis, agitando por 30 segundos em cada lavada e eliminando
completamente a água de lavagem. Adicionar o frasco de vidro contendo a
amostra, 20 ml de solução extrativa requerida no ensaio, preparar um extrato
com a amostra em ensaio e um de extrato controle negativo. Realizar a
extração por aquecimento em autoclave a 121°C, durante 60 minutos ou em
estufa a 70°C durante 24 horas, ou a 50°C, durante 72 horas. As condições de
extração não devem causar alterações físicas como fusão, ou aglutinação dos
pedaços de material plástico, pois isto provocará uma redução da área
superficial. Uma leve aderência pode ser tolerada.
Esfriar a temperatura ambiente até 22°C. Agitar vigorosamente por alguns
minutos e transferir, imediatamente, cada extrato a um recipiente seco e
estéril em forma asséptica. Armazenar os extratos a uma temperatura entre 22
e 30°C, e utilizá-los dentro de 24 horas no máximo.
M-5.2.3 Ensaio de injeção sistêmica intravenosa.
M-5.2.3.1. Procedimento
Utilizar ratos albinos, saudáveis, não utilizados anteriormente em ensaios,
e com peso entre 17 e 23 gramas. Para cada grupo de ensaio, utilizar ratos
de uma mesma origem. Fornecer água e alimento apropriados para animais de
laboratório.
Inocular cada extrato e seu correspondente controle negativo em cada grupo
de cinco ratos, em quantidade e vias de administração que se detalha a
seguir.
Solução extrativa Doses/quilo de Via
Velocidade de
peso corporal
inoculação(ml/seg)
Solução fisiológica 50 ml EV 0,1
Solução 1:20 de álcool 50 ml EV 0,1
em solução fisiológica
Nota: EV = endovenosa
M-5.2.3.2 Interpretação
Depois da inoculação, observar os animais 4,24,48 e 72 horas. Se durante o
período de observação nenhum dos animais inoculados com o extrato da amostra
apresentam um grau de reação maior que os animais inoculados com extrato
controle, a amostra é considerada satisfatória no que se refere ao ensaio.
Se algum animal injetado com o extrato da amostra apresentar um leve sinal
de toxicidade, e não mais de um animal apresentar graves sintomas de
toxicidade ou morte, repetir o ensaio utilizando grupos de 10 ratos cada um.
Depois de repetir o ensaio a amostra é considerada satisfatória se nenhum
dos animais injetados com o extrato da amostra apresenta um grau de reação
maior que o observado nos animais injetados com o extrato controle.
M-5.2.4 Ensaio intracutâneo
M-5.2.4.1 Procedimento
Utilizar coelhos albinos saudáveis, de pele sensível e não utilizados
anteriormente em ensaios. Os coelhos devem ser cuidadosamente raspados no
dia do ensaio, em ambos os lados da coluna vertebral, e sua pele deve estar
livre de irritação ou traumas.
Remover os pelos soltos por meio de aspiração e se necessário, limpar a pele
com algodão embebido com álcool diluído a 70% e deixar secar antes de
iniciar a inoculação.
Agitar vigorosamente cada extrato armazenado segundo o descrito no item
M-5.1, antes de preparar as doses a serem inoculadas.
Inocular, por via intradérmica 0,2 ml de extrato de amostra em cada um dos
10 pontos de inoculação de um lado da coluna vertebral, em dois coelhos. Do
mesmo modo, injetar 0,2 ml de extrato controle correspondente à 5 pontos do
outro lado da coluna vertebral deste mesmos coelhos.
M-5.2.4.2 Interpretação
Examinar os lugares inoculados 24,48 e 72 horas depois da inoculação para
comprovar a presença de uma reação do tecido tal como eritema, edema ou
necrose. Evitar tocar os pontos de inoculação durante a manipulação e
observação do animal.
Para facilitar a observação passar somente um algodão embebido com álcool
diluído a 70% sobre a pele do animal.
Classifica-se as reações do extrato da amostra em relação com o extrato
controle, de acordo com a seguinte escala numérica:
Evolução das reações da pele
Formação de eritema ou crosta Valor
ausência de eritema 0
ligeiro eritema quase imperceptível 1
eritema bem definido 2
eritema moderado a severo 3
eritema severo (com ligeira crosta) 4
Formação de edema Valor
ausência de edema 0
edema quase imperceptível 1
edema ligeiramente com bordas bem definidas 2
edema moderado (elevado aproximadamente 1mm) 3
edema severo (elevado mais de 1mm e estendido
mais à área de inoculação) 4
O resultado médio do extrato da amostra não deve ser maior que o resultado
médio do extrato controle.
No caso de a média ser superior ou igual, repetir o ensaio. Usar extrato
recente em outros três animais. O critério de aceitação é o mesmo.
M-6 Ensaio de contaminação microbiana
M-6.1. Considerações gerais.
Este ensaio é utilizado para determinar o número total de microorganismos
e/ou a presença de microorganismos injetáveis em produtos não estéreis.
M-6.2. Contagem total de microorganismos aeróbicos viáveis.
Determinar a contagem total de aeróbicos viáveis pelo método de filtração
por membrana, ou método de contagem em placa, ou pelo método de diluição
seriada segundo se determina.
Realizar a determinação sob condições determinadas como para evitar a
contaminação acidental do produto a serem examinados. As precauções tomadas
para evitar a contaminação devem ser tais que não afetem nenhum
microorganismo que deva ser revelado no ensaio.
A menos que se estabeleça de outra maneira, usar 10g ou 10ml do produto a
examinar, tomados com as precauções referidas anteriormente. Para obter a
quantidade requerida, misturar várias porções elegidas aleatóriamente a
partir do material a granel, ou do conteúdo de número suficiente de
recipientes.
Dependendo da natureza do produto a ser examinado, diluir, dissolver,
suspender ou emulsionar usando um líquido adequado. Eliminar qualquer
propriedade antimicrobiana do produto a examinar por diluição, neutralização
ou filtração.
Devem ser utilizados graus adequados de diluição de forma que o número de
unidades formadoras de colônias esteja dentro dos limites assegurados para o
método utilizado.
M-6.2.1 Preparação do produto
Produtos solúveis em água -
Dissolver ou diluir 10g ou 10ml do produto a examinar em solução tampão
cloreto de sódio-peptona pH 7,0 (6.4.1) ou outro líquido adequado que
demonstrará não possuir atividade antimicrobiana nas condições do teste, e
ajustar o volume a 100 ml com o mesmo líquido. Se necessário ajustar
aproximadamente pH7. Obs:
Pelas características de alguns produtos pode-se necessitar do uso de
maiores volumes.
Produtos não graxos insolúveis em água.
Suspender 10g ou 10 ml do produto a examinar em solução tampão cloreto de
sódio-peptona pH 7,0 ou outro líquido adequado, que tenha demonstrado não
ter nenhuma atividade antimicrobiana em condições do ensaio e diluir a 100
ml com o mesmo líquido. Se necessário, dividir o produto a examinar e
homegenizar a suspensão mecanicamente. Pode-se adicionar um agente
tensoativo adequado como 0,1 por centro m/V de polisorbato 80, para ajudar a
suspensão de substâncias pouco umectáveis. Se necessário ajustar a suspensão
aproximadamente pH 7. Obs: Pelas características de alguns produtos pode-se
necessitar do uso de maiores volumes.
Produtos graxos.
Homogeneizar 10 g ou 10 ml do produto a examinar com 5 g de polisorbato 20,
ou polisorbato 80, e aquecer não mais de 40ºC se necessário. Misturar
cuidadosamente enquanto se mantém a temperatura em banho-maria ou em um
forno.
Adicionar 85 ml de solução tampão cloreto de sódio-peptona pH 7,0
aquecida até 40ºC se necessário. Manter esta temperatura por um tempo mais
curto possível, para a formação de uma emulsão e em qualquer caso durante
até 30 minutos. Se necessário ajustar a emulsão aproximadamente pH 7. Obs:
Para alguns produtos, pode ser necessário aquecer até 45ºC durante o menor
tempo possível.
M-6.2.2 Procedimento para o ensaio.
M-6.2.2.1 Filtração por membrana.
Usar membranas filtrantes que tenham um tamanho de poro nominal até 0,45 nm
e cuja efetividade para reter bactérias tenha sido estabelecida. Os filtros
de nitrato de celulose, por exemplo, são utilizados para soluções aquosas,
oleosa e levemente alcoólicas, e os filtros de acetato de celulose, por
exemplo, para soluções fortemente alcoólicas.
O método que se descreve considera que se usam membranas de aproximadamente
50 mm de diâmetro. Caso se usem filtros de um diâmetro diferente, aos
volumes da diluição e de lavado devem ser ajustados. O aparato de filtração
e as membranas devem ser esterilizados por meios apropriados. O aparato deve
ser desenhado de forma que a solução a examinar possa introduzir-se e
filtrar-se sobre condições assépticas e deve permitir a remoção da membrana
para logo transferi-la ao meio de cultura. Transferir 10 ml ou a quantidade
de cada diluição representando 1g do produto a ser examinado a cada uma das
membranas filtrantes e filtrar imediatamente.
Se necessário diluir o produto preparado, de forma tal que possa esperar uma
contagem de colônias entre 10 a 100. Lavar cada membrana passando através do
filtro ao menos três porções, cada uma de aproximadamente 100 ml, de um
líquido adequado com solução tampão de cloreto de sódio-peptona pH 7,0.
Para substâncias graxas este líquido pode conter um agente tensoativo como
polisorbato 20, ou polisorbato 80. Transferir uma das membranas filtrantes,
destinadas principalmente para a enumeração das bactérias, a superfície de
uma placa de agar B e a outra, destinada principalmente para a enumeração de
fungos, a superfície de uma placa de agar C. Incubar a placa de agar B a
30ºC - 35ºC, durante 5 dias, e a placa de agar C a 20ºC - 25ºC durante 5
dias, a menos que se obtenha uma contagem mais confiável em um tempo mais
curto. Contar o número de colônias que se desenvolva. Calcular o número de
microorganismos por grama ou por mililitro do produto a examinar e, se
necessário contar as bactérias e fungos separadamente.
M-6.2.2.2 Contagem em placa
Para Bactérias. -
Usando placas de Petri de 9 cm e 10 cm de diâmetro, adicionar à cada placa
uma mistura de 1 ml de produto já preparado para seu exame em a) e
aproximadamente 15 ml de agar B fundido, até 45ºC. Como opção alternativa
distribuir o produto preparado sobre a superfície do meio solidificado em
uma placa de Petri do mesmo diâmetro. Se necessário, diluir o produto
preparado como descrito antes, de forma que pode ser esperada uma contagem
de colônias de até 300. Preparar ao menos duas destas placas de Petri usando
a mesma diluição e incubar a 30ºC, durante 5 dias, a menos que se obtenha
uma contagem mais confiável em um tempo mais curto. Contar o número de
colônias que se desenvolve. Calcular os resultados, usando placas com maior
número de colônias, mas considerando 300 colônias por placa como o máximo
aceitável com uma boa avaliação.
Para Fungos. -
Usando placas de Petri de 9 cm a 10 cm de diâmetro, adicionar a cada placa
uma mistura de 1 ml do produto já preparado para seu exame em a) e
aproximadamente 15 ml de agar C fundido, até 45ºC. Como opção alternativa,
distribuir o produto preparado sobre a superfície do meio solidificado em
uma placa de Petri do mesmo diâmetro. Se necessário, diluir o produto
preparado como descrito anteriormente de forma que possa esperar-se uma
contagem de colonias de até 100. Preparar ao menos duas destas placas usando
a mesma diluição e incubar a 20ºC-25ºC, durante 5 dias, a menos que se
obtenha uma contagem mais confiável em um tempo mais curto. Contar as
colônias que se desenvolveram. Calcular os resultados usando placas com até
100 colônias.
M-6.2.2.3 Diluição Seriada. -
Preparar uma série de doze tubos, cada um contendo entre 9 ml a 10 ml de
caldo A. A cada um dos primeiros três tubos, adicionar um ml do produto
diluído, dissolvido e homogeneizado na proporção 1 em 10, como anteriormente
descrito. Aos três tubos seguintes, adicionar 1 ml de uma diluição 1 em 100
do produto, e aos três tubos seguintes adicionar 1 ml de uma diluição 1 em
1000 do produto. Aos últimos três tubos, adicionar 1 ml do diluente. Incubar
os tubos a 30ºC - 35ºC, ao menos durante 5 dias. Os últimos três tubos não
devem mostrar crescimento microbiano. Se a leitura dos resultados é difícil
ou incerta devido a natureza do produto a examinar, subcultivar, em um meio
líquido, ou sólido e ler os resultados depois de outro período de incubação.
Determinar o número mais provável de microorganismos por grama, ou por
mililitro do produto a examinar, a partir da Tabela I.
TABELA I
Número mais provável de microorganismos
Número de tubos onde se vê Número mais provável
de
crescimento microbiano para cada microorganismos por
grama
quantidade de produto a examinar ou por mililitro
100 mg 10 mg 1 mg
ou 0,1 ml ou 0,01 ml ou 0,001 ml
por tubo por tubo por tubo
3 3 3 maior de 1100
3 3 2 1100
3 3 1 500
3 3 0 200
3 2 3 290
3 2 2 210
3 2 1 150
3 2 0 90
3 1 3 160
3 1 2 120
3 1 1 70
3 1 0 40
3 0 3 95
3 0 2 60
3 0 1 40
3 0 0 23
Se para a primeira coluna o número dos tubos que demonstra crescimento
microbiano é de dois ou menos, o número mais provável de microorganismos por
grama, ou por mililitro, é provavelmente menor que 100.
M-6.2.3 Efetividade dos meios de cultura e validade dos métodos de contagem
Quando for necessário, operar da seguinte forma: fazer crescer as seguintes
cepas de ensaio, separadamente, em tubos contendo Caldo A a 30ºC-35ºC,
durante 18 horas, a 24 horas ou, para Candida albicans, a 20ºC-25ºC, durante
48 horas.
Staphylococcus aureus como ATCC 6538 P (NCIB 8625, CIP 53.156) ou
ATCC 6538 (NCIB 9518, CIP 4,83)
Bacillus subtilis como ATCC 6633 (NCIB 8054, CIP 52.62)
Escherichia coli como ATCC 8739 (NCIB 8545, CIP 53.126)
Candida albicans como ATCC 2091 (CIP 1180.79)
ou ATCC 10231 (NCPF 3179, CIP 48.72)
Diluir porções de cada um dos cultivos, usando solução tampão de cloreto de
sódio-peptona pH 7,0 para fazer suspensões de ensaio contendo em torno de
100 microorganismos viáveis por mililitro.
Usar a suspensão de cada um dos microorganismos separadamente como controle
dos métodos de contagem em presença e ausência dos produtos a examinar, se
necessário.
Quando se ensaia o método não se deve obter para qualquer dos organismos de
ensaio, uma contagem que difere em mais de um fator de 10 do valor calculado
para o inócuo. Para ensaiar a esterilidade do meio e do diluente e da
condição asséptica do ensaio, realizar o método de contagem total de
aeróbicos viáveis, usando solução tampão de cloreto de sódio-peptona pH 7.0
como preparação de ensaio. Não deve haver crescimento de microorganismos.
M-6.2.4 Interpretação dos resultados
Estabelecido um limite, o mesmo estará indicado na monografia individual
correspondente. Quando o limite é indicado em forma exponencial deverá ser
interpretado da seguinte maneira:
10² microorganismos - limite máximo de aceitação: 5 x 10²;
10³ microorganismos - limite máximo de aceitação: 5 x 10³; etc.
M-6.3 Ensaios para a procura de microorganismos específicos
M-6.3.1 Enterobacterias e outras bactérias Gram negativas
M-6.3.1.1 Detecção de bactérias
Preparar o produto a examinar como se descreve em 6.2.1, mas usando caldo D
em lugar de soluções tampão de cloreto de sódio-peptona pH 7.0. Homogeneizar
e incubar a 35ºC - 37ºC durante um tempo suficiente para reviver as
bactérias, mas não tanto para permitir a multiplicação dos organismos
(geralmente 2 horas, mas não mais de 5 horas). Agitar o recipiente,
transferir a quantidade do conteúdo (homogeneizado a) correspondente a 1g ou
1 ml do produto a 100 ml de Caldo de enriquecimento E, e incubar a 35ºC -
37ºC durante 18 horas a 48 horas. Subcultivar em placas de agar F. Incubar a
35ºC - 37ºC, durante 18 horas a 24 horas. O produto passa no ensaio se não
houver crescimento de colônias de bactérias gram negativas em nenhuma placa.
M-6.3.1.2 Avaliação quantitativa
Inocular quantidades adequadas de Caldo do enriquecimento E como o
(homogeneizado a) e /ou diluições deste, contendo respectivamente 1,0g, 0,1g
e 0,01g ou 1,0 ml, 0,1 ml e 0,01 ml do produto a examinar. Incubar a 35ºC -
37ºC, durante 24 horas a 48 horas. Subcultivar cada um dos cultivos em uma
placa de agar F para obter um isolamento seletivo. Incubar a 35ºC - 37ºC
durante 18 horas a 24 horas. O crescimento de colônias bem desenvolvidas,
geralmente vermelhas a avermelhadas, de bactérias gram negativas, contitui
um resultado positivo. Registrar a menor quantidade de produto que dá um
resultado positivo e a maior quantidade que dá um resultado negativo.
Determinar a partir da Tabela II o número provável de bactérias.
TABELA II
Resultados para cada quantidade de Número
provável
produto de bactérias
por
grama de produto
1,0 g ou 0,1 g ou 0,01 g ou
1,0 ml 0,1 ml 0,01 ml
+ + + mais de 10²
+ + - menos de 10²
e
mais de 10
+ - - menos de 10
e
mais de 1
- - - menos de 1
M-6.3.2 Escherichia coli
Transferir a quantidade do cultivo em caldo D, preparado e incubado para o
ensaio para enterobactérias e outras bactérias gram negativas, que
represente 1g ou 1 ml de produto inicial a 100 ml de Caldo G, e incubar a
43ºC - 45ºC durante 18 horas a 24 horas. Subcultivar em agar H e incubar a
43ºC - 45ºC durante 18 horas a 24 horas. O crescimento de colonias
vermelhas, geralmente não mucóides de bastonetes gram negativos, às vezes
rodeados por uma zona de precipitação avermelhada, indica a possível
presença de E.coli. Isto pode ser confirmado pela formação de indol a 44 ±
0,5ºC e por outras reações bioquímicas. O produto passa o ensaio se essas
colônias não são vistas ou se a reações bioquímicas confirmatórias são
negativas.
M-6.3.3 Salmonella
Incubar uma quantidade que represente 10g ou 10 ml do produto, em caldo D a
35ºC=37ºC, durante 5 horas a 24 horas, para o enriquecimento. Transferir 10
ml do cultivo de enriquecimento a 100 ml de Caldo I e incubar a 42ºC - 43ºC,
durante 18 horas a 24 horas. Subcultivar em ao menos dois diferentes meios
de agar escolhido entre agar J, agar K e agar L. Incubar a 35ºC-37ºC,
durante 24 horas a 48 horas. A provável presença de salmonelas está indicada
pelo crescimento de cultivos que tem o seguinte aspecto:
agar J:
colônias bem desenvolvidas, incolores.
agar K:
colônias bem desenvolvidas, vermelhas, com ou sem centros negros.
agar L:
colônias pequenas, transparentes, incolores ou rosas, a branco opaco,
geralmente rodeadas de uma zona rosa ou vermelha.
Transferir separadamente algumas das colônias em suspeita a um agar M, em
tubos, usando inoculação de superfície e profunda. A presença de salmonetas
é provisoriamente confirmada se numa inoculação profunda, mas não em cultura
de superfície tenha uma troca de cor deste vermelho a amarelo e geralmente
formação de gás, com ou sem produção de sulfeto de hidrogênio no agar. A
confirmação precisa pode ser realizada pelos ensaios bioquímicos e
sorológicos adequados. O produto passa o ensaio se os cultivos do tipo
descrito não aparecem ou se os ensaios confirmatórios bioquímicos e
sorológicos são negativos.
M-6.3.4 Pseudomonas aeruginosa
Inocular 100 ml de Caldo A com 10 ml do produto preparado para seu exame em
6.2.1 (Preparação do produto), ou a quantidade do mesmo que representa 1g ou
1 ml do produto inicial. Misturar e incubar a 35ºC - 37ºC, durante 24 horas
a 48 horas. Subcultivar em uma placa de agar N e incubar a 35ºC - 37ºC,
durante 24 horas a 48 horas. Se não se detecta crescimento de
microorganismos, o produto passa no ensaio. Se ocorre crescimento de
colônias de bastonetes gram negativos, geralmente com uma fluorescência
esverdeada realizar um ensaio de oxidase e analisar o crescimento em Caldo A
a 42ºC. O produto passa o ensaio se os cultivos do tipo descrito não
aparecem ou se o ensaio bioquímico confirmatório é negativo.
M-6.3.5 Staphylococcus aureus
Preparar um cultivo de enriquecimento como se descreve para Ps, aeruginosa.
Subcultivar em um meio adequado como placas de agar O. Incubar a 35ºC -
37ºC, durante 24 horas a 48 horas. Se não se detecta crescimento de
microorganismos, o produto passa o teste. Colônias negras de cocos gram
positivos geralmente rodeados de zonas claras podem indicar a presença de S,
aureus. Para os cocos catalase positivos, a confirmação pode ser efetuada
por exemplo por ensaios de coagulase e desoxiribonuclease. O produto passa
no ensaio se os cultivos do tipo descrito não aparecem ou se os ensaios
bioquímicos confirmatórios são negativos.
M-6.3.6 Propriedades nutritivas e seletivas dos meios e validade do ensaio
para microorganismos específicos.
Quando for necessário operar da seguinte maneira: Fazer crescer a seguintes
cepas de ensaio separadamente em tubos que contém os meios indicados a 30ºC
- 35ºC, durante 18 horas a 24 horas.
Staphylococcus aureus como ATCC 6538P Caldo A
(NCIB 8625, CIP 53.156)
ou ATCC 6538
(NCIB 9518, CIP 4.83)
Pseudomonas aeruginosa como ATCC 9027 Caldo A
(NCIB 8626, (CIP 82.118)
Escherichia coli como ATCC 8739 Caldo D
(NCIB 8545, CIP 53.126)
Salmonella typhimurium (1) Caldo D
(1) Não se recomenda número de cepa. Pode usar-se também uma salmonella não
patogênica para o homem como Salmonella abony (NCTC 6017, CIT80.39).
Diluir porções de cada um dos cultivos usando solução tampão de cloreto de
sódio-peptona pH 7,0 para fazer suspensões de ensaio que contenham
aproximadamente 1000 microorganismos viáveis por mililitro. Misturar volumes
iguais de cada suspensão e usar 0,4 ml (aproximadamente 100 microorganismos
de cada cepa) como um inóculo nos ensaios para E.coli, salmonelas,
Ps.aeruginosa e S.aureus, em presença e ausência do produto a ser examinado
se necessário. Quando se ensaia o método deve obter-se um resultado positivo
para o respectivo microorganismo.
M-6.4 Solução e meios de cultura recomendados
A seguinte solução e meios de cultura encontram-se satisfatórios aos efeitos
para os quais se recomenda o ensaio para contaminação microbiana. Podem
utilizar-se outros meios desde que tenham similares propriedades nutritivas
e seletivas para os microorganismos a analisar.
M-6.4.1 Solução tamponada de cloreto de sódio-peptona pH 7.0
Fosfato diácido de potássio 3,56 g {Equivalente a 0,067M
Fosfato disódico dihidratado 7,23 g
Cloreto de sódio 4,30 g
Peptona (de carne ou caseína) 1,0 g
Água purificada 1000 ml
Pode ser adicionado 0,1 por cento m/V a 1.0 por cento m/V de polisorbato 20
ou 80. Esterilizar por aquecimento em um autoclave a 121ºC, durante 15
minutos.
M-6.4.2 Caldo A (meio digesto de caseína semente de soja)
Digesto pancreático de caseína 17,0 g
Digesto papaico de semente de
soja 3,0 g
Cloreto de sódio 5,0 g
Fosfato dipotássico 2,5 g
Dextrose monohidratada 2,5 g
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois da esterilização seja de 7,3 ± 0,2.
Esterilizar por calor em um autoclave a 121ºC durante 15 minutos.
M-6.4.3 Agar B (agar digestgo e caseína semente de soja)
Digesto pancreático de caseína 15,0 g
Digesto pancreático de semente
de soja 5,0 g
Cloreto de sódio 5,0 g
Agar 15,0 g
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois de esterilização seja de 7,3 ± 0,2.
Esterilizar por calor em um autoclave a 121ºC durante 15 minutos.
M-6.4.4 Agar C (Agar Sabouraud-dextrose com antibióticos)
Peptonas (de carne e caseína) 10,0 g
Dextrose monohidrato 40,0 g
Agar 15,0 g
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois da esterilização seja de 5,6 ± 0,2.
Esterilizar por calor em um autoclave a 121ºC durante 15 minutos.
Imediatamente antes de seu uso agregar 0,10 g de benzilpenicilina sódica e
0,10 g de tetraciclina por litro de meio como solução estéreis,
alternativamente, agregar 50 mg de cloranfenicol por litro de meio antes da
esterilização.
M-6.4.5 Caldo D (Caldo Lactosado).
Extrato de carne 3,0 g
Digesto pancreático de gelatina 5,0 g
Lactose 5,0 g
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois da esterilização seja de 6,0 ± 0,2.
Esterilizar por calor em um autoclave a 121ºC durante 15 minutos e esfriar
imediatamente.
M-6.4.6 Caldo de enriquecimento E (Caldo de enriquecimento de
Enterobacterias-Mossel).
Digesto pancreático de gelatina 10,0 g
Dextrose monohidrato 5,0 g
Bilis de boi desidratada 20,0 g
Fosfato diácido de potássio 2,0 g
Fosfato ácido disódico dihidrato 8,0 g
Verde brilhante 15,0 mg
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois do aquecimento seja de 7,2 ± 0,2. aquecer a
100ºC durante 30 minutos e esfriar imediatamente.
M-6.4.7 Agar F (Cristal violeta, vermelho neutro, agar bilis com dextrose)
Extrato de levedura 3,0 g
Digesto pancreático de gelatina 7,0 g
Sales biliares 1,5 g
Lactose 10,0 g
Cloreto de sódio 5,0 g
Dextrose monohidrato 10,0 g
Agar 15,0 g
Vermelho neutro 30,0 mg
Cristal violeta 2 mg
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois do aquecimento seja de 7,4 ± 0,2. Aquecer
até ebulição: não aquecer em autoclave.
M-6.4.8 Caldo G (Caldo MacConkey)
Digesto pancreático de gelatina 20,0 g
Lactose 10,0 g
Bilis de boi deshidratada 5,0 g
Purpura de bromocresol 10,0 mg
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois da esterilização seja de 7,3 ± 0,2.
Esterilizar por calor em um autoclave a 121ºC durante 15 minutos.
M-6.4.9 Agar H (Agar MacConkey)
Digesto pancreático de gelatina 17,0 g
Peptonas (carne e caseína) 3,0 g
Lactose 10,0 g
Cloreto de sódio 5,0 g
Sais biliares 1,5 g
Agar 13,5 g
Vermelho neutro 30 mg
Cristal violeta 1 mg
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois da esterilização seja de 7,1 ± 0,2. Ferver
durante 1 minuto com agitação constante, em seguida, esterilizar por
aquecimento em um autoclave a 121ºC, durante 15 minutos.
M-6.4.10 Caldo I (Caldo de tetrationato bilis verde brilhante)
Peptona 8,6 g
Bilis de boi, dissecada 8,0 g
Cloreto de sódio 6,4 g
Carbonato de cálcio 20,0 g
Tetrationato de potássio 20,0 g
Verde brilhante 70 mg
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois de aquecido seja de 7,0 ± 0,2. Aquecer até
ebulição. Não reaquecer.
M-6.4.11 Agar J (Agar desoxicolato citrato)
Extrato de carne 10,0 g
Peptona de carne 10,0 g
Lactose 10,0 g
Citrato de sódio 20,0 g
Citrato férrico 1,0 g
Desoxicolato de sódio 5,0 g
Agar 13,5 g
Vermelho neutro 20,0 mg
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois do aquecimento seja de 7,3 ± 0,1. Aquecer
suavemente até ebulição e ferver durante 1 minuto. Esfriar a 50ºC, e verter
em placas de Petri. Não aquecer em autoclave.
M-6.4.12 Agar K (Agar xilose, lisina, desoxicolato).
Xilose 3,5 g
L-Lisina 5,0 g
Lactose 7,5 g
Sacarose 7,5 g
Cloreto de sódio 5,0 g
Extrato de levedura 3,0 g
Vermelho fenol 80 mg
Agar 13,5 g
Desoxicolato de sódio 2,5 g
Tiossulfato de sódio 6,8 g
Citrato férrico amoniacal 0,8 mg
Água purificada 1000 ml
Ajustar o pH de forma que depois do aquecimento seja de 7,4 ± 0,2. Aquecer
até ebulição e esfriar a 50ºC e verter em placas de Petri. Não aquecer em
autoclave.
M-6.4.13 Agar L (Agar verde brilhante-vermelho fenol - lactose - sacarose)
Peptonas (Carne e caseína) 10,0 g
Extrato de levedura 3,0 g
Cloreto de sódio 5,0 g
Lactose 10,0 g
Sacarose 10,0 g
Agar 20,0 g
Vermelho fenol 80 mg
Verde brilhante 12,5 mg
Água purificada 1000 ml
Aquecer a ebulição durante 1 minuto. Ajustar o pH de forma que depois da
esterilização seja de 6,9 ± 0,2. Imediatamente antes de usar esterilizar por
calor em um autoclave a 121ºC durante 15 minutos, esfriar a 50ºC e verter em
placas de Petri.
M-6.4.14 Agar M (Agar triplo açucar ferro)
Extrato de carne 3,0 g
Extrato de levedura 3,0 g
Peptonas (caseína e carne) 20,0 g
Cloreto de sódio 5,0 g
Lactose 10,0 g
Sacarose 10,0 g
Dextrose monohidrato 1,0 g
Citrato férrico amoniacal 0,3 g
Tiosulfato de sódio 0,3 g
Vermelho fenol 25 mg
Agar 12,0 mg
Água purificada 1000 ml
Aquecer até ebulição durante 1 minuto com agitação. Ajustar o pH de forma
que depois da esterilização seja de 7,4 ± 0,2. Encher tubos até um terço de
sua altura, esterilizar por calor em um autoclave a 121ºC, durante 15
minutos e deixar esfriar em uma posição que de uma porção profunda e uma
superfície pendente.
M-6.4.15 Agar N (Agar cetrimida)
Digesto pancreático de gelatina 20,0 g
Cloreto de magnésio 1,4 g
Sulfato dipotásico 10,0 g
Cetrimida 0,3 g
Agar 13,6 g
Água purificada 1000 ml
Glicerol 10,0 ml
Aquecer até ebulição durante 1 minuto com agitação. Ajustar o pH de forma
que depois da esterilização seja de 7,1 ± 0,2. Esterilizar por calor em
autoclave a 121ºC durante 15 minutos.
M-6.4.16 Agar O (Agar Baird-Parker)
Digesto pancreático de caseína 10,0 g
Extrato de carne 5,0 g
Extrato de levedura 1,0 g
Cloreto de litio 5,0 g
Agar 20,0 g
Glicina 12,0 g
Piruvato de Sódio 10,0 g
Água purificada 950 ml
Aquecer a ebulição durante 1 minuto, e agitar freqüentemente. Ajustar o pH
de forma que depois da esterilização seja de 6,8 ± 0,2. Esterilizar por
calor em autoclave a 121ºC durante 15 minutos. Esfriar a 45ºC a 50ºC e
adicionar 10 ml de uma solução estéril a 1 por cento m/V de telurito de
potássio a 50 ml de uma emulsão de gema de ovo.
(Of. nº 227/97)
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